兩種洗板方法在elisa中的應(yīng)用分析

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1、兩種洗板方法在ELISA中的應(yīng)用分析【摘要】目的：探討酶聯(lián)免疫試驗(ELISA)中的洗板技術(shù)，試圖找到一種簡單、高效、經(jīng)濟、實用、可靠的ELISA洗板方法。方法：對753例臨床體檢乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的標本，分別用手工法和全自動洗板機法兩種方法進行洗板，進行組間對比分析；將弱陽性標本選出，重新檢測2次，分別用兩種方法洗板，看看弱陽性是否因洗板方法不同引起。結(jié)果：753例用ELISA方法檢測HBsAg試驗中，用手工法洗板和用洗板機洗板，經(jīng)χ2檢驗，P>0.05，兩種洗板方法差異無顯著性；18例弱陽性標本檢測

2、中，洗板方法的不同，不是造成假陽性的根本原因。結(jié)論：兩種洗板方法無差別，在ELISA實驗中，手工法可以代替洗板機法洗板。手工法簡單、高效、實用，應(yīng)可規(guī)范推廣?！娟P(guān)鍵詞】ELISA洗板；洗板方法；弱陽性　　ComparisonbetweenTwoCleaningmethodsonELISA　　Abstract:ObjectiveToinvestigatethecleaningtechnologyoftheELISA.Trytofindasimplehigheffectiveandutilitycleaningtro

3、ughsmethod.MethodsTousehandlemethodandautowashingmachinemethodtocleanthetroughs8ofHBsAgwithELISAin753healthcheckingpeoples,Comparedbetweenthetwocleaningmethods;Meanwhile,toselectweakpositivesamplesoutandtestrepeatedlytwotimes,tocleanthetroughswiththetwomethod

4、s,whetherdoesitexistdifferencebetweenthetwomethods.whetherdoesitcausethefakepositivebythecleaningmethods.ResultsThereisnotsignificantdifference(P>0.05)tocleantroughswiththetwocleaningmethodsintestingHBsAgwithELISAin753cases,Thecleaningmethodisn'ttherealcause

5、ofthefakepositiveintesting18serumsamplesofweakpositive.ConclusionWashingwiththetwocleaningmethods,theresulthasnotdifference.thewashmachinemethodcanbesubstitutedbythehandlemethod.thehandlemethodissimple,higheffectiveandpractice.　　Keywords:ELISACleaningtroughs

6、;Cleaningmethods;Weakpositive8　　在酶聯(lián)免疫試驗中，洗板是非常重要的過程。酶聯(lián)免疫試驗(ELISA)洗滌過程雖不是一個反應(yīng)過程，但卻也決定著實驗的成?。?］。ELISA就是通過洗滌來達到分離游離和結(jié)合的酶標記物的目的，通過洗滌以清除殘留在微孔板中未能與固相抗原或抗體相結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中的非特異性吸附于固相載體上的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附是普遍的，在ELISA測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附，洗滌時又應(yīng)將這些非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌掉。在ELISA操作中，洗滌是非

7、常關(guān)鍵的，應(yīng)引起操作者的高度重視。我們對753例用ELISA方法檢測乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的洗板過程進行了檢測，采用我們自創(chuàng)的人工洗板法和全自動洗板機洗板對比試驗，現(xiàn)將結(jié)果報告如下?！　?材料和方法　　1.1材料　　1.1.1標本來源及類型753例標本來源于廣東省深圳市龍崗區(qū)南嶺人民醫(yī)院2005年12月8日至2006年1月4日的工廠體檢血清標本，其中男性121例，女性653例，年齡17歲～43歲,平均年齡為30歲?！　?.1.2乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)由上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)?！　?.1

8、.3一個大的臉盆和一些棉質(zhì)毛巾?！　?.1.4消毒劑健之素(含有效氯500mg/片)。8　　1.1.5特建一個有開關(guān)口的洗滌池。　　1.1.6全自動洗板機美國MultiwashⅡ。　　1.2方法　　1.2.1手工法按試劑說明書嚴格操作，稀釋液用蒸餾水按1∶20稀釋濃縮洗液，適量置于臉盆之中。從37℃水浴溫箱中拿出溫浴