fhit在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義

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1、Fhit在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義【摘要】目的探討脆性組氨酸三聯(lián)體基因蛋白Fhit在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法免疫組化SP法檢測12例正常子宮內(nèi)膜，32例子宮內(nèi)膜增殖癥，42例子宮內(nèi)膜癌組織中Fhit蛋白表達(dá)情況。結(jié)果Fhit蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中存在表達(dá)下降現(xiàn)象，其表達(dá)下降率為40.5%，在正常子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜增殖癥中Fhit蛋白均為陽性表達(dá)，癌組織與其相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。癌組織中，F(xiàn)hit蛋白表達(dá)下降與組織學(xué)病理分級(jí)、手術(shù)臨床分期、肌層浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05），而與患者的年齡、月經(jīng)狀況、組織學(xué)類型等

2、無關(guān)（P＞0.05）。結(jié)論Fhit蛋白表達(dá)下降與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，可作為判斷子宮內(nèi)膜癌惡性程度的指標(biāo)。【關(guān)鍵詞】子宮內(nèi)膜腺癌脆性組氨酸三聯(lián)體免疫組織化學(xué)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是多因素綜合作用的結(jié)果，其中涉及癌基因的激活、抑癌基因的失活、腫瘤細(xì)胞凋亡受抑等。抑癌基因的失活是目前腫瘤研究的熱點(diǎn)。脆性組氨酸三聯(lián)體基因（Fragilehitidinetriad,Fhit）是Ohta等［1］用外顯子捕獲法克隆出來的定位于人類3號(hào)染色體短臂3P14.2區(qū)的一候選抑癌基因。研究表明Fhit基因存在于人類所有正常組織，而在許多腫瘤組織中則存在Fhit基因的失活［2］

3、及Fhit蛋白的異常表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)通過免疫組織化學(xué)的方法，從蛋白水平檢測子宮內(nèi)膜癌組織中Fhit蛋白表達(dá)情況，并對(duì)其與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系進(jìn)行分析，探討Fhit基因與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。1材料與方法1.1材料收集蘭州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科、甘肅省腫瘤醫(yī)院病理科、蘭州市婦幼保健院病理科2001年1月～2003年11月手術(shù)切除，經(jīng)病理確診的子宮內(nèi)膜癌存檔蠟塊組織42例，同期因子宮脫垂行子宮切除術(shù)的正常子宮內(nèi)膜12例，經(jīng)宮腔鏡活檢確診的子宮內(nèi)膜增殖癥32例。所有病例術(shù)前均未接受放療、化療或激素治療?；颊咂骄挲g51歲。子宮內(nèi)膜癌組織依照FIGO（1988）

4、標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)、分期。其中組織學(xué)病理分級(jí)G118例，G213例，G311例；手術(shù)臨床分期:Ⅰ期19例，Ⅱ期15例，Ⅲ期8例；無肌層浸潤8例，淺肌層浸潤23例，深肌層浸潤11例；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移14例。1.2試劑與方法免疫組化SP法。兔抗人Fhit多克隆抗體（即用型）購自北京中山生物技術(shù)公司，SP廣譜超敏試劑盒、PBS緩沖液、DAB酶底物顯色劑等均購自福州邁新生物技術(shù)公司。石蠟組織切片常規(guī)脫蠟、水化，其余操作按SP試劑盒說明書進(jìn)行。1.3結(jié)果判定Fhit蛋白主要定位于細(xì)胞漿，以抗體在胞漿內(nèi)出現(xiàn)黃色顆粒為陽性信號(hào)。參照文獻(xiàn)［3］，對(duì)細(xì)胞染色強(qiáng)度及陽

5、性細(xì)胞百分比進(jìn)行評(píng)分。先按染色強(qiáng)度打分：0分為無色，1分為淺黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色，染色強(qiáng)度需與著色背景相對(duì)比；再按陽性細(xì)胞所占百分比打分：無陽性細(xì)胞為0分，1分為陽性細(xì)胞≤10%，2分為陽性細(xì)胞11%～50%，3分為陽性細(xì)胞51%～75%，4分為陽性細(xì)胞＞75%；染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分比的乘積≥2分為免疫反應(yīng)陽性，＜2分為表達(dá)減低或表達(dá)缺失（稱為表達(dá)下降或免疫反應(yīng)陰性）。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理SPSS8.0軟件系統(tǒng)，采用χ2檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1Fhit蛋白在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)12例正常子宮內(nèi)膜和32例子宮內(nèi)膜增殖癥組織中，F(xiàn)hi

6、t蛋白均為陽性表達(dá)，見圖1～3。42例子宮內(nèi)膜癌組織中，F(xiàn)hit蛋白陽性表達(dá)25例（59.5%）見圖4，表達(dá)下降者17例，見圖5，表達(dá)下降率40.5%。與正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜增殖癥組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2值分別為4.315、16.815；P值分別為0.011、0.000）。2.2子宮內(nèi)膜癌組織中Fhit蛋白表達(dá)與不同臨床病理參數(shù)的關(guān)系本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌組織中，F(xiàn)hit蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)相關(guān)（P＜0.05），而與患者年齡、有無絕經(jīng)及組織學(xué)類型無關(guān)（P＞0.05）。隨組織學(xué)病理分級(jí)的增加、手術(shù)臨床分期進(jìn)展及肌層浸潤程度的加深、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

7、Fhit蛋白表達(dá)降低。其中除G2與G3、Ⅱ期與Ⅲ期、浸潤淺肌層組與浸潤深肌層組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）外，其余各組差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。3討論Fhit基因定位于人類3號(hào)染色體短臂3P14.2區(qū)，是組氨酸三聯(lián)體（HistidineTriad，HIT）基因家族成員，由Ohta等［1］于1996年用外顯子捕獲法定位并克隆出來，是一候選的抑癌基因。Fhit基因由10個(gè)外顯子組成，59為編碼區(qū)，編碼由147個(gè)氨基酸組成的分子量為16.8KD的脆性組氨酸三聯(lián)體蛋白。Fhit蛋白結(jié)構(gòu)類似于二腺苷嘌呤5′，5P′

8、，P4（AP4A）不對(duì)稱水解酶，可以很好的反映Fhi