抗戊型肝炎病毒IgG抗體定量線性標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)定及初步應(yīng)用.pdf

《抗戊型肝炎病毒IgG抗體定量線性標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)定及初步應(yīng)用.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、中國生物制品學(xué)雜志2008年9月第21卷第9期ChinJBiologicalsSeptember2008，Vo1．21No．9·799·中國圖書分類號(hào)R392．33文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1004·5503《2008)09·0799-04【診斷制品】抗戊型肝炎病毒IgG抗體定量線性標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)定及初步應(yīng)用黃維金-吳星周誠-何鵬葛勝祥喬杉，張華遠(yuǎn)‘藍(lán)海云辜文潔梁爭論祁自柏李河民【摘要】目的建立抗戊型肝炎病毒(Anti．HEV)IgG抗體的定量線性標(biāo)準(zhǔn)品，并進(jìn)行初步應(yīng)用。方法利用抗-HEVIgG和抗一HEVIgMELISA檢測(cè)試劑篩選出

2、1份抗．HEVIgG陽性血清L9，經(jīng)基因1型和4型的HEVORF2C．端抗原及239抗原進(jìn)行Westernblot確認(rèn)后，用WHO定量標(biāo)準(zhǔn)品，由3個(gè)實(shí)驗(yàn)室協(xié)作標(biāo)定，利用量反應(yīng)平行線法計(jì)算其抗．HEVIgG的含量?？疾煲褬?biāo)定的L9血清的穩(wěn)定性，并用所標(biāo)定的1．5倍系列稀釋的血清對(duì)國內(nèi)外6家抗．HEVIgG試劑的靈敏度進(jìn)行檢測(cè)。選擇一靈敏度較高的試劑，在其線性范圍內(nèi)取L9的5個(gè)稀釋度作為抗一HEVIgG抗體定量線性標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)高、中、低濃度的3份臨床血清重復(fù)檢測(cè)5次，考察其重復(fù)性；對(duì)實(shí)驗(yàn)感染猴的系列血清中抗．HEVIgG含量進(jìn)行定量檢

3、測(cè)，考核該定量線性標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)用效果；并對(duì)每次定量試驗(yàn)中的線性方程進(jìn)行分析，確定相關(guān)系數(shù)r值和斜率k值的范圍。結(jié)果經(jīng)國內(nèi)外試劑檢測(cè)篩選出的陽性血清L9與基因1型和4型的HEVORF2C．端抗原及239抗原均有陽性反應(yīng)。經(jīng)協(xié)作標(biāo)定，L9血清抗．HEVIgG含量為16．9U／ml。L9血清在一20~C下保存6、12、18個(gè)月，2～8~C保存24、48、96h后，定量結(jié)果均在95％置信區(qū)間內(nèi)，且抗一HEVIgG含量均未明顯下降。6家抗．HEVIgG檢測(cè)試劑靈敏度差異較大，范圍為0．035．o0U／ml。確定L9血清從0．42U／ml開

4、始的5個(gè)1．5倍系列稀釋度，作為某一試劑抗一HEVIgG抗體定量線性標(biāo)準(zhǔn)品。利用該線性定量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)高、中、低濃度的3份臨床血清，定量結(jié)果重復(fù)性較好；對(duì)實(shí)驗(yàn)感染猴系列血清進(jìn)行定量檢測(cè)，結(jié)果可有效地反映抗體水平變化趨勢(shì)；94％的定量檢測(cè)試驗(yàn)，r≥0．98，1．15≥k≥0．95。結(jié)論已建立了抗一HEVIsG抗體定量線性標(biāo)準(zhǔn)品，可用于疫苗免疫原性評(píng)價(jià)和流行病學(xué)調(diào)查。【關(guān)鍵詞】戊型肝炎病毒；IgG抗體；標(biāo)準(zhǔn)品；定量CalibrationandPreliminaryApplicationofLinearQuantitationStand

5、ardforAnti·HEVIgGAntibodyHUANGWei-jin，WUXing，ZHOUCheng，etal(~NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBio-logicalProducts，Beijing100050，China)【Abstract】objectiveTodevelopalinearquantitationstandardforanti—hepatitisEvirus(HEV)IgGantibody．MethodsAnanti-HEVIgGp

6、ositiveserumsampleL9wasscreenedbyusingAnti—HEVIgMELISAkitandAnti—HEVIgGEUSAkitandcon-finnedbyWesternblottingwithHEV0RF2C—terminalantigenofgenotypes1and4and239antigen．thencalibratedby3laborato-tiesusingWHOquantitationstandard．Calculatetheanti·HEVIgGcontentbydose—resp

7、onseparallellineassay，andevaluatethesta-bilityofcalibratedserumsample．Thesensitivitiesof6domesticandimportedanti—HEVIgGELISAkitswereevaluatedwiththecali—bratedserumsamplediluted1．5一f0ldserially．Alinearquantitationstandardforanti—HEVIgGantibodyconsistedof5dilutionsof

8、L9withinthelineardeterminationrangeofahighlysensitivekitandevaluatedforreproducibilitybyrepeattestfor3clinicalserumsam-pies，athigh，moderat