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1、第十六章體液免疫球蛋白測(cè)定P188湖南省中醫(yī)藥大學(xué)微生物免疫教研室李志芳抗體(antibody,Ab):是B細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的能與相應(yīng)抗原特異性地結(jié)合球蛋白。(生物學(xué)功能上的概念)抗體主要存在于血清等體液中,故將抗體介導(dǎo)的免疫稱為體液免疫。幾個(gè)概念免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。(化學(xué)結(jié)構(gòu)上的概念)Ab與Ig的聯(lián)系1.所有的Ab都是Ig2.Ig并非都是Ab分泌型(secretedIg,sIg):存在于血清等體液中,如Ab膜型(membraneIg,mIg)是B細(xì)胞上的抗原受體。Ig的基
2、本結(jié)構(gòu):四肽鏈結(jié)構(gòu),所有Ig的基本單位都是四條肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu)。兩條重鏈(H)和兩條輕鏈(L)。每條重鏈和輕鏈分為氨基端和羧基端。免疫球蛋白分類及特性重鏈性質(zhì),Ig分5類:IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)輕鏈性質(zhì),Ig分2型:κ、λIg占血漿蛋白總量:20%Ig含量:血清IgG、IgA、IgM:g/L、IgD、IgE:mg/L體液IgG、IgA、IgM:mg/L檢測(cè)意義:反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病五類免疫球蛋白的特點(diǎn)和功能第一節(jié)體液中IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床應(yīng)用體液免疫球蛋白測(cè)定主要指對(duì)人體的血液、尿液、腦脊液等樣本中的
3、IgG、IgA、IgM定量檢測(cè),由于免疫球蛋白IgG、IgA、IgM在人體體液中含量相對(duì)較高,測(cè)定快速,臨床意義明確,臨床應(yīng)用較廣泛IgG是血清中含量最高(占80%)的免疫球蛋白,是血液和細(xì)胞外液中的主要抗體,也是機(jī)體再次免疫的主要抗體。IgA分為血清型A1和分泌型A2,是參與黏膜局部免疫的主要抗體,主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液中。IgM是分子量最大的免疫球蛋白,是個(gè)體發(fā)育過程中最早合成和分泌的抗體,也是抗原刺激誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體。測(cè)定方法單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法(耗時(shí)、重復(fù)性差)免疫濁度法(速率散射比濁)常用年齡:血液Ig隨年齡、性
4、別、血型、種族及測(cè)定方法不同有所差別,各實(shí)驗(yàn)室要建立自己的參考范圍一、血液免疫球蛋白測(cè)定的臨床意義高Ig血癥多克隆Ig增高(感染)單克隆Ig增高(免疫增殖?。┑虸g血癥:先天性低Ig血癥(免疫缺陷病)獲得性低Ig血癥(蛋白丟失、淋巴系統(tǒng)腫瘤、使用免疫抑制劑)正常人尿液中的Ig含量甚微,當(dāng)機(jī)體的免疫功能異?;蜓装Y反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí),可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損,從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。二、尿液免疫球蛋白測(cè)定的臨床意義判斷腎小球?yàn)V膜受損程度:選擇性蛋白尿指數(shù)SPI可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類尿中游離輕鏈的檢測(cè)對(duì)
5、診斷輕鏈病和MM有重要意義三、腦脊液免疫球蛋白測(cè)定的臨床意義生理情況下,Ig根據(jù)其分子量大小,通過血腦屏障的難易度不同,IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí),血腦屏障通透性增加,腦脊液組分發(fā)生改變。血腦屏障受損程度:白蛋白商值、CSF-IgG指數(shù)增高有臨床意義:多發(fā)性硬化癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染第二節(jié)血液IgD和IgE的測(cè)定及臨床應(yīng)用正常人血液中IgD含量很低(0.2%),目前生物學(xué)功能尚不清楚IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌,為親細(xì)胞抗體,引起I型超敏反應(yīng);與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。一、IgD的測(cè)定及
6、臨床意義測(cè)定方法:放免、免疫比濁、ELISA(常用)臨床意義:血液中含量波動(dòng)范圍大,各實(shí)驗(yàn)室最好使用固定的試劑盒,建立自己的參考范圍二、IgE的測(cè)定及臨床意義測(cè)定方法:總IgE測(cè)定:放射免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法(常用)免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸附法(常用)特異性IgE測(cè)定:免疫斑點(diǎn)法酶聯(lián)免疫吸附法臨床意義:增高:變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。降低:意義不大第三節(jié)血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義Ig亞類:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4,其含量依次下降測(cè)定方法:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法免疫比濁法(常用)放射免疫分析法酶聯(lián)免疫吸附法(常用)臨床意義:Ig
7、G亞類可能和感染復(fù)發(fā)、免疫缺陷和自身免疫性疾病有關(guān),因而測(cè)定IgG亞類對(duì)上述疾病有重要意義。即使當(dāng)總IgG水平在正常范圍內(nèi),IgG的亞類分配也可能發(fā)生紊亂第四節(jié)M蛋白測(cè)定及臨床意義M蛋白:B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常單克隆免疫球蛋白臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等M蛋白測(cè)定蛋白區(qū)帶電泳:經(jīng)典方法計(jì)算蛋白含量和百分比免疫比濁法:免疫球蛋白定量準(zhǔn)確性高、快速免疫電泳:M蛋白分型免疫固定電泳:M蛋白分型及鑒定,分辨率高(最常用)各方法視具體情況合理選用蛋白質(zhì)區(qū)帶電泳是血清蛋白的經(jīng)典分
8、析方法,血