燈盞花素對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦內(nèi)fas表達(dá)的抑制作用的論文

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1、燈盞花素對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦內(nèi)Fas表達(dá)的抑制作用的論文【摘要】目的研究燈盞花素對(duì)大鼠腦缺血再灌注引起腦損傷的保護(hù)作用，探討其作用機(jī)制。方法選用40只雄性gso4治療組、燈盞花素治療組ⅰ和ⅱ（breⅰ、ⅱ組）。結(jié)扎中腦動(dòng)脈，然后再灌注。用tunel法和免疫組化法分別檢測腦組織凋亡細(xì)胞和fas陽性細(xì)胞的變化。結(jié)果①降低腦組織凋亡細(xì)胞：mgso4組、breⅰ、ⅱ組在腦缺血再灌注23h后海馬區(qū)凋亡神經(jīng)元/海馬神經(jīng)元均較ir組海馬區(qū)凋亡神經(jīng)元/海馬神經(jīng)元低，差異有顯著性。②降低fas陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)量：mgso4組、breⅰ組和

2、breⅱ組在腦缺血再灌注23h后海馬區(qū)fas表達(dá)陽性神經(jīng)元/海馬神經(jīng)元均較ir組海馬區(qū)fas表達(dá)陽性神經(jīng)元/海馬神經(jīng)元低，差異有顯著性。結(jié)論燈盞花素可顯著保護(hù)大腦缺血再灌注引起的腦損傷,可能與其抑制fas蛋白的表達(dá)有關(guān)。其作用優(yōu)于單用mgso4?！娟P(guān)鍵詞】燈盞花素；腦缺血；再灌注；凋亡細(xì)胞；fas蛋白　　abstract:objectivetostudytheprotectiveeffectandmechanismofbreviscapineonratcerebraldamageafterischemiareperfu

3、sion.methods40malegroup,irgroup,mgso4treatmentgroup,breviscapinetreatmentgroupⅰandⅱ.thebrainarteryethodandimmunohistochemicalmethodrespectively.results①apoptosisofneuronscellsinbraingso4group,breⅰgroupandbreⅱgroupshopusapoptosisneurons/hippocampalneurons23hrsafte

4、rischemiareperfusion,andbregroupgso4group,thedifferenceberoffaspositivecellsincerebralgso4group,breⅰgroupandbreⅱgrouppusfaspositiveneurons/hippocampalneurons23hrsafterischemiareperfusion,andbregroupgso4groupinapoptosis,thedifferenceischemiareperfusionbraininjur

5、y,ightberelatedtoinhibitionoffasproteinexpression.itseffectgso4.　　keyia;reperfusion;apoptosiscells;fasprotein　　腦血管缺血性疾病是高致殘率和高死亡率的疾病，神經(jīng)保護(hù)藥物將有助于減輕缺血半暗區(qū)的損傷，促進(jìn)腦功能的恢復(fù)。.燈盞花素(breviscapine，bre)是從中藥燈盞花中提取的，其有效成份是4’羥基黃芩素7o葡萄糖醛酸苷［1］，具有顯著的抗血小板和血栓形成的活性［2,3］。燈盞花素已被用于治療缺血性腦

6、血管疾病，通過清除自由基和凋亡細(xì)胞而保護(hù)大腦。在腦缺血前后應(yīng)用燈盞花素，研究證實(shí)其對(duì)缺血再灌注(ischemiareperfusion，ir)有保護(hù)作用［4,5］，然而，其治療機(jī)制尚不完全清楚。本文進(jìn)一步研究燈盞花素(bre)對(duì)大鼠腦缺血再灌注引起腦損傷的保護(hù)作用及其可能機(jī)制，觀察其保護(hù)作用是否比mgso4更有效?！　?材料與方法　　1.1材料　　　　40只gso4(無錫第七制藥廠)，用母液治療，傳統(tǒng)常用藥物；histostaintmspkits和抗fas蛋白抗體為美國santacruz生物技術(shù)產(chǎn)品?！　?.2方法　

7、　1.2.1動(dòng)物分組　　40只l/kg；②ir組(注射生理鹽水20ml/kg)；③breⅰ組(bre50mg/kg)；④breⅱ組(bre75mg/kg)；⑤mgso4組（30mg/kg）。所有藥物在缺血10min后靜脈給藥。實(shí)驗(yàn)過程中無死亡和脫失?！　?.2.2中腦動(dòng)脈結(jié)扎(mcao)方法見文獻(xiàn)［6］。　　1.2.3原位末端標(biāo)記（tunel）染色　　用tunel方法檢測凋亡細(xì)胞的dna片段。在熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞,觀察缺血再灌注2h，5h,23h腦組織凋亡細(xì)胞的變化?！　?.2.4免疫化學(xué)染色　　免疫組織化學(xué)抗fa

8、s蛋白染色及fas蛋白陽性細(xì)胞表達(dá)的觀察與半定量測定?？焖偃∫徊糠秩毖竽X海馬組織，常規(guī)經(jīng)甲醛固定、脫水、包埋、切片(5μm)，免疫組織化學(xué)染色采用鏈霉素親生物素－過氧化物酶法(sp法)。經(jīng)梯度脫蠟、抗原修復(fù)(胰酶消化)、漂洗、小牛血清封閉非特異抗原、加一抗、漂洗、加二抗、漂洗、3，3’二氨基聯(lián)苯胺