綠色熒光蛋白(GFP).ppt

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1、了不起的綠色熒光蛋白（GFP）By:藥劑121大家好前言2008年10月8日，諾貝爾化學(xué)獎揭曉。日本科學(xué)家下村修、美國科學(xué)家馬丁?查爾非和錢永健因發(fā)現(xiàn)和改造綠色熒光蛋白（GFP）而獲獎。GFP大家都不陌生，細(xì)胞中散發(fā)著點點綠光，煞是好看。1962年被發(fā)現(xiàn)，1992年被克隆，中間隔了30年。而在最近十幾年它才在生物界中被廣泛應(yīng)用。C:UsersAdministratorDesktop分子細(xì)胞錢永健希望更多中國青年投身基礎(chǔ)研究_標(biāo)清.mp42008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者1928年出生于日本京都市，畢業(yè)于名古屋大學(xué)，是日本化學(xué)家、海洋生物學(xué)。1960年開始，在美國普林斯頓大學(xué)

2、學(xué)者約翰遜的邀請下，前往美國，先后在普林斯頓大學(xué)、波士頓大學(xué)和麻省伍茲霍爾海洋生物實驗所工作。下村修2008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者1961年，下村修等人從大量的多管水母屬中分離了水母素及腔腸素。他們發(fā)現(xiàn)生物發(fā)光是由鈣離子引發(fā)的。這項研究開展了對綠色熒光蛋白的研究。1962年，他從一種水母中發(fā)現(xiàn)了熒光蛋白，被譽為生物發(fā)光研究第一人。下村修維多利亞多管發(fā)光水母能夠放出藍色的熒光。這是透過快速釋放與水母素相互作用的鈣離子（Ca2+）生成的。所放出的藍光會被綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)榫G光。水母素和綠色熒光蛋白都是生物學(xué)研究的重要工具。2008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者*平田義正與海螢*弗蘭克·約翰遜的

3、邀請與星期五港*80歲與20年博士后下村修美國星期五港2008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者生于1947年，為美國哥倫比亞大學(xué)生物學(xué)教授。他獲獎的主要貢獻在于向人們展示了綠色熒光蛋白作為發(fā)光的遺傳標(biāo)簽的作用，這一技術(shù)被廣泛運用于生理學(xué)和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。馬丁·查爾菲（MartinChalfie）2008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者查爾菲的實驗室用秀麗隱桿線蟲來研究神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)育和功能。這類線蟲的發(fā)育、解剖、遺傳和分子信息都很豐富，為研究提供了強有力和多元的支持。綠色熒光蛋白基因在秀麗線蟲的表達。馬丁·查爾菲（MartinChalfie）2008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者他與TulleHazelrigg結(jié)了婚

4、。她后來加入了哥大。她允許他引用她在"GreenFluorescentProteinasaMarkerforGeneExpression"上的未發(fā)表研究，條件是他在一個月的時間內(nèi)煮咖啡、做飯、每晚倒垃圾。馬丁·查爾菲（MartinChalfie）2008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者2008年度諾貝爾化學(xué)獎獲得者之一，我國著名的錢氏家族的一員，美國生物化學(xué)家。1994年起，錢永健開始研究GFP，改進GFP的發(fā)光強度，發(fā)光顏色（發(fā)明變種，多種不同顏色），發(fā)明更多應(yīng)用方法，闡明發(fā)光原理。世界上應(yīng)用的FP，多半是他發(fā)明的變種。他的專利有很多人用，有公司銷售。錢永健2008年諾貝爾化學(xué)獎獲得者“

5、我總是被色彩所吸引，”錢永健說，正是色彩，讓他的工作更有趣，“當(dāng)工作進展得不順利時，因為色彩，我可以把工作繼續(xù)進行下去。如果我天生是色盲，估計我不會取得今天的成就了?！卞X永健經(jīng)錢永健改造后的各色熒光蛋白。目錄綠色熒光蛋白簡介GFP應(yīng)用前景最新進展綠色熒光蛋白（GFP）GFP由238個氨基酸組成，分子量為26.9kDa，最初是從維多利亞多管發(fā)光水母中分離出來的，在藍光照射下會發(fā)出綠色熒光。來源于水母的野生型GFP在395nm和475nm分別有主要和次要的激發(fā)峰，它的發(fā)射峰在509nm，處于可見光譜的綠色區(qū)域（圖1）。來源于海腎的GFP只在498nm有單個激發(fā)峰。綠色熒光蛋白（GF

6、P）GFP是典型的β桶形結(jié)構(gòu)，包含β折疊和α螺旋，將熒光基團包含在其中（圖2）。嚴(yán)密的桶形結(jié)構(gòu)保護著熒光基團，防止它被周圍環(huán)境淬滅。GFP表達后折疊環(huán)化，在氧存在下，內(nèi)部面向桶形的側(cè)鏈誘導(dǎo)Ser65–Tyr66–Gly67三肽環(huán)化，導(dǎo)致熒光基團形成。綠色熒光蛋白（GFP）其蛋白性質(zhì)極其穩(wěn)定，易耐受高溫處理，甲醛固定和石蠟包埋不影響其熒光性質(zhì)，并且無光漂白現(xiàn)象。如用酸、堿或鹽酸胍處理，一旦恢復(fù)中性環(huán)境．或去除變性劑，熒光就可恢復(fù)并具有和原來一致的發(fā)射光譜。綠色熒光蛋白（GFP）綠色熒光蛋白的優(yōu)勢：1．不需加任何底物．熒光性質(zhì)穩(wěn)定。2.相對分子質(zhì)量小，對細(xì)胞無毒性。3.作為熒光靶使

7、用方便,可直接用于活體測定綠色熒光蛋白的應(yīng)用前景骨架和細(xì)胞分裂動力學(xué)和泡囊運輸發(fā)育生物學(xué)生物技術(shù)中的應(yīng)用研究腫瘤發(fā)病機制的應(yīng)用在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的應(yīng)用光伏發(fā)電神經(jīng)生物學(xué)綠色熒光蛋白的應(yīng)用前景將綠黃紅熒光蛋白質(zhì)植入魚的DNA分子結(jié)構(gòu)中綠色熒光蛋白的應(yīng)用前景1．分子標(biāo)記將GFP作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽（proteintagging），利用DNA重組技術(shù)，將目的基因與GFP基因構(gòu)成融合基因，轉(zhuǎn)染合適的細(xì)胞進行表達，然后借助熒光顯微鏡便可對標(biāo)記的蛋白質(zhì)進行細(xì)胞內(nèi)活體觀察。利用GFP的這一特性已經(jīng)加深了我們對細(xì)胞內(nèi)一