施萬細(xì)胞對共培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞增殖及分化影響.doc

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1、施萬細(xì)胞對共培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞增殖及分化影響[摘要]目的:探討施萬細(xì)胞誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞增殖與分化的影響因素。方法:大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)及與新生SD大鼠施萬細(xì)胞共培養(yǎng),觀察神經(jīng)干細(xì)胞的形態(tài)變化,并分別檢測特異性標(biāo)志蛋白S-100、NF和GFAP的表達(dá)。結(jié)果:相差顯微鏡下可見共培養(yǎng)組大部分神經(jīng)干細(xì)胞伸出多個(gè)細(xì)長突起;與單獨(dú)培養(yǎng)組相比,免疫熒光染色顯示共培養(yǎng)組NF表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)多;GFAP表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)少。結(jié)論:施萬細(xì)胞可促進(jìn)共培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞增殖,并可誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化。[關(guān)鍵詞]施萬細(xì)

2、胞;神經(jīng)干細(xì)胞;增殖;分化[中圖分類號1R329.2[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]B[文章編號]1673-7210(2007)09(a)-098-02EffectsofSchwannCellsonthegenerationanddifferentiationofneuralstemcellsinvitroLIUZhong,ZENGShui-lin,LIFeng-fei,JIANGYu,ZHUJian-bao(InstituteofNeurobiology,SoutheastUniversity,Nanjing2

3、10009,China)[Abstract]Objective:ToexploretheinfluencingfactorsofSchwannCellsinpromotingneuralstemcellstogenerateanddifferentiateinvitro.Methods:Neuralstemcellsweredissociatedandclonedfromthecerebralsubventricularzoneofembryorats,SchwannCellswerealsod

4、issociatedandpurifiedsimultaneouslyfromthesciaticnervesofnewbornrats.ThenneuralstemcellswereculturedseparatelyandCo-culturedwithSchwannCells?TheexpressionofproteinSTOO,neurofilamentprotein(NF)andglialfibrillaryacidicprotein(GFAP)oftheneuralstemcellsw

5、eredetectedbyimmunofluorescence?Themorphologicalchangesofneuralstemcellswereexaminedwithcontrastphasemicroscope?ResuIts:Theco-culturedgroupshadmorepositiveCellsofproteinS-100andNF,andlesspositivecellsofGFAPthanthegroupculturedseparately.Thenervouspro

6、cessofneuron-likecellsinCo-culturedgroupswereobviouslylongerandmorethanthatinseparatelyculturedgroup?Conclusion:SchwannCellscanpromotethegenerationanddifferentiationofneuralstemcellsinvitro.[Keywords]SchwannCells;Neuralstemcells;Generation;Differenti

7、ation神經(jīng)干細(xì)胞(neuralstemcells,NSCs)是指存在于神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的具有自我復(fù)制能力和多向分化潛能的細(xì)胞[1]。研究證明,NSCs不僅存在于哺乳動物胚胎腦組織,而且存在于發(fā)育和成熟的CNS,如大腦皮質(zhì)、海馬、腦室下區(qū)等可分離出NSCs,這不僅改變了成年動物的神經(jīng)細(xì)胞不能分裂的傳統(tǒng)觀點(diǎn),而且在研究腦的發(fā)育和分化以及相關(guān)疾病治療上均具有重大價(jià)值[2,3]o施萬細(xì)胞(SchwannCells,SCs)作為周圍神經(jīng)系統(tǒng)的主要膠質(zhì)細(xì)胞,包繞周圍神經(jīng)軸突形成有髓或無髓神經(jīng)纖維,能分泌多種細(xì)

8、胞因子與營養(yǎng)因子、細(xì)胞外基質(zhì)及細(xì)胞黏附因子,有利于維持神經(jīng)元的生存和NSCs的發(fā)育[4,5]。我們已經(jīng)報(bào)道了將NSCs與嗅鞘細(xì)胞(OECs)共培養(yǎng),觀察到OECs能促進(jìn)NSCs向神經(jīng)元分化,部分可以分化為多巴胺能神經(jīng)元[6]。研究證明血清也可誘導(dǎo)NSCs分化。因此,尋找控制NSCs分裂的途徑以及NSCs定向分化的方法是目前NSCs研究的熱點(diǎn)之一。1材料與方法1.1動物及主要試劑孕14.5d和新生SD大鼠由東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物中心提供。DMEM/F12.B27、胎牛血清均購自Gibco公司;S-10

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