基于形態(tài)學標記及ssr+標記的甜瓜主栽品種分類鑒定研究

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1、研究論文中國蔬菜CHINAVEGETABLES2014（6）：20-27基于形態(tài)學標記及SSR標記的甜瓜主栽品種分類鑒定研究*李瑞峰　高　鵬　朱子成　欒非時（東北農業(yè)大學園藝學院，黑龍江哈爾濱150030）摘　要：利用形態(tài)學標記、SSR分子標記技術對市場上廣泛種植的甜瓜品種進行分類鑒定。利用形態(tài)學聚類分析，得到60份材料間的相似系數(shù)為0.73～0.94，在相似系數(shù)為0.74處，60份甜瓜材料被分為2類，為薄皮甜瓜和厚皮甜瓜；在相似系數(shù)為0.77處，薄皮甜瓜按照單果質量、熟性、果皮底色、芳香氣分為4組，實現(xiàn)初步分類。經過SSR標記聚類分析，得到60份材料

2、間的相似系數(shù)為0.75～0.95，當相似系數(shù)為0.77時，可以將所有供試材料分為6類。利用SSR分子標記技術，為60份不同甜瓜品種構建唯一的指紋圖譜。18對SSR引物，每對引物可以檢測到4～11條數(shù)目不等的多態(tài)性條帶，平均為8條。多態(tài)性信息含量（PIC）平均為0.71，變化范圍為0.58～0.88。采用QR編碼為60份甜瓜材料構建了唯一的指紋圖譜。試驗結果表明形態(tài)學標記對60份材料實現(xiàn)初步分類，SSR分子標記則能夠有效地區(qū)別60份材料，并且為建立甜瓜品種的核酸指紋圖譜庫提供了理論數(shù)據，實現(xiàn)對甜瓜品種進行快速、準確的鑒定。關鍵詞：甜瓜；形態(tài)學標記；SSR標

3、記；聚類分析；指紋圖譜自1981年以來，中國甜瓜產量一直穩(wěn)居世界狀易受環(huán)境影響，因此品種鑒定分類不能只靠田間第一，在世界總產量中占據半壁江山。正是由于我性狀。分子標記技術的發(fā)展，為品種鑒定提供了新國是甜瓜生產和消費第一大國，近年來中國甜瓜的的途徑（Naitoetal.，2008）。前人已將分子標記技市場潛力快速開發(fā)，每年都有大量的甜瓜新品種涌術廣泛應用于葫蘆科瓜類作物，Staub等（2004）入市場。隨著新育成品種的不斷增加，骨干親本的利用RAPD分子標記技術對希臘甜瓜進行了多樣重復使用，新基因資源的缺乏，新育成品種的鑒定性研究；劉萬勃等（2002）利用

4、RAPD和ISSR分難度逐漸增大；加之當前中國甜瓜種子市場尚不夠子標記技術對37份甜瓜種質進行了遺傳多樣性研規(guī)范，一些單位受商業(yè)利益驅動掩蓋或篡改品種名究；徐志紅等（2008）利用AFLP分子標記技術對稱，導致甜瓜市場材料普遍存在著由于同名異物或31份甜瓜材料遺傳多樣性和親緣關系進行了研究；同物異名現(xiàn)象導致的品種真實性問題（王美榮等，Szabó等（2005）利用SSR技術對47份中世紀甜瓜2010）。為解決甜瓜種子經營中的糾紛與市場混亂種質進行了分析；艾呈祥等（2006）在比較分析各問題，有必要建立中國甜瓜品種的核酸指紋庫，為試材圖譜的基

5、礎上，探討了品種指紋圖譜的統(tǒng)計學甜瓜品種純度與真實性的鑒定提供理論依據和技術方法，并對構建的2個甜瓜雜交種的指紋圖譜進行支撐，保護瓜農和育種家們的利益。了可信度分析，建立了適于種子檢驗中使用的標準由于甜瓜本身類型非常豐富，且雜交種表型性SSR標記指紋圖譜。宋海斌（2012）利用SSR分子標記技術對471份甜瓜材料進行真實性鑒定，構建李瑞峰，女，碩士研究生，專業(yè)方向：甜瓜分子育種，E-mail：SSR指紋代碼，發(fā)現(xiàn)其中52份材料的指紋代碼不lrf0208@163.com具有唯一性。本試驗利用形態(tài)學標記對60份甜瓜*通訊作者（Correspondingaut

6、hor）：欒非時，女，教授，博士生導師，材料的12個表觀性狀進行調查記錄，初步分類，專業(yè)方向：西甜瓜分子遺傳育種，E-mail：luanfeishi@sina.com同時利用SSR分子標記構建指紋圖譜，以期為中國收稿日期：2014-01-06；接受日期：2014-03-14基金項目：國家西甜瓜產業(yè)技術體系—分子育種崗位項目（CARS-26-02）甜瓜指紋圖譜庫的建立提供理論依據?！?20—《中國蔬菜》學術論文下載www.cnveg.org中國蔬菜CHINAVEGETABLES研究論文凍，然后置于-80℃冰箱中保存。待果實成熟時調1　材料與方法查12個

7、生物學性狀。分子試驗在東北農業(yè)大學園1.1　試驗時間與地點藝學院西甜瓜分子遺傳育種實驗室進行，主要包括試驗于2012年3月至2013年10月進行。其材料DNA提取、SSR-PCR擴增等。中田間試驗在東北農業(yè)大學試驗實習基地24號大1.2　試驗材料棚進行。將60份甜瓜材料每份取20粒飽滿種子，以60份中國市場上廣泛種植的甜瓜品種為試經過8h浸種，于28℃培養(yǎng)箱催芽，待80%種子材，包括46份薄皮甜瓜，14份厚皮甜瓜（表1）。出芽時播種于營養(yǎng)缽中，幼苗2～3片真葉時定植。供試材料分別來自北京（9份）、甘肅（3份）、河南（2在整枝時每株摘取幼嫩葉片混勻，放入液

8、氮中速份）、黑龍江（10份）、吉林（23份）、遼寧（