高毒力肺炎克雷伯菌KPC.pdf

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)·3666·主垡匿堂苤鲞!!!堡堡!!旦!!旦笠!堡鲞笠塹塑盟墮!叢趟』堡!i塑:旦!!!坐墜竺!!:!!!!:∑!!:!!:墮!:塹碳青霉烯類抗生素耐藥K1型肺炎克雷伯菌一株的分離及耐藥機(jī)制分析張嶸王選呂建新【摘要】目的對(duì)臨床分離的1株碳青霉烯類抗生素耐藥K1型肺炎克雷伯菌進(jìn)行毒力及耐藥機(jī)制分析。方法采用Vitek2Compact全自動(dòng)微生物鑒定儀對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定;濃度梯度法(E-test)測(cè)定細(xì)菌對(duì)臨床常用抗生素的最低抑菌濃度(MIC);乙二胺四乙酸(EDTA)協(xié)同試驗(yàn)和改良Hodge試驗(yàn)分別檢測(cè)金屬酶和碳青霉

2、烯酶;聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增毒力基因K1、K2、K5、K20、K54、K57、rmpA、magA、wcaG和13內(nèi)酰胺類抗生素耐藥基因;接合試驗(yàn)檢測(cè)耐藥基因和毒力基因是否存在于質(zhì)粒上;接合子質(zhì)粒進(jìn)行PBRT質(zhì)粒分型;多位點(diǎn)序列分析(MLST)對(duì)該菌株進(jìn)行分子分型。結(jié)果藥敏結(jié)果顯示該菌株對(duì)臨床常用的頭孢類和碳青霉烯類抗生素耐藥;EDTA協(xié)同試驗(yàn)和改良Hodge試驗(yàn)顯示該菌株產(chǎn)碳青霉烯酶,不含金屬酶;PCR擴(kuò)增及序列分析發(fā)現(xiàn)該菌株攜帶耐藥基因blaKPC一2、blaCTX—M.15、6fⅡ帆M-1、blaSHV一1,同時(shí)

3、有毒力基因K1、moga、rmpA、wcaG;能通過(guò)接合試驗(yàn)將碳青霉烯耐藥基因傳遞到大腸埃希菌EC600,接合子未發(fā)現(xiàn)毒力基因存在;PBRT質(zhì)粒分型為Frep型質(zhì)粒;MLST分型為ST23型。結(jié)論產(chǎn)毒力基因的K1型肺炎克雷伯菌攜帶blaKPC-2碳青霉烯耐藥基因,該耐藥基因可以通過(guò)質(zhì)粒發(fā)生轉(zhuǎn)移。【關(guān)鍵詞】克雷伯菌,肺炎;毒力因子類;抗菌藥Isolationofacarbapenem-resistantK1serotypeKlebsieUapneumoniastrainandthestudyofresistancemech

4、anismZhang舶增,WangXuan,如JianxiraSchoolofLaboratoryMedicineand£扣Science,WenzhouMedicalUniversity,Wenzhou325035,ChinaCorrespondingauthor:眈Jianxin,Email:brigitte_zx@163.com【Abstract】0bjectiveTostudythevirulenceandmechanismofcarbapenemresistanceofaclinicalisolateofcar

5、bapenem·resistantK1serotypeKlebsiellapneumoniastrain.MethodsIdentificationofisolatewascarriedoutwithVITEK-2compactsystem.AntimicrobialsusceptibilitywasdeterminedbyE·test;MetalloB—lactamasesandcarbapenemasesscreeningwereconductedbyimipenem—EDTAdoublediscsynergytes

6、tandmodifiedHodgetest,respectively.Specificpolymerehsechainreaction(PCR)andDNAsequencingwerepreformedtodetectthevirulencegenesincludingKI,I(2,K5,K20,K54,K57,,№gA,rmpA,wcaGandaseriesofB—lactamaseresistencegenes.Conjunctionexperimentwasalsoperformed.Theplasmidsoftr

7、ansconjugantsweresubmittedtoPCR—basedreplicontyping(PBRT)method.Moleculartypingwasperformedbymultilocussequencetyping(MIST).ResultsAntimicrobialsusceptibilitytestingrevealedthattheKlebsiellapneumoniastrainwasresistanttomostoftheantibioticsusedinclinic.Phynotypeeo

8、nfirmaryrestrevealedtheproductionofcarbapanemases,whileMetalloB—lactamaseswerenegative;PCRandDNAsequencingconfirmedtheisolatewaspositiveforblaKPC-2,blaCTX—M一15

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