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《產(chǎn)共軛亞油酸丙酸菌的分離及發(fā)酵條件的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、Y90s-7£s中圖分類號:TS201.56密級:公開⑧浙爐工角矢尊碩士學位論文論文題目:芒基塹亞油酸亟酸菌的坌離壁蕉醛筮住鮑塑窒作者姓名:塞9愛鍪浙江工商大學碩士研究生論文產(chǎn)共軛亞油酸丙酸菌的分離及發(fā)酵條件的研究摘要共軛亞油酸是一種非常重要的不飽和脂肪酸,可看作亞油酸的衍生物。具有抗癌、抗粥狀動脈硬化、提高機體免疫力等頗為引人注意的生理功能,廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和飼料等工業(yè)。國外已經(jīng)研究了采用化學方法以及微生物轉(zhuǎn)化法獲取共軛亞油酸的多種工藝路線。近年來我國在化學方法以及微生物發(fā)酵法生產(chǎn)共軛亞油酸方面已
2、開始有少量的研究報道。本論文對丙酸菌生物轉(zhuǎn)化法生成共軛亞油酸展開研究,主要包括產(chǎn)共軛亞油酸的丙酸菌菌種篩選,丙酸菌轉(zhuǎn)化條件和高密度培養(yǎng)的研究,以及混合微生物轉(zhuǎn)化工藝的研究等。本文從青貯飼料和干酪中分離得到的十幾株疑似丙酸菌,對它們進行產(chǎn)共軛亞油酸能力和發(fā)酵產(chǎn)物丙酸的篩選,最終得到3株產(chǎn)共軛亞油酸的丙酸菌,其中一株產(chǎn)共軛亞油酸較高的菌株HZ—P.65(共軛亞油酸產(chǎn)生能力15.743ug/mE),采用細菌形態(tài)學、電鏡透射與掃描圖像分析、生理生化等研究,初步鑒定該菌株為一株費氏丙酸桿菌。該菌株丙酸產(chǎn)量為9.64
3、9/L,丙酸與乙酸之比接近3.5:1。對不同培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進行了初步優(yōu)化得出:培養(yǎng)基為MRS培養(yǎng)基,接種量為10%,培養(yǎng)溫度為30。C,在培養(yǎng)之初加入LA,底物LA濃度為1000ug/mL,轉(zhuǎn)化時問為120h,添加吐溫-80作分散劑,LA浙江工商大學碩士研究生論文和SO的比為1:201對,CLA的最高產(chǎn)NJ拯lJ40.033lag/mL。研究了發(fā)酵技術(shù)對丙酸菌高密度培養(yǎng)及轉(zhuǎn)化合成CLA的影響。pH-stat培養(yǎng)技術(shù)一定程度上克服了因pH值下降、酸積累而引起的抑制作用,菌體密度較高,共軛亞油酸產(chǎn)量也相對提
4、高。丙酸菌在pH6.0進行pH—stat培養(yǎng),菌體密度可達12.42,CLA產(chǎn)量最高達45.801lag/mL。在此基礎(chǔ)上,進行了間歇補料和連續(xù)補料培養(yǎng),間歇補料培養(yǎng)菌體OD值最大達18.18,CLA產(chǎn)量最大值達50.93499/mL;連續(xù)補料培養(yǎng)菌體OD值最大達17.35,CLA產(chǎn)量最大值達55.86799/mL。由于丙酸菌和乳酸菌之問存在互生作用,且這兩種菌均能轉(zhuǎn)化合成共軛皿油酸,所以,我們對丙酸菌和乳酸菌混合培養(yǎng)轉(zhuǎn)化合成共軛亞油酸進行了初步研究。主要從不同溫度和不同接種比例考慮其對混合培養(yǎng)的影響,確
5、定了混合培養(yǎng)的最適培養(yǎng)溫度30。C,最佳接種比例2:1和I:3。關(guān)鍵詞共軛亞油酸,丙酸菌,生物轉(zhuǎn)化,高密度培養(yǎng),混合培養(yǎng)浙江工商大學碩士研究生論文SCREENINGOFPROPl0NIBACTERIASTRAINPRODUCINGCONJUGATEDLINOLEICACIDANDSTUDYoNIT’SFERMENTATIONABSTRACTConjugatedlinoleicacid(CLA)isa11octadeca-dienoicacid(18:2)withconjugateddoublebonds.
6、Ithasgainedconsiderableattentionbecauseofitsancarcinogenic,cholesterol—depression,andgrowth—promotingpropeaies.SometechniquestosynthesizeCLAbychemicalandbiologicalprocesseshavebeenproposedabroad,however,theyalestillverylittleinChina.Inthiswork,thebiologic
7、alsynthesisforCLAwasstudied,includingscreeningofpropionibacteriastrainproducingconjugatedlinoleicacid,thestudyonthetransformationandhi.ghcelldensitycultureofpropionibacteria,andthetransformationtechnicsofmixedmicroorganismandSOonSeveralpropionibacteriawer
8、eseparatedfromsilagesandcheeseThreestrains,whichareabletosynthesisCLAandproducepropionicacid,werescreenedOUtbyUVspectrophotometry,GCandHPLC.The浙江工商大學碩士研究生論文strainHz—·P--65withthehighestCLAproductivitywasselectedforf