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1、地錦草提取物體外抗真菌作用研究論文李治建，古力娜·達吾提，斯拉甫·艾白【摘要】目的對地錦草提取物進行體外抗真菌實驗，測定其最小抑菌濃度(MIC)值。方法采用美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)推薦的《產(chǎn)孢絲狀真菌的液基稀釋法抗真菌藥物敏感性試驗方案》(M38-A)，測定地錦草提取物對60株臨床常見皮膚癬菌的MIC。參考MIC結(jié)果，選取地錦草提取物敏感的6株皮膚癬菌按文獻方法進行殺菌試驗。結(jié)果地錦草提取物對紅色毛癬菌的MIC范圍為128～1024μg·ml-1，平均MIC為446μg·ml-1
2、；對石膏樣毛癬菌的MIC范圍為128～1024μg·ml-1，平均MIC為539μg·ml-1。殺菌結(jié)果顯示.freelinetheantifungaleffectofDijincaoextractinvitroandtomeasuretheminimuminhibitoryconcentration(MIC).MethodsAccordingtothestandardapprovedbytheNationalmitteeforClinicalLaboratoryStandards(NCCLS)
3、:ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofFilamentousFungi(M38-A),theMICsofDijincaoextractagainst60strainsofmonclinicaldermatophytesined.AccordingtothoseMICs,6strainsofdermatophytesbeingsensitivetoDijincaoextracticidaltestethod
4、indocuments.ResultsTheMICrangeofDijincaoextractagainstTrichophytonrubruml-1，meanMICl-1；theMICrangeofDijincaoextractagainstTrichophytonmentagrophytesl-1，meanMICl-1.Theresultofgermicidaltestshoatophytesgreatophytesinvitro.Keyankulake），為大戟科植物地錦Euphorbia
5、humifusa38-A)［2］，探討地錦草提取物的體外抗真菌活性。1材料1.1藥物地錦草提取物(DJC)，由自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所藥劑室提供。提取方法及質(zhì)量控制，參照《中華人民共和國藥品標(biāo)準(zhǔn)-維吾爾藥分冊》中百癬夏塔熱片之地錦草提取方法及質(zhì)量控制［3］。陽性對照藥特比萘酚(Terbinafine，TBF，商品名：Lamisil)，由諾華公司提供，批號010482，純度99.9%。1.2菌種紅色毛癬菌(Trichophytonrubrum，T.r)20株；石膏樣毛癬菌(Trichophytonm
6、entagrophytes，T.m)40株；質(zhì)量控制菌株為近平滑念珠菌(Candidaparapsilosis，C.p)1株。本實驗所采用的菌株，均來自新疆醫(yī)科大學(xué)真菌與真菌病研究中心菌種保藏庫(XYZ)。1.3培養(yǎng)基RPMI-1640培養(yǎng)基，美國sigma公司產(chǎn)品；三氮嗎啡琳丙磺酸（MOPS），美國sigma公司產(chǎn)品；馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)，批號20070825，北京奧博星生物科技有限公司產(chǎn)品。RPMI-1640培養(yǎng)基的配制：將10.4gRPMI-1640和34.53gMOPS粉末溶
7、于900ml蒸餾水中，用1mol·L-1NaOH溶液調(diào)整其pH至7.0(25℃)，加蒸餾水定容至1L，G-6漏斗濾過滅菌，存于4℃冰箱備用。PDA培養(yǎng)基的配制：稱取PDA粉末38g，加入1000ml蒸餾水中，搖勻加熱煮沸溶解，121℃高壓滅菌20min，分裝，4℃保存，備用。2方法2.1MIC的測定根據(jù)NCCLS推薦的《產(chǎn)孢絲狀真菌的液基稀釋法抗真菌藥物敏感性試驗方案》(M38-A)［2］，測定DJC提取物對T.r、T.m的最低抑菌濃度值(MIC)。2.1.1抗真菌藥物儲備液、稀釋液的制備稱取D
8、JC粉末204.8mg，用1ml二甲基亞砜(DMSO)溶解，制成濃度為204800μg·ml-1的儲備液，存于-20℃冰箱備用；稱取TBF8mg，用1mlDMSO溶解，制成濃度為8000μg·ml-1的儲備液。從中吸取1μl加RPMI-1640培養(yǎng)基499μl，使之稀釋500倍，此時TBF儲存液濃度為16μg·ml-1，存于-20℃冰箱備用。將DJC儲備液、TBF儲備液分別用RPMI-1640培養(yǎng)基倍比稀釋成2倍終濃度。DJC的2倍終濃度由高向低依次為：2048，1024，512，256，128
