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1、共軛亞油酸論文：產(chǎn)共軛亞油酸丙酸菌的篩選及發(fā)酵條件研究【中文摘要】亞油酸(LinoleicAcid;LA)是人體必需的三大不飽和脂肪酸之一,作為亞油酸異構(gòu)體的共軛亞油酸(ConjugatedLinoleicAcid;CLA)因其具有多種重要生理功能而備受關(guān)注。目前CLA的生產(chǎn)主要是采用化學(xué)法,而利用生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)CLA也日漸成為研究的熱點(diǎn)。本論文通過建立簡單的CLA含量測定方法,從食品中分離篩選出產(chǎn)CLA量較高的丙酸菌菌株,并對篩選所得菌株的培養(yǎng)基和發(fā)酵轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行優(yōu)化以提高其產(chǎn)量,本論文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：1.自奶酪中篩選獲得具有產(chǎn)CLA能力的菌株共13株,其
2、中菌株P(guān)F-3的相對最好,其產(chǎn)CLA能力為38.41μg·mL-1。利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)對發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行檢測,進(jìn)一步確認(rèn)菌株P(guān)F-3具備產(chǎn)CLA的能力。通過常規(guī)鑒定手段對菌株P(guān)F-3進(jìn)行鑒定,鑒定結(jié)果顯示該菌株為費(fèi)氏丙酸桿菌(Propionibacteriumfreudenreichii)。2.對不同的培養(yǎng)基進(jìn)行了初步優(yōu)化,確定了MRS培養(yǎng)基作為發(fā)酵培養(yǎng)基。通過正交實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面法(RSM)優(yōu)化研究了丙酸桿菌PF-3發(fā)酵生產(chǎn)CLA的培養(yǎng)基成分和發(fā)酵條件。得到的最優(yōu)培養(yǎng)基成分為：蛋白胨(2%)、牛肉膏(1%)、酵母膏(0.5%)、葡萄糖(2.5%)、乙酸鈉(
3、0.5%)、檸檬酸銨(0.3%)、磷酸氫二鉀(0.2%)、硫酸錳(0.02%)、硫酸鎂(0.02%)。最佳發(fā)酵條件為：菌體接種量10.2%(v/v),LA添加量0.075%,pH6.75,反應(yīng)溫度31℃,Tween-80作為乳化劑(LA/Tween-80為1：20)的條件下,厭氧振蕩培養(yǎng)36h。菌株P(guān)F-3在優(yōu)化后的條件下,其CLA產(chǎn)量為63.58μg-mL-1?！居⑽恼縇inoleicacid(LA)isoneofthethreeessentialunsaturatedfattyacids,theconjugatedlinoleicacid(CLA)whichi
4、stheisomeroflinoleicacid,hasrecentlyattractedmuchattentionbecauseofitsimportantvarietyofphysiologicalfunctions.Currently,themainlymethodtoproducingCLAisbychemicalapproaches,andthebiologicaltransformationmethodtoproducingCLAisbecomingaresearchhotspot.Inthisthesis,wescreenedPropionibacter
5、iumstrainswithhighCLAproducingcapacityfromfood,thenoptimizedthefermentationmediumandfermentationconditionsbasedonthefastdeterminationmethodofCLA,themaincontentsandresultsofthispaperareasfollows:1.Thereare13strainswhichproducingCLAwerescreenedfromcheese.StrainPF-3,hastherelativelyhighest
6、CLAproducingability,theCLAproductivityisupto38.41μg·mL-1.ThefermentationproductsweredetectedbyGasChromatography-MassSpectrometry(GC-MS),andthestrainPF-3hastheabilitytoproduceCLAbyfutherconfirmed.Accordingtotheanalysisofthecellandcolonymorphologyandphysio-biochemicalcharacteristics,theba
7、cteriumstrainPF-3wasidentifiedasPropionibacteriumfreudenreichiifinally.2.Thedifferentfermentationmediumswereoptimizedpreliminary,andtheMRSmediumwasdefinedasculturemedium.FermentationconditionstoproduceCLAofstrainPF-3werestudiedbyusingresponsesurfaceanalyticmethodandorthogonalex
