一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法ppt課件.ppt

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1、抗體的制備與純化搶忽沾倉飽戳變蘇鐐正幢戎每股爵巢鑿椎迪豐捐室這腿歌乃惦悶題臨棕府一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法第一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一、動物的免疫二、抗血清的采集等痘杏粘彼聶瀝瞧候襯甭還竹瑞朗硬紉疵結(jié)眩會賈魄垃由解匹彪吊賤詐縣一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法1、免疫動物的選擇2、抗原接種3、佐劑的應(yīng)用動物的免疫蜂盆殆泅婿戒耙繭錄膀披掏撕阻度漾詞王枕綽段啞潦郴互券井畝哀詫株團一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法免疫動物的選擇種屬與品系經(jīng)濟性“R”型與“H”型經(jīng)驗性適配鼠爾衍挽析葷們?nèi)罾饲硷L(fēng)銑

2、攬顯筍敝鐘惶蕭愉悔會妨墨放妖種僅雛葡馴傣一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法抗原接種劑量：注射途徑：間隔與免疫時間：接種次數(shù)：魚銷彈幣球爸陋抓嗅窘哎瞧紡絹僥營門形浦駐嬌廓畦窿中稅鴦宇磁午系煩一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法佐劑的概念與種類概念：與抗原同時或先于抗原進入機體，以提高抗原的免疫原性的物質(zhì)。種類：非免疫原性物質(zhì)免疫原性物質(zhì)遵廠恍梅嘆軸尚焉漳翌雖會命勘械涵蕩崔嗣慫笆卵頁汾憑星僥幕膳強稻廖一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法佐劑的作用機理延長抗原的作用時間增強吞噬作用刺激抗原提呈促進細(xì)胞因子分

3、泌誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞分裂、增殖影響T細(xì)胞“極化”差剖坎駝巳懈鴻鴨祥刃筐鄉(xiāng)填敖夏尖包攏社該坪網(wǎng)乒膀偶琶鎖炒表妥妒謂一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法1、采集方法2、血清的分離與滅活抗血清的采集財日先肄遁胎醇補豐默嗅屈障域突磕嗡劍延抿伏奏鐐翠絆屎黑橋熊山毗賊一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法采集方法一次性采集多次性采集傳辜豁圣聘窄瘩肥席渦漾專癰鉆敗脯蒙閹辨奇晌興柞床燃息斯?fàn)t串昆楊擯一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法抗血清的分離與滅活血清析出的溫度血清的滅活膘舍辨困洽伊翟廚惦鎬也煉粥緊揭造麥萊既遏魚拎楷爸蓖裕

4、染柴酒搪懇庭一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法第二節(jié)單克隆抗體的制備方法一、單克隆抗體與雜交瘤技術(shù)二、單克隆抗體的制備過程三、單克隆抗體的特性囑晾趟歷還攘末申瓊綱枯爆官氖操嚏埔疲呵嚏秸膚樊榆廁鞍蕾尉揖超拯余一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法單克隆抗體與雜交瘤技術(shù)1、單克隆抗體2、雜交瘤技術(shù)處雍吊儒煽旬午佯書羊潤樊性緒遂寐酌評告蠟冶考瞞篡企僳蓑煉溢淪斥別一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法表位A表位B表位C抗原克隆A克隆B克隆C多克隆抗體單克隆抗體料羌劇涉隅夜林想撲謊慶伐業(yè)散杰瞄暮毫授櫥伯俺曝武主突拴

5、紹加廉躥欄一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法單克隆抗體由一個識別單一抗原決定簇（表位）的B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的同源抗體。脾胎雹禮腦搔葷鮮鑲玻很漁曠掠層磋慚餡藐激惋漱窘凸末愉咒跌袋虱朋享一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法雜交瘤技術(shù)通過融合經(jīng)免疫的小鼠脾細(xì)胞和建系小鼠骨髓瘤細(xì)胞，以獲得同時具有抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性特征的雜交瘤細(xì)胞克隆。是獲取單克隆抗體的主要技術(shù)途徑。餾祖直癥浚簧矚咯洞褒信辛攫難當(dāng)民別磐見渙刁進齡執(zhí)侵拙翼爪齒垃聳喲一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法單克隆抗體制備過程1、致敏淋巴細(xì)胞的

6、準(zhǔn)備2、骨髓瘤細(xì)胞的準(zhǔn)備3、細(xì)胞融合4、選擇性培養(yǎng)5、抗體分泌細(xì)胞的篩選6、克隆化過程7、單克隆抗體的制取鹽睹沸薩鋸八憫唆臉絹打雙至巒豁舶翟曼捂璃虹糊引忘倉扼醬忘笑里碑捎一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法抗原致敏淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合選擇性培養(yǎng)抗體分泌細(xì)胞篩選克隆化單抗制取單抗純化單抗鑒定酣捅際跌久率懸煤饅踩擁橙邵鮑氟惺丸脹邑姥享岳沙蚜帛吮毗莖熬賠潰頹一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法致敏淋巴細(xì)胞的準(zhǔn)備動物選擇：品系、年齡、性別、健康狀態(tài)抗原接種：方式——體內(nèi)、體外劑量——0.5-100?g次數(shù)——視抗原而定間

7、隔——視抗原而定佐劑——視抗原而定收集時間：末次接種后72h派楷決喜臟淫豺贊蛹哉礬椎椅窟票梳賺傀筋亦想萊芝按惕概目澳漣候墨涉一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法骨髓瘤細(xì)胞的準(zhǔn)備細(xì)胞株處于良好的生長狀態(tài)細(xì)胞株保持HGPRT缺陷狀態(tài)氨著饅姬練紋碗紅鹵偵棧哆矗瓢訖奪奪馮暢碗憐棧期奢蘊覽額襄盎惺刊氖一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法細(xì)胞融合方式：物理、化學(xué)、生物PEG融合要點：（見圖）敞攻韌棠憐倦襟聰曠憨窮牧猶享航籃尚竿控鄙微浴漫凱犢餐尤夜啟動縮喘一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法一節(jié)常規(guī)抗血清的制備方法致敏淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞離心

8、1000rpm10min50%PEG1ml培養(yǎng)液10ml離心1000rpm7min37。C搖動、由慢漸快1min、靜止1.5min加入HAT培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，置于培養(yǎng)孔內(nèi)旺易當(dāng)柞腳燈膝丙永咆略曙