納豆菌的提取及納豆的制作.ppt

納豆菌的提取及納豆的制作.ppt

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1、開題報告:納豆菌的提取和納豆的制作實驗原理食品納豆中含有的納豆菌,主要指枯草芽孢桿菌(Bacillusnatto),在通過其發(fā)酵大豆的過程中,通過枯草芽孢桿菌對蛋白質(zhì)和糖類特別的直接利用功能,在枯草芽孢桿菌的生長過程中,又利用大豆本身的營養(yǎng)成分,分泌和合成了很多種酶類、維生素、氨基酸及其它只有納豆特有的營養(yǎng)素和生理活性物質(zhì),使得發(fā)酵后的大豆中更富營養(yǎng),稱之為納豆。實驗方法工藝流程:大豆:浸泡約12h,使體積增加2倍左右蒸煮、消毒冷卻鋪層發(fā)酵后熟接種菌&糖&鹽實驗材料及菌種菌種:篩選出發(fā)菌源為產(chǎn)自日本的納豆培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基250ml酪蛋白培養(yǎng)

2、基250ml無菌水100ml,移液槍(100~1000ul),槍頭6個,培養(yǎng)皿6個,試管6個,燒杯(500ml)2個,玻璃棒2支,涂布棒一支,接種環(huán)2支,錐形瓶(250ml)2個,瓶塞納豆菌的分離提取步驟菌株分離:取上述品種的納豆若干粒,放入裝有25mL無菌水和十余顆玻璃珠的錐形瓶中,室溫下浸提。振蕩多次,獲得菌懸液,以十倍稀釋法稀釋至10-2,10-3,10-4,涂布于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。放入恒溫培養(yǎng)箱中,30℃培養(yǎng)24h。鏡檢:確定培養(yǎng)出的微生物的形態(tài)特點。酪蛋白平板篩選:挑取經(jīng)培養(yǎng)后牛肉膏蛋白胨平板培養(yǎng)基上的單菌落,利用平板劃線法接種于新鮮的酪

3、蛋白平板,30℃培養(yǎng)24h后觀察平板透明圈情況并進行測量,選取透明圈直徑大者轉(zhuǎn)接酪蛋白斜面培養(yǎng)。食品納豆的制作 具體實驗步驟1.將大豆徹底清洗后用3倍量的水進行浸泡。浸泡時間是夏天8~12h,冬天20h。以大豆吸水重量增加2~2.5倍為宜,筆者認為2倍最好。2.在實驗室用普通滅菌鍋在充分放汽后,121攝氏度高溫高壓處理15~20min,以豆子很容易被用手捏碎為宜,宜蒸不宜煮,煮的水分太多。3.在大豆被蒸熟前,在淺盤中鋪好錫箔紙,用筷子等尖細物在錫箔上打多個氣孔,滅菌備用。攪拌時要用的橡膠手套也要用開水滅菌。4.大豆蒸熟后,不開蒸鍋的蓋子,直接傾去鍋內(nèi)

4、的水。將蒸鍋的大豆無菌轉(zhuǎn)移到滅菌盆或罐內(nèi),立即蓋蓋,以免雜菌污染。5.在已滅菌的杯中用10ml開水溶解鹽(約0.1%)、糖(約0.2%)和0.01%納豆菌,如果覺得體積太小,不易均勻噴灑于大豆中,也可用20—30ml的水,注意水的多少會影響納豆的粘滯性和嚼感,將混合液噴灑于大豆中攪拌均勻。6.把接種好的大豆均勻地平鋪于滅好菌的錫箔紙上,厚約2—3cm,不宜太厚。將錫箔紙折過來(或用另一種錫箔紙)鋪蓋于豆層上面。然后在上面再鋪接種好發(fā)酵劑的大豆,厚約2-3cm,上面也蓋上一層紗。注意:如果發(fā)酵中勇氣不好,做出的納豆會以苦,如果勇氣太大,納豆表面會過干,

5、不利于充分發(fā)酵。發(fā)酵環(huán)境的濕度要高。7.37—42攝氏度培養(yǎng)20—24h。也可以在30攝氏度以上的自然環(huán)境中發(fā)酵,時間適當延長。當發(fā)酵完時,納豆基本上做成了,揭掉錫箔紙或紗時,會看到豆子表面部分發(fā)灰折色,室內(nèi)漂滿納豆的芳香。稍有氨味是正常的,但氨味過于強烈,則有可能有雜菌生長了。實驗日程安排第一周:配置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,酪蛋白培養(yǎng)基各250ml;100ml無菌水;包好12個培養(yǎng)皿,6個試管;高壓蒸汽滅菌第二周:制備納豆的稀釋液10-2、10-3、10-4,利用涂布平板法對菌進行培養(yǎng)第三周:對培養(yǎng)出的細菌鏡檢,將枯草芽孢桿菌進行篩選,接種到酪蛋白平板

6、上進行篩選第四周:對篩選出的菌株進行純化,接種于酪蛋白的斜面上進行大量培養(yǎng)第五周:提前一天將大豆清洗后浸泡;用普通滅菌鍋在充分放汽后,121攝氏度高溫高壓處理15~20min;鋪好錫箔紙打多個氣孔,滅菌備用;大豆無菌轉(zhuǎn)移到滅菌盆或罐內(nèi);10ml開水溶解鹽(約0.1%)、糖(約0.2%)和0.01%納豆菌,混于大豆中,鋪好錫箔紙進行發(fā)酵培養(yǎng)。20~24h.

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