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1、廣東藥學(xué)院學(xué)報JournalofGuangdongPharmaceuticalCollegeJun．2010。26(3)戊型肝炎病毒診斷基因芯片制備的初步研究王治偉，馬文麗，夏薇，楊瓊，鄭文嶺(1．南方醫(yī)科大學(xué)基因工程研究所，廣東廣州510515；2．廣州醫(yī)學(xué)院港灣醫(yī)院檢驗科，廣東廣州510700；3．華南基因組中心，廣東廣州510830)摘要：目的制備戊型肝炎病毒診斷基因芯片并進(jìn)行雜交驗證。方法利用Oligo6．0軟件針對戊型肝炎病毒診斷基因保守區(qū)域設(shè)計多對寡核苷酸探針，用芯片點(diǎn)樣儀將其按照陣列設(shè)計打印在玻片上制備成基因芯片。樣品標(biāo)記采用限制性顯示技術(shù)，樣品標(biāo)記后進(jìn)行雜交，進(jìn)而在芯片掃描儀
2、中對得到的探針數(shù)據(jù)進(jìn)行分析并實驗驗證。結(jié)果芯片雜交后得到的探針熒光強(qiáng)度好，信噪比高，符合臨床樣品的基因亞型，RT—PCR驗證后得到的電泳結(jié)果與芯片實驗一致。結(jié)論實驗設(shè)計并制備的寡核苷酸戊型肝炎病毒診斷芯片能用于戊肝的檢測，為這項疾病的實驗室診斷提供了一種快速平行的檢測方法。關(guān)鍵詞：戊型肝炎；基因芯片；診斷中圖分類號：R512．6；Q812文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10．3969／j．issn．1006—8783．2010．03．025文章編號：1006—8783(2010)03—0314—05PreliminarystudyonpreparationofdiagnosticDNAmicroarr
3、ayforhepatitisEvirusWANGZhiwei，，MAWen．1i，XIAWei，YANGQiong，ZHENGWen．1ing(1．InstituteofGeneticEngineering，SouthernMedicalUniversity，Guangzhou，Guangdong510515，China；2．ClinicalLaboratory，GangwanHospitalofGuangzhouMedicalCollege，Guaagzhou，Guangdong510700，China；3．C．enomeCenterofSouthChina，Guangzhou，Guang
4、dong510830，China)Abstract：ObjectiveTostudythepreparationofdiagnosticDNAmicroarrayforhepatitisEvirus(HEV)．MethodsThespecificprimersofoligoprobesweredesignedwiththeOligo6．0programaccordingtotheconservedregionofHEV．TheDNAmicroarrayswerepreparedbyspottingtheprobestothesurfaceofglassslidesbytherobotics．
5、RestrictiondisplayPCRwasusedtolabelthesamples．ResultsTheresultsshowedthattheoligoprobeswerespecifichybridizedwithHEVsamples．Andfromthehybridizingsignalsonmicroarray，thespecificityandsensitivityintheHEVdiagnosisweresatisfactoryandtheresultswerealsodetectedbyRT-PCR．ConclusionUsingtheprobestoprepareth
6、eDNAmicroarrayforclinicaldiagnosisofHEVisaquickandefectivemethod．Keywords：HEV；microarray；diagnosis戊型肝炎(hepatitisE，HE)是由HE病毒性肝炎，給社會帶來了很大的危害。目前HE的(hepatitisEvirus，HEV)引起的一種經(jīng)糞口途徑傳檢測方法主要有免疫電鏡技術(shù)(IEM)、聚合酶鏈反播的急性傳染病。HE呈全球分布，是世界各地尤應(yīng)(PCR)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和原位雜交。其發(fā)展中國家主要的健康問題之一，成為繼甲型肝但HEV感染窗口期，患者自身免疫系統(tǒng)以及檢測方炎外另一
7、種經(jīng)腸道傳播的嚴(yán)重危害人類健康的病毒法等多方面原因給HE的診斷帶來了難度，因而有必要尋找一種高效、高通量、快速的HEV檢測方收稿日期：2010—06—02法_3j?；蛐酒夹g(shù)按照堿基互補(bǔ)配對原則，探針基金項目：廣東省重點(diǎn)實驗室建設(shè)經(jīng)費(fèi)資助(2004B60144)特異性地結(jié)合相應(yīng)被熒光標(biāo)記的分子，并通過對雜作者簡介：王治偉(1971一)，碩士，副主任技師，主要從事免疫學(xué)研究；通訊作者：馬文麗，教授，博士生導(dǎo)師
