赭曲霉毒素a快速檢測方法研究進(jìn)展及其在中藥中的應(yīng)用前景

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1、赭曲霉毒素A快速檢測方法研究進(jìn)展及其在中藥中的應(yīng)用前景［］赭曲霉毒素A(OTA)是一類主要由曲霉屬和青霉屬等真菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，具有強(qiáng)烈的腎毒性，致畸、致癌、致突變等作用。研究表明OTA不僅廣泛污染于食品飼料和農(nóng)作物中，近年來在香辛料、甘草等中草藥中也被證實(shí)廣泛存在。鑒于OTA的普遍性和危害性，？文分別綜述了可視化試紙條、流式微球技術(shù)、電化學(xué)傳感器、表面增強(qiáng)拉曼光譜等技術(shù)在OTA快速檢測上的應(yīng)用，預(yù)期為實(shí)現(xiàn)OTA檢測快速化、操作簡單化、儀器小型化的高通量檢測研宄和應(yīng)用提供參考。［關(guān)鍵詞］赭曲霉毒素A;中藥；快速檢測方法［Abstract］OchratoxinA(OT

2、A)isatoxicsecondarymetabolitemainlyproducedbyAspergillusandPenici11iumspecies，withstrongrenaltoxicity，teratogenic，carcinogenic，mutageniceffect.StudieshaveshownthatOTAisnotonlywidelycontaminatedinChineseherbalmedicinessuchasspices，licoriceandsoon.InviewofOTAsuniversalityandharmfulness,thi

3、spapersummarizestheflowvisualizationteststrip,microsphere,electrochemicalsensor,surfaceenhancedRamanspectroscopytechnologyinOTArapiddetection,whichprovidesreferencefortheresearchandapplicationofhighthroughoutdetectioninstrumentminiaturizationinordertoachieveOTAquickdetectionandsimpleoper

4、ation.[Keywords]ochratoxinA；Chinesemedicine；rapiddetectionmethod隨著中藥材出口逐年增加，我國中藥材的安全問題也受到了全世界的廣泛關(guān)注。中藥材安全問題除了其自身的內(nèi)源性毒素，例如川烏中的烏頭堿、雷公藤中的雷公藤堿等外，真菌毒素、農(nóng)藥、重金屬這3大主要外源性污染物也嚴(yán)重威脅著中藥材的安全性和品質(zhì)。由于中藥材本身營養(yǎng)成分豐富和外部環(huán)境的影響，在種植、采收、加工、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏過程中操作不當(dāng)極易污染真菌，進(jìn)而產(chǎn)生各種真菌毒素[1]。真菌毒素是巾真菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，種類繁多，包括黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、玉米

5、赤霉燏酮等，其中赭曲霉毒素A(OTA)是由二氫異香豆素以酰胺鍵結(jié)合1個(gè)苯丙氨酸形成的苯基氨酰衍生物，是赭曲霉毒素系列中毒性最強(qiáng)的真菌毒素，在二氫異香豆素環(huán)上的氯原子可以增強(qiáng)毒性，脫氯的赭曲霉毒素B(OTB)其毒性要比OTA小10倍。OTA主要由純綠青霉、赭曲霉和碳黑曲霉產(chǎn)生，不僅具有致癌、致畸和致突變作用，還具有肝腎毒性、免疫毒性等，而且化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，只有在250°C以上溫度加熱數(shù)分鐘才能降低OTA的濃度，己被國際癌癥研究中心（IARC）定義為II類致癌物質(zhì)，這嚴(yán)重影響了中藥的質(zhì)量和療效，對人類健康造成極火威脅，也阻礙其進(jìn)出口貿(mào)易和中藥國際化和現(xiàn)代化進(jìn)程，如歐盟規(guī)定辣椒

6、、肉豆蔻、干姜、姜黃及其混合物中OTA的限量為15yg?kg-l,甘草根的浸潰物中OTA限量為20ug?kg-l,中國臺灣對嬰兒食品中OTA的限量標(biāo)準(zhǔn)為不得檢出［2-6］。1中藥中赭曲霉毒素污染現(xiàn)狀中藥大多來源于自然界中的植物和動(dòng)物，而產(chǎn)赭曲霉毒素A的霉菌在自然界中具有廣泛性。因此，中藥也容易受到這些霉菌的侵害。近年來隨著中藥在疾病預(yù)防與治療、保健品、食品開發(fā)等方面重要性的提高，中藥中真菌毒素的污染也備受關(guān)注。為了保障中藥、保健品和食品等安全及人體健康，世界各國及相關(guān)組織十分重視真菌毒素的檢測及其污染的控制。我國中藥材品種繁多，資源豐富，就藥典收錄的品種就有2000余種

7、，種植和加工技術(shù)有很大的差別，成分基質(zhì)復(fù)雜。近幾年文獻(xiàn)報(bào)道，OTA污染主要集中在根及根莖類、種子果實(shí)類和芳香植物中等［7-12］，見表1。2基于抗體的快速檢測方法基于抗體的快速檢測是以抗體抗原免疫化學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，對抗體抗原含量進(jìn)行測定的一種方法，具有高度的特異性、靈敏度和快速簡便等優(yōu)點(diǎn)。OTA相對分子質(zhì)量為403.82，屬于半抗原，抗原性較弱，在免疫反應(yīng)中，只具有反應(yīng)原性而不具有免疫原性，因此只有與蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)結(jié)合后，才具有免疫原性［13］。2.1膠體金免疫色譜技術(shù)膠體金免疫色譜技術(shù)（goldimmunochromatography