超高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定乳粉中的雙氰胺.pdf

《超高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定乳粉中的雙氰胺.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、第41卷分析化學(xué)(FENXIHUAX~)研究報(bào)告第11期2013年11月ChineseJournalofAnalyticalChemistryl729～1733DOI：10．3724／SP．J．1096．2013．30400超高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定乳粉中的雙氰胺馮峰蔣萍萍李娜思周洪斌儲(chǔ)曉剛(中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院，食品安全研究所，北京100123)(華東理工大學(xué)藥學(xué)院，上海200237)。(鎮(zhèn)江出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合技術(shù)中心，鎮(zhèn)江212008)摘要雙氰胺作為乳粉中一種新出現(xiàn)的污染物，對(duì)人體特別是

2、嬰幼兒的健康有重要影響。本研究建立了快速、準(zhǔn)確測(cè)定乳粉中雙氰胺的超高效液相色譜一電噴霧電離質(zhì)譜(UPLC-ESVMS)分析方法。結(jié)果表明，采用含2％氨水的乙腈對(duì)乳粉樣品進(jìn)行萃取，同時(shí)選用UPLCBEHHILIC(150Inm×2．1mm，1．7Ixm)色譜柱為固定相，以10mmol／L甲酸銨／甲酸緩沖液(pH4．0)一乙腈為流動(dòng)相，梯度洗脫，基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線定量分析，可以對(duì)5～200g／L雙氰胺樣品進(jìn)行快速準(zhǔn)確測(cè)定。在ESI正離子模式下，采用選擇離子監(jiān)測(cè)方法進(jìn)行測(cè)定時(shí)，乳粉中雙氰胺的檢出限為10

3、g／kg。加標(biāo)濃度在50，100和200g／kg樣品的回收率分別為83．7％，89．1％和96．7％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于2％。本方法快捷、準(zhǔn)確、靈敏度高，可用于乳粉中雙氰胺的快速準(zhǔn)確測(cè)定。關(guān)鍵詞超高效液相色譜；串聯(lián)質(zhì)譜；雙氰胺；乳粉；基質(zhì)效應(yīng)1引言雙氰胺(Dicyandiamide，DICY或DCD)，是氰胺的二聚體，化學(xué)式CHN，結(jié)構(gòu)式見圖1。近期，新西蘭官方通報(bào)其國(guó)內(nèi)的部分牛奶中檢出雙氰胺，原因是農(nóng)民將雙氰胺噴灑在牧草上，用于阻止肥料副產(chǎn)品硝酸鹽流入河流湖泊，結(jié)果奶牛卻因食用了此類牧草而造成

4、乳汁中含有微量雙氰胺_lJ?？紤]到高劑量的雙氰胺對(duì)人體，特別是嬰幼兒，具有較強(qiáng)的毒性效應(yīng)4~6l，我國(guó)的食品添加劑國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)禁止在乳粉中添加此種物質(zhì)j。因此，及時(shí)開展乳制品中雙氰胺分析檢測(cè)方法研究，對(duì)于準(zhǔn)確了解市場(chǎng)上乳粉中雙氰胺的含量水平，科學(xué)制定乳粉中雙氰胺的限量水平，都具有重要意義。對(duì)于雙氰胺的檢測(cè)方法僅有少量報(bào)道，主要方法有高效液相色譜一紫外分光光度法_8、液相色譜．質(zhì)譜法¨’等。由于乳粉中的雙氰胺含量通常較低，傳統(tǒng)的高效液相色譜法無法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。通過對(duì)已經(jīng)報(bào)道雙氰胺質(zhì)譜檢測(cè)法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)

5、證，發(fā)現(xiàn)其普遍存在著樣品回收率低、測(cè)定結(jié)果精密度差等不足。鑒于此，本研究對(duì)乳粉中雙氰胺檢測(cè)的樣品處理方法和儀器分析方法進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化，建立了一種可以對(duì)乳粉中雙氰胺進(jìn)行快速、準(zhǔn)確、高靈敏檢測(cè)的超高效液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜分析方法，本方法已成功用于市售乳粉中雙氰胺的檢測(cè)。2實(shí)驗(yàn)部分2．1儀器與試劑超高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司)串聯(lián)API5500三重四極桿質(zhì)譜儀(AppliedBiosystems，美國(guó))，配備WatersUPLC自動(dòng)進(jìn)樣器，柱溫箱。數(shù)據(jù)采集由Analyst1．5．1軟件

6、(AppliedBiosystems，美國(guó))完成。雙氰胺(Dicyandiamide，純度>99％，北京百靈威科技公司)；甲酸、甲酸銨(美國(guó)Sigma公司)；正己烷、乙腈(美國(guó)Fisher公司)；氨水(北京化學(xué)試劑公司)；實(shí)驗(yàn)室用水由Millipore純水儀制備。l0份乳粉樣品來自用戶送檢樣品。2．2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取雙氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，用水溶解并定容，配制成500mg／L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液2013-04-25收稿；2O13_08-22接受本文系科技部科技支撐計(jì)劃課題(No．201

7、1BAK10B04)和質(zhì)檢總局公益性行業(yè)科研專項(xiàng)項(xiàng)目(No．2012104002)資助$E-mail：xgangchu@163．com1730分析化學(xué)第41卷2mL，混合于100mL容量瓶中，用水稀釋配制成10mg／L的標(biāo)準(zhǔn)工作液。將此標(biāo)準(zhǔn)工作液用凈化后的陰性乳粉基質(zhì)溶液進(jìn)行梯度稀釋，最終制成0．01～0．25mg／L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線。2．3樣品溶液制備取乳粉樣品1．0g于50mL具塞離心管中，加入3．0mL溫水(60℃)渦旋，再加入7．0mL氨化乙腈(含2％(v／v)氨水)后，

8、渦旋1min，超聲5min。以10000r／min(一10℃)冷凍離心25rain。吸取上清液3．0mL至另一支15mL具塞塑料離心管中，向離心管中加入3mL正己烷，渦旋混合1min，以4000r／min(室溫)離心5min。去掉上層正己烷后，再加入3mL正己烷，渦旋混合1rain，以4000r／min(室溫)離心5min后，棄去上層正己烷，將下層溶液轉(zhuǎn)入玻璃管，在40℃下用氮?dú)獯蹈?，用起始流?dòng)相(95％乙腈一10mmol／L甲酸銨())1mL復(fù)溶，過0．22m有機(jī)相濾膜，待測(cè)。2．4液相色譜條