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《T∕SATA 036-2022 植物藥酒中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿含量的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
ICS67.05CCSX04團體標準T/SATA036—2022植物藥酒中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿含量的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法Determinationofaconitine,hypaconitineandmesaconitineinbotanicalmedicatedwine—HPLC-MS/MSmethod全國團體標準信息平臺2022-03-24發(fā)布2022-04-24實施深圳市分析測試協(xié)會發(fā)布
1T/SATA036-2022目次前言..............................................................................................................................................................II1范圍...................................................................................................................................................................12規(guī)范性引用文件...............................................................................................................................................13術(shù)語和定義.......................................................................................................................................................14原理...................................................................................................................................................................15試劑與材料.......................................................................................................................................................16儀器和設(shè)備.......................................................................................................................................................27分析步驟...........................................................................................................................................................28結(jié)果計算...........................................................................................................................................................39檢測方法的靈敏度、精密度和專屬性...........................................................................................................3附錄A（規(guī)范性）烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的相關(guān)信息......................................................................4附錄B（資料性）質(zhì)譜參考條件.......................................................................................................................5附錄C（資料性）標準色譜圖...........................................................................................................................6全國團體標準信息平臺I
2T/SATA036-2022前言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則起草。本文件由深圳市分析測試協(xié)會歸口。本文件起草單位：深圳市計量質(zhì)量檢測研究院、深圳市計量質(zhì)量檢測研究院（集團）有限責任公司。本文件主要起草人：李蕓、林爽、羅敏、程曉帆、柏文良、鄒幼成、羅爾倫、區(qū)振豪、翁曉君、梁漢旺、張貴虹。本文件為首次發(fā)布。全國團體標準信息平臺II
3T/SATA036-2022植物藥酒中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿含量的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法1范圍本文件規(guī)定了植物藥酒中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本文件適用于植物藥酒中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的定性定量測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語和定義植物藥酒：利用可食用或按照傳統(tǒng)既是食品又是中藥材（或符合相關(guān)規(guī)定）的植物及其制品，經(jīng)再加工制成的、具有特定風格的飲料酒。4原理試樣經(jīng)乙腈提取，過濾后，上清液供高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定，保留時間和相對離子豐度定性，外標法定量。5試劑與材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1甲醇：色譜純。5.2乙腈：色譜純。5.3氨水：分析純，含量為25%~28%。5.40.1%氨水溶液：精密量取氨水（5.3）1.00mL，用水稀釋至1000mL。5.5標準品：烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量詳見附錄A，純度≥99%。5.6標準儲備液（1000μg/mL）精密稱量適量烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿標準品（5.5），用乙腈溶解并制成濃度為1000μg/mL的混合標準儲備液，于4℃下避光保存，有效期3個月。5.7標準中間液（10.0μg/mL）準確移取1.00mL烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿混合標準儲備液于100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，得到10.0μg/mL的混合標準中間液，于4℃下避光保存，有效期1個月。5.8空白基質(zhì)提取液稱全國團體標準信息平臺取空白試樣適量，與樣品同法處理（7.1），作為空白基質(zhì)提取液。5.9混合標準工作溶液分別準確移取一定體積的混合標準中間液（5.7），用空白基質(zhì)溶液配制成濃度為0.500、1.00、2.00、5.00、10.0、20.0μg/L的混合標準工作液。1
4T/SATA036-20226儀器和設(shè)備6.1高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有電噴霧（ESI）離子源。6.2電子天平：感量為0.0001g。6.3超聲波清洗器。6.4渦旋混勻器。6.5微孔濾膜：0.22μm，有機相型。7分析步驟7.1試樣制備取適量試樣搖勻，吸取1.00mL于50mL離心管中，加入乙腈稀釋至10.0mL，搖勻，振蕩20min，用微孔濾膜（0.22μm，有機相）過濾，取續(xù)濾液，根據(jù)實際濃度適當稀釋至線性范圍內(nèi)，待測。7.2儀器參考條件7.2.1色譜條件a)色譜柱：C18色譜柱（1.8μm,2.1×100mm，耐受的pH值范圍：pH＞9），或性能相當者。b)流動相：A為0.1%氨水溶液，B為甲醇，梯度洗脫程序見表1。c)流速：0.3mL/min。d)柱溫：30℃。e)進樣量：2.0μL表1梯度洗脫程序表時間/min流動相A/%流動相B/%070300.270303.510905.510906.570307.070307.2.2質(zhì)譜條件a)離子源：電噴霧離子源（ESI源）。b)掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。c)干燥氣、霧化氣、鞘氣、碰撞氣等均為高純氮氣或其他合適氣體，使用前應(yīng)調(diào)節(jié)相應(yīng)參數(shù)使質(zhì)譜靈敏度達到檢測要求，毛細管電壓、離子源溫度、霧化氣壓力、輔助氣體壓力、氣簾氣壓力、碰撞能量、去簇電壓等參數(shù)應(yīng)優(yōu)化至最佳靈敏度，監(jiān)測離子對和定量離子對等信息詳見附錄B。7.3定性測全國團體標準信息平臺定按照高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件測定試樣和標準工作溶液，記錄試樣和標準溶液中各化合物的色譜保留時間，以相對于最強離子豐度的百分比作為定性離子對的相對豐度，記錄濃度相當?shù)脑嚇优c標準工作溶液中相應(yīng)成分的相對離子豐度。當試樣中檢出與標準品質(zhì)量色譜峰保留時間一致的色譜峰（變化2
5T/SATA036-2022范圍在±2.5%之內(nèi)），并且相對離子豐度允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍，可以確定試樣中檢出相應(yīng)化合物。表2定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度/%>50>20-50>10-20≤10允許的相對偏差/%±20±25±30±507.4定量測定7.4.1標準曲線的制作將標準工作溶液（5.9）分別按儀器參考條件（7.2）進行測定，得到相應(yīng)的標準溶液的色譜峰面積。以標準工作溶液的濃度為橫坐標，以色譜峰的峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，在濃度范圍0.500～20.0μg/L內(nèi)，相關(guān)系數(shù)不低于0.99。標準品提取離子色譜圖參見附錄C。7.4.2試樣溶液的測定將試樣溶液（7.1）按儀器參考條件（7.2）進行測定，得到相應(yīng)的樣品溶液的色譜峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測液中組分的濃度。7.5空白試驗除不加試樣外，均按上述操作步驟進行操作。8結(jié)果計算將液相色譜-質(zhì)譜測得濃度代入下式計算含量：c?VX??K…………………………………………（1）V樣式中：X—試樣中各待測物的含量，單位為微克每升（μg/L）；c—從標準曲線中讀出的供試品溶液中各待測物的濃度，單位為微克每升（μg/L）；V—樣液最終定容體積，單位為毫升（mL）；V樣—試樣溶液所代表的體積，單位為毫升（mL）；K—稀釋倍數(shù)；計算結(jié)果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。9檢測方法的靈敏度、精密度和專屬性9.1靈敏度當取樣量為1.00mL，定容體積為10.0mL時，本方法的檢出限為5.00μg/L，定量限為10.0μg/L。9.2精全國團體標準信息平臺密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的15%。9.3選擇性取空白溶液(7.5)進樣測定，應(yīng)無干擾。3
6T/SATA036-2022附錄A（規(guī)范性）烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的相關(guān)信息表A.1烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量烏頭堿Aconitine302-27-2C34H47NO11645.74次烏頭堿Hypaconitine6900-87-4C33H45NO10615.72新烏頭堿Mesaconitine2752-64-9C33H45NO11631.72全國團體標準信息平臺4
7T/SATA036-2022附錄B（資料性）質(zhì)譜參考條件a)離子源：電噴霧離子源(ESI)；b)檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；c)掃描方式：正離子模式；d)毛細管電壓：5500V；e)離子源溫度：500℃；f)霧化氣壓力：60psi；g)輔助氣體壓力：60psi；h)氣簾氣壓力：30psi；i)其他質(zhì)譜參數(shù)見表B.1。表B.1烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的定性離子、定量離子和質(zhì)譜分析參數(shù)參考值化合物名稱電離方式母離子(m/z)子離子(m/z)去簇電壓/V碰撞能量(eV)587.4*6046烏頭堿ESI+646.9527.36052368.26057557.3*6045次烏頭堿ESI+616.9525.36050573.3*6046新烏頭堿ESI+633.1541.26051354.26057*定量離子對。全國團體標準信息平臺5
8T/SATA036-2022附錄C（資料性）標準色譜圖圖C.1烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿混合標準品色譜圖_________________________________全國團體標準信息平臺6
