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1、18-第18章-體液免疫球蛋白測(cè)定第一節(jié)血清IgG、IgA、IgM測(cè)定一、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義第二節(jié)血清IgD和IgE測(cè)定一、IgD測(cè)定及臨床意義二、IgE測(cè)定及臨床意義第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測(cè)定一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義二、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義第四節(jié)血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義第五節(jié)M蛋白測(cè)定及臨床意義第六節(jié)輕鏈測(cè)定及臨床意義第七節(jié)冷球蛋白的檢測(cè)思考題小結(jié)原理誤差主要原因評(píng)價(jià)單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法示意圖原理誤差主要原因評(píng)價(jià)單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法免疫濁度法直接透射比濁法速率散射比濁法注意
2、點(diǎn)評(píng)價(jià)二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義低Ig血癥:先天性低Ig血癥(免疫缺陷?。?;獲得性低Ig血癥(蛋白丟失).高Ig血癥:多克隆Ig增高(感染);單克隆Ig增高(免疫增殖?。?第二節(jié)血清IgD、IgE測(cè)定正常人血清中IgD含量很低,膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR,是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌,為親細(xì)胞抗體,引起I型超敏反應(yīng);與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。一、血清IgD測(cè)定及臨床意義測(cè)定方法:放射免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸
3、附法IgD:生物功能不詳增高:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、敗血癥、新生兒溶血病降低:意義不大二、血清IgE測(cè)定及臨床意義測(cè)定方法總IgE測(cè)定:放射免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測(cè)定:免疫斑點(diǎn)法酶聯(lián)免疫吸附法IgE臨床意義:增高:變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。降低:意義不大第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測(cè)定正常人尿液中的Ig含量甚微,當(dāng)機(jī)體的免疫功能異?;蜓装Y反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí),可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損,從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。生理情況下,Ig根據(jù)
4、其分子量大小,通過血腦屏障的難易度不同,IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí),腦脊液組分發(fā)生改變。一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義尿液:腎小球?yàn)V膜受損程度:選擇性蛋白尿指數(shù)增高有臨床意義:腎病、免疫增殖病可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類二、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義腦脊液:血腦屏障受損程度:白蛋白商值、CSF-IgG指數(shù)增高有臨床意義:多發(fā)性硬化癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染第四節(jié)血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義Ig亞類:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4,其含量依次下降測(cè)定方法:單向免疫擴(kuò)散法免疫比濁法(常用)放射
5、免疫分析法酶聯(lián)免疫吸附法臨床意義:IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化免疫缺陷病降低明顯第五節(jié)M蛋白測(cè)定及臨床意義M蛋白:B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等M蛋白測(cè)定蛋白區(qū)帶電泳:經(jīng)典方法計(jì)算蛋白含量和百分比免疫比濁法:免疫球蛋白定量準(zhǔn)確性高、快速免疫電泳:M蛋白分型免疫固定電泳:M蛋白分型及鑒定,分辨率高GAMκλIgG-κ型M蛋白Marker免疫固定電泳模式圖第六節(jié)輕鏈測(cè)定及臨床意義本周蛋白的檢測(cè)樣本:尿液方法:免疫電泳、加熱沉淀(簡便易行
6、)κ–Ig和λ-Ig定量檢測(cè)樣本:尿液、血液方法:單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法(常用,準(zhǔn)確、快速)應(yīng)用:M蛋白血癥的分型及鑒定第七節(jié)冷球蛋白的檢測(cè)冷球蛋白:在低溫下發(fā)生沉淀,加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白在低溫時(shí)產(chǎn)生冷沉淀的機(jī)制尚不十分明確多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合物,其抗原可以是外源性的,也可以是內(nèi)源性的冷球蛋白的類型及臨床意義I型:為單克隆冷球蛋白型,占25%~40%;多見于免疫增生性疾病Ⅱ型:單克隆和多克隆混合型冷球蛋白,占15%~25%;多見于自身免疫性疾病Ш型:多克隆混合型冷球蛋白,約占50%;多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病1.免疫應(yīng)
7、答主要分為哪幾個(gè)階段?2.什么是免疫球蛋白?其分子基本結(jié)構(gòu)?3.免疫球蛋白分類及亞類?4.血清免疫球蛋白測(cè)定方法有哪些?5.比較單向免疫擴(kuò)散法和速率散射比濁法優(yōu)缺點(diǎn)。6.免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測(cè)定有何臨床意義?思考題7.免疫球蛋白IgG亞類測(cè)定有何臨床意義?8.單向免疫擴(kuò)散測(cè)定中有哪些主要影響因素?9.如何保證速率散射比濁法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確?10.如何評(píng)估腎小球?yàn)V過膜破壞程度?11.如何判定血腦屏障受損程度?12.如何正確選擇測(cè)定M蛋白的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目?免疫球蛋白是由漿細(xì)胞所產(chǎn)生能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的球蛋白分為IgG、IgA、IgM、
8、IgE和IgD五類,其相應(yīng)重鏈分別稱為γ鏈、α鏈、μ鏈、δ鏈和ε鏈輕鏈分為κ型和λ型,兩型輕鏈無功能差異免疫球蛋白定量測(cè)定方法:單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法、火箭免疫電泳法、ELISA、免疫比濁法、放射免疫分析法小結(jié)