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《花生根全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建及分析.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、中國(guó)油料作物學(xué)報(bào)２０１４，３６（５）：６５３－６６０ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＯｉｌＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅｓｄｏｉ：１０．７５０５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－９０８４．２０１４．０５．０１５花生根全長(zhǎng)ｃＤＮＡ文庫(kù)的構(gòu)建及分析１１１１１，２１陳華，張沖，蔡鐵城，鄧燁，鄭奕雄，莊偉建（１．福建省作物分子與細(xì)胞生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建福州，３５０００２；２．仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院，廣東廣州，５１０２２５）摘要：以閩花６號(hào)為材料，利用ＳＭＡＲＴ技術(shù)成功構(gòu)建了花生根全長(zhǎng)ｃＤＮＡ文庫(kù)。原始文庫(kù)滴度為１．３×６１０ｃｆｕ／ｍＬ，重組率達(dá)９
2、５．８％，插入片段大小為７５０～２０００ｂｐ，符合全長(zhǎng)ｃＤＮＡ文庫(kù)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。隨機(jī)挑選３５個(gè)單克隆進(jìn)行雙向測(cè)序，共獲得３０條有效序列。通過與ＮＣＢＩ非冗余蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)和注釋，獲得已知功能基因或具推測(cè)功能的基因１５個(gè)，未知功能基因７個(gè)，新基因１３個(gè)，其中３４個(gè)（９７．１％）基因?yàn)榛ㄉ磮?bào)道的基因。因此，該文庫(kù)的構(gòu)建為克隆和研究花生根部重要表達(dá)基因、從分子水平上揭示花生根的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律提供了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：花生；ＳＭＡＲＴ技術(shù)；全長(zhǎng)ｃＤＮＡ文庫(kù)；根中圖分類號(hào)：Ｓ５６５．２０３文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：１００７－９０８４（２
3、０１４）０５－０６５３－０８Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｒｏｏｔｓｆｕｌｌ－ｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｌｉｂｒａｒｙｏｆｐｅａｎｕｔ１１１１１，２１ＣＨＥＮＨｕａ，ＺＨＡＮＧＣｈｏｎｇ，ＣＡＩＴｉｅ－ｃｈｅｎｇ，ＤＥＮＧＹｅ，ＺＨＥＮＧＹｉ－ｘｉｏｎｇ，ＺＨＵＡＮＧＷｅｉ－ｊｉａｎ（１．ＦｕｊｉａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｒｏｐＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ，Ｆｕｚｈｏｕ３５０００２，Ｃｈｉｎａ；２．ＺｈｏｎｇｋａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ
4、ａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０２２５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＲｏｏｔｃＤＮＡｌｉｂｒａｒｙｏｆｐｅａｎｕｔｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｒｏｏｔｓｏｆＡｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａｃｖＭｉｎｈｕａ６ｕｓｉｎｇ６ＳＭＡＲＴｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌｌｉｂｒａｒｙｈａｄａｔｉｔｅｒｏｆ１．３×１０ｃｆｕ／ｍＬ，ｏｆｗｈｉｃｈ９５．８％ｃｌｏｎｅｓｗｅｒｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｎｄｉｎｓｅｒｔｃＤＮＡｓｗｅｒｅｆｒｏｍ７５０ｂｐｔｏ２０００ｂｐ．３５ｃｌｏｎｅｓｆｒｏ
5、ｍｔｈｅｃＤＮＡｌｉｂｒａｒｙｗｅｒｅｓｅｑｕｅｎｃｅｄａｎｄ３０ｖａｌｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｓｗｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ．２５ｋｎｏｗｎｏｒｈｙｐｏｔｈｅｎｔｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｇｅｎｅｓ，７ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｇｅｎｅｓａｎｄ１３ｎｏｖｅｌｇｅｎｅｗｅｒｅａｎｎｏｔａｔｅｄｂｙＢｌａｓｔｘｓｅａｒｃｈｅｓａｇａｉｎｓｔｔｈｅＮＣＢＩｎｏｎ－ｒｅｄｕｎｄａｎｔｐｒｏｔｅｉｎｄａｔａｂａｓｅ．Ａｍｏｎｇｔｈｅｓｅｇｅｎｅｓ，３４ｇｅｎｅｓ（９７．１％）ｈａｄｎｏｔｂｅｅｎｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎｐｅａｎｕｔ．Ｔｈｅ
6、ｒｅｓｕｌｔｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｇｅｎｅｓｉｎｐｅａｎｕｔｒｏｏｔｒｅｐｏｒｔｅｄｏｎｌｉｎｅａｔｐｒｅｓｅｎｔｗｅｒｅｓｔｉｌｌｒａｒｅ．ＴｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｌｉｂｒａｒｙｏｆｐｅａｎｕｔｒｏｏｔｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗｏｕｌｄｂｅｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｔｏｍｉｎｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｇｅｎｅｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｐｅａｎｕｔｒｏｏｔｓａｎｄｓｕｐｐｌｙｂａｓｉｓｔｏｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｐｅａｎｕ
7、ｔｒｏｏｔｓｆｒｏｍｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｅｖｅｌ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｅａｎｕｔ；ＳＭＡＲＴｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｆｕｌｌ－ｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｌｉｂｒａｒｙ；Ｒｏｏｔ根系是植物長(zhǎng)期適應(yīng)陸地生活的重要器官之花生白藜蘆醇的研究已成為花生研究的熱點(diǎn)之［３，４］一，可以從土壤中吸收水分和無機(jī)養(yǎng)分，并通過根的一。另外，花生根部是響應(yīng)干旱脅迫的重要部［５］微管組織運(yùn)輸和轉(zhuǎn)運(yùn)到地上部，還可以將地上部合位，花生根部病害如根腐病、根結(jié)線蟲病等也是［１］成的光合產(chǎn)物等有機(jī)物輸送到根的各部位?；ㄓ绊懟ㄉa(chǎn)量和品質(zhì)的重要病害之一。然而，目前生是
8、我國(guó)重要的油料和經(jīng)濟(jì)作物，其根系屬直根系，已知的花生功能基因基本集中在地上部分的轉(zhuǎn)錄由主根和多級(jí)側(cè)根組成，是支撐、固定花生植株，吸本，在分離花生根部表達(dá)的功能基因及調(diào)控基因方收和輸導(dǎo)水分、養(yǎng)分、合成某些氨基酸和激素的器面報(bào)道甚少。因此，構(gòu)建花生根全長(zhǎng)ｃＤＮＡ文庫(kù)對(duì)官。具有抗菌、抗脂質(zhì)過氧化以及降低固醇等
