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1、228武警醫(yī)學(xué)2014年3月第25卷第3期MedJChinPAPF,V.No.3,March,214蟾毒靈鎮(zhèn)痛作用及其作用機(jī)制探討楊光,楊宇,張玉杰,曾憲陽(yáng)【摘要】目的研究蟾毒靈的鎮(zhèn)痛作用及其作用機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法通過(guò)醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)和小鼠熱板實(shí)驗(yàn),研究蟾毒靈的鎮(zhèn)痛作用,通過(guò)Griess法和免疫印跡法研究RAW264.7細(xì)胞中NO含量和MAPK/p38/iNOS通路的變化。結(jié)果蟾毒靈(0.5mg/kg、1.0mg/kg)可以劑量依賴性地減少醋酸所致的小鼠扭體數(shù)(P<0.05),并可顯著提高熱板所致疼痛小鼠痛閾值(P<0.05)。體外研究表明蟾毒靈(0.04M,0.
2、08M)可顯著降低脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞的NO含量升高(P<0.05),并可以抑制RAW264.7細(xì)胞的MAPK/p38/iNOS信號(hào)通路的激活。結(jié)論蟾毒靈具有一定的鎮(zhèn)痛作用,其鎮(zhèn)痛機(jī)制可能與抑制MAPK/p38/iNOS通路,繼而減少NO的合成和釋放有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】蟾毒靈;鎮(zhèn)痛;一氧化氮;MAPK通路【中國(guó)圖書分類號(hào)】R971.1AstudyonanalgesicefectofbufalinanditsunderlyingmechanismsYANGGuang,YANGYu,ZHANGYujie,andZENGXianyang.DepartmentofAnesthes
3、iology,LiaoningProvincialCorpsHospi—ta1ofChinesePeople’SArmedPoliceForces.Shenyang110034.China【Abstract】0bjectiveToinvestigatetheanalgesiceffectofbufalinanditsunderlyingmechanisms.MethodsTheanalgesiceffectofbufalinwasstudiedbytheaceticacid—inducedwrithingresponseandhotplatetest.ThecontentsofNOandt
4、heactivationofMAPK/p38/iNOSpathwayinLPS—inducedRAW264.3weremeasuredbyGriessassayandWesternblotting,respectively.ResultsBufalin(0.5,1.0mg/kg)showedasignificantinhibitionofaceticacid—inducedwrithingresponseandprolongingoflickingtimeinhotplatetestatadose—dependentmanner(P<0.05).Bufalin(0.04,0.08M)sig
5、nificantlyreducedthecontentsofNOandinhibitedtheactivationofMAPK/p38/iNOSinRAW264.7cells.ConclusionsTheanalgesicofbufalinisrelatedtosuppressingtheactivationofMAPK/p38/iNOSpathwayandsubsequentlyreducingthesynthesisandreleasesofexcessiveNO.【Keywords】bufalin;analgesia;NO;MAPKpathway蟾酥為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍(Bufob
6、ufogar.Sigma公司;NO試劑盒,購(gòu)自南京建成生物工程研g(shù)arizansCantor)和黑眶蟾蜍(Bufomelanostictus究所。RAW264.7細(xì)胞購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞Schneider)耳后腺的分泌物?。其性味甘辛、溫,有庫(kù)。p38、phosphorate.p38、iNOS、B-actin抗體購(gòu)自美毒,具有解毒、消腫、醒神、開(kāi)竅、強(qiáng)心和止痛等作國(guó)CellSignaling公司。昆明種小白鼠40只(體重用j。近年來(lái)對(duì)蟾酥及有效成分的研究表明,蟾毒18~20g,購(gòu)自于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心),隨靈(Bufalin)是發(fā)揮藥效的主要成分之一。本研機(jī)分為4組,每組10只,分
7、別為空白對(duì)照組(給予相究針對(duì)蟾毒靈的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行研究,并初步探討了同體積的生理鹽水),陽(yáng)性對(duì)照嗎l哚美辛組(10mgg其可能的作用機(jī)制。kg,灌胃給藥),蟾毒靈各劑量組(0.5mg/kg、1.0mg/kg,腹腔注射)。1材料與方法1.2實(shí)驗(yàn)方法1.1儀器與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物受試藥與動(dòng)物分組YLS.1.2.1小鼠醋酸扭體法4組小鼠給藥后1h腹6B智能熱板儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站);多功腔注射0.7%醋酸溶液0.2ml/只。觀察并記