免疫球蛋白測(cè)定及應(yīng)用.ppt

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1、免疫球蛋白測(cè)定及應(yīng)用谷俊瑩一、免疫球蛋白定量檢測(cè)方法（一）單向瓊脂擴(kuò)散法1.原理2.操作方法3.影響因素抗血清，溫度，標(biāo)準(zhǔn)曲線，異常沉淀線（二）免疫比濁法透射比濁法散射比濁法1.原理2.操作方法3.影響因素抗血清，緩沖液，待測(cè)血清（三）ELISA法（四）放射免疫法（五）免疫電泳及免疫固定電泳二、免疫球蛋白定量方法學(xué)評(píng)價(jià)及應(yīng)用依據(jù)存在于血清和其他體液內(nèi)的各類(lèi)Ig含量不同，采用不同的方法進(jìn)行測(cè)定。單相瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)敏感度不高，30mg/L，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，批內(nèi)變異系數(shù)大，準(zhǔn)確性受諸多因素影響，抗血清用量大，有商品化的檢測(cè)板供應(yīng)，操作簡(jiǎn)便，不需特殊設(shè)備可進(jìn)行

2、血清IgG、A、M定量火箭電泳敏感度較高，0.3mg/L，操作簡(jiǎn)便省時(shí)，結(jié)果重復(fù)性好可進(jìn)行血清IgG、A、M定量免疫比濁法簡(jiǎn)便、快速，可自動(dòng)化，敏感度高，0.1mg/L，準(zhǔn)確性好，批內(nèi)變異系數(shù)2%~4%可進(jìn)行血清IgG、A、M、D定量放射免疫測(cè)定主要用于微量分析，敏感度10μg/L，試劑保存期短，放射性核素污染用于血清IgE定量免疫膠乳比濁法操作簡(jiǎn)便，快速、可自動(dòng)化、敏感度0.1mg/L，但膠乳試劑制備較難，目前試劑盒品種較少、未廣泛應(yīng)用用于血清IgG、A、M、D定量酶聯(lián)免疫吸附法方法簡(jiǎn)便，商品化試劑盒、敏感度0.1mg/L，重復(fù)性好

3、、變異系數(shù)小，定量每次帶標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，可定量血漿Ig以外如體液中Ig可用于尿、腦脊液、胸腹水Ig定量及血清IgE定量三、免疫球蛋白定量臨床意義（一）血清Ig定量臨床意義1.低Ig血癥（1）先天性低Ig血癥（2）獲得性低Ig血癥2.高Ig血癥（1）非特異型多克隆免疫球蛋白增高癥（2）特異型單克隆免疫球蛋白增殖癥3.IgD在疾病中的意義尚不明確。妊娠末期及吸煙者IgD含量升高。IgD型骨髓瘤患者血清中IgD水平比正常人高10000倍，是惟一明確可作為確診的證據(jù)。4.血清總IgE寄生蟲(chóng)感染時(shí)IgE升高，特異性哮喘，過(guò)敏性鼻炎等患者血清中IgE含量升高與發(fā)

4、病及緩解呈平行關(guān)系。IgE骨髓瘤。SLE，類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者IgE含量升高。（二）尿微量Ig定量臨床意義1、腎功能狀態(tài)鑒定2、SLE患者腎損傷程度判斷3、糖尿病患者腎損傷程度判斷（三）腦脊液微量Ig定量的臨床意義CSF中IgG增高見(jiàn)于：①中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)源性合成增加②血中IgG增高③血腦屏障通透性增高。四、M蛋白的檢測(cè)M蛋白是B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常單克隆免疫球蛋白（monoclonalIg），多見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白血癥和惡性淋巴瘤。（一）血清蛋白區(qū)帶電泳M區(qū)帶的出現(xiàn)（二）免疫球蛋白定量某一類(lèi)

5、免疫球蛋白的顯著增高（三）輕鏈片段定量測(cè)定單向免疫擴(kuò)散法或ELISA（四）免疫電泳或免疫固定電泳（五）本周蛋白測(cè)定