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《諾麗發(fā)酵果汁抗氧化實(shí)驗(yàn)研究(西沙諾麗酵素).doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、·抗氧化活性·諾麗的保健功效—國(guó)際最新研究進(jìn)展論文集食品研究與開發(fā).2010,33(5):175-177.諾麗發(fā)酵果汁抗氧化實(shí)驗(yàn)研究諾麗發(fā)酵果汁抗氧化實(shí)驗(yàn)研究李煦照1，于純淼2，陳佳2，劉樹民1（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，黑龍江哈爾濱150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江哈爾濱150040）摘要研究諾麗發(fā)酵果汁對(duì)溴代苯所致小鼠急性肝損傷的抗氧化功能。將小鼠隨機(jī)分組，高、中、低劑量組分別經(jīng)口給予不同濃度受試樣品，空白對(duì)照組則給予同體積溶劑，連續(xù)給藥30d后取血測(cè)抗氧化酶活力。并在
2、第31天，給予受試樣品或溶劑1h后，用溴代苯油造模致肝損傷，測(cè)肝組織抗氧化酶活力和過(guò)氧化脂質(zhì)含量。結(jié)果表明，受試樣品高、中、低三劑量組中全血谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活力均高于空白對(duì)照組，但無(wú)顯著性差異；中劑量組血清總超氧化物歧化酶（SOD）活力顯著高于空白對(duì)照組（P<0.05）。中劑量組肝組織中過(guò)氧化脂質(zhì)（MDA）含量顯著低于模型對(duì)照組（P<0.05）。結(jié)論顯示，發(fā)酵諾麗果汁具有一定的抗氧化功能，對(duì)肝組織脂質(zhì)過(guò)氧化損傷具有一定保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：發(fā)酵諾麗果汁，肝損傷，抗氧化作用，溴代苯諾
3、麗（MorindacitrigoliaL.，Noni），也稱海巴戟，屬茜草科植物，是一種發(fā)源于南太平洋島嶼的熱帶常綠多年生闊葉灌木或小喬木，富含多種營(yíng)養(yǎng)成分。在太平洋群島，波利尼西亞人和庫(kù)克人認(rèn)為他們的祖先應(yīng)用海巴戟治療疾病有2000多年的歷史，主要用于抗感染和治療慢性疾病，是波利尼西亞人和庫(kù)克人最主要的藥用植物之一，在民間廣為應(yīng)用[1]，傳統(tǒng)用于抗衰老、糖尿病、口臭、口腔潰瘍、痔瘡、腫瘤、結(jié)核病、魚肉中毒和高血壓等。本試驗(yàn)研究發(fā)酵諾麗果汁對(duì)溴代苯所致小鼠急性肝損傷的抗氧化功能。1材料與方法1.
4、1材料與儀器1.1.1材料諾麗果汁：購(gòu)于?？冢匀话l(fā)酵3個(gè)月，用蒸餾水配成所需濃度；溴代苯：天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所，分析純（臨用前用食用油配成適宜濃度的供試液）；MDA、SOD、GSH-Px測(cè)定試劑盒及考馬斯亮蘭蛋白測(cè)定試劑盒：南京建成生物工程研究所。1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明小鼠，雄性，體重18g~22g，清潔級(jí)，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK黑2008004。1.1.3主要儀器KDC-160HR高速冷凍離心機(jī)：科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司；756紫外分光光度計(jì)：上海光
5、譜儀器有限公司；XHF-1內(nèi)切式組織勻漿機(jī)：寧波新芝生物科技股份有限公司。1.2方法1.2.1前期給藥選18g~22g健康成年昆明小鼠，雄性，隨機(jī)分成空白對(duì)照組、模型對(duì)照組和受試樣品高、中、低劑量組，每組l0只。按成人體重60kg計(jì)，受試樣品每次用量為50mL，1d2次，相當(dāng)于1.66mL/（d·kg）。試驗(yàn)中按成人推薦用量的5、10、20倍，設(shè)高、中、低劑量組。濃度分別為0.21、0.42、0.84mL/mL，以蒸餾水配制。經(jīng)口給藥，灌胃量為0.2mL/10g。30d后取血測(cè)抗氧化酶活力（GS
6、H－Px、SOD）。空白對(duì)照組經(jīng)口給予同體積溶劑。1.2.2造模方法按《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》[2]，給藥30d后，取血測(cè)抗氧化酶活力，此后動(dòng)物饑餓過(guò)夜，第2天給予受試樣品或溶劑1h后，除空白對(duì)照組外，各組小鼠經(jīng)口給護(hù)溴代苯油（3mmol/L），灌胃量0.1mL/10g。20h后處死動(dòng)物，取肝組織測(cè)過(guò)氧化脂質(zhì)含量（MDA）和抗氧化酶活力（GSH-Px、SOD）。1.2.3樣品制備1.2.3.1血清樣品取血0.5mL，4000r/min離心10min，取血清備用。1.2.3.2全血樣品取血2
7、0μL加入到2.48mL蒸餾水中，充分振搖，使之全部溶血，4h內(nèi)測(cè)定酶活力。1.2.3.3肝組織上清液動(dòng)物處死后，立即取出所需肝臟，放入冷生理鹽水中洗去浮血，剔除脂肪及結(jié)締組織，濾紙吸干后，在冰浴上剪成碎片，稱取適量組織，制成10%組織勻漿，操作在冰浴中進(jìn)行。勻漿以4000r/min，4℃離心10min，取上清液備用。1.2.4各指標(biāo)測(cè)定本試驗(yàn)測(cè)定全血GSH-Px酶活力，血清總SOD活力，肝組織MDA含量，肝組織GSH-Px酶和總SOD活力。1.2.4.1GSH-Px活力測(cè)定采用二硫代二硝基苯甲
8、酸法（DTNB法）。1）取1∶124全血0.2mL測(cè)全血GSH-Px酶活力全血GSH-Px酶活力=（非酶管OD值－酶管OD值）/（標(biāo)準(zhǔn)管OD值－空白管OD值）×標(biāo)準(zhǔn)液濃度（20μmol/L）×5×（1+124）/（1+49）2）取0.25%組織勻漿0.2mL測(cè)組織中GSH-Px酶活力組織中GSH-Px酶活力=（非酶管OD值－酶管OD值）/（標(biāo)準(zhǔn)管OD值－空白管OD值）×標(biāo)準(zhǔn)液濃度（20μmol/L）×5/反應(yīng)時(shí)間/（取樣量×蛋白含量）1.2.4.2SOD活力測(cè)定采用黃漂吟氧化酶法。1）取血清20
