玉屏風(fēng)湯劑不同配伍對(duì)黃芪甲苷含量的影響

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1、玉屏風(fēng)湯劑不同配伍對(duì)黃芪甲苷含量的影響尹雪黃月純張素中魏剛【摘要】　　目的建立玉屏風(fēng)湯劑中黃芪甲苷的含量測(cè)定方法，探討不同配伍對(duì)玉屏風(fēng)湯劑中黃芪甲苷含量的影響。方法采用高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（HPLC-ELSD）法測(cè)定。采用Phenomen色譜柱；流動(dòng)相為乙腈-水（32∶68）；流速1ml/min；柱溫35℃；ELSD漂移溫度103℃，載氣（氮?dú)猓┝髁?.5L/min。結(jié)果黃芪單煎相比，不同配伍的合煎對(duì)黃芪甲苷的含量均呈現(xiàn)不同程度的下降趨勢(shì)。結(jié)論玉屏風(fēng)不同配伍湯劑中黃芪甲苷的含量在煎煮過(guò)程中存在動(dòng)態(tài)變化，為玉屏風(fēng)湯劑的配伍規(guī)律及物質(zhì)基礎(chǔ)的研

2、究提供了一定的參考?！娟P(guān)鍵詞】玉屏風(fēng)湯劑配伍黃芪甲苷高效液相色譜法　　玉屏風(fēng)源于元代《丹溪心法》，由黃芪、白術(shù)（炒）、防風(fēng)3味藥組成，功能益氣固表，止汗，用于表虛不固，自汗惡風(fēng)，面色白，或體虛易感風(fēng)邪者。黃芪主要含異黃酮、皂苷、氨基酸及多糖類(lèi)等有效成分；防風(fēng)主要含色原酮、揮發(fā)油、氨基酸及多糖類(lèi)等有效成分；白術(shù)主要含內(nèi)酯類(lèi)、揮發(fā)油及多糖類(lèi)等有效成分。對(duì)玉屏風(fēng)方中藥味的主要成分含量與指紋圖譜研究已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道〔1～4〕，但玉屏風(fēng)湯劑的化學(xué)成分研究報(bào)道較少。為探討玉屏風(fēng)湯劑的配伍規(guī)律及物質(zhì)基礎(chǔ)，本項(xiàng)目采用HPLC指紋圖譜與主成分含量測(cè)定相結(jié)合的方法進(jìn)行

3、研究。本文報(bào)道不同配伍對(duì)黃芪甲苷含量的影響?！　?儀器與試藥　　高效液相色譜儀（日本島津LC10A）；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）；黃芪甲苷對(duì)照品，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；3批黃芪、防風(fēng)、白術(shù)（炒）飲片，分別購(gòu)于廣東多家藥材公司，黃芪為豆科蒙古黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.varmongholicus(Bge.)Hsiao的根，防風(fēng)為傘形科植物防風(fēng)Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.的根，白術(shù)為傘形科植物白術(shù)AtractylodesmacrocephalaK

4、oidz.的根的麩炒品；乙腈為色譜純，其他試劑為分析純?！　?方法與結(jié)果　　2.1色譜條件〔5，6]色譜柱為Phenomen（250nm×4.6nm，5μm）；流動(dòng)相為乙腈-水（32∶68）；流速1ml/min；柱溫35℃；ELSD漂移溫度103℃，載氣（氮?dú)猓┝髁?.5L/min。結(jié)果表明在此條件下此成分能達(dá)到較好的分離效果，理論板數(shù)以黃芪甲苷峰計(jì)算不低于4000，缺黃芪陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖1～3?！　D1黃芪甲苷對(duì)照品HPLC圖（略）　　圖2玉屏風(fēng)湯劑HPLC圖（略）　　圖3缺黃芪甲陰性對(duì)照HPLC圖（略）　　2.2對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲

5、苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，用甲醇溶解配制成每毫升含0.5mg的對(duì)照品溶液。　　2.3不同配伍湯劑的制備按《中國(guó)藥典》的處方配比〔黃芪18g，防風(fēng)6g，白術(shù)（炒）6g〕，取黃芪飲片45g，防風(fēng)飲片15g，白術(shù)（炒）飲片15g，加水500ml，浸泡30min，加熱煮沸后文火慢煎40min，取出，趁熱用四層紗布濾過(guò)，藥渣再加水300ml加熱煮沸后文火慢煎30min，取出，趁熱濾過(guò)，合并2次煎液，放冷，置500ml量瓶中，加水至刻度，得全方湯劑。分別取黃芪、黃芪加白術(shù)、黃芪加防風(fēng)等不同配伍藥材飲片，同法制得各配伍湯劑?！　?.4供試品溶液的制備〔5〕精密吸取

6、各配伍湯液50ml，分別用水飽和正丁醇提取5次，30ml/次，合并正丁醇液；用氨試液洗滌3次，20ml/次，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，并定容?ml，即得不同配伍湯劑供試品溶液?！　?.5線性關(guān)系考察取黃芪甲苷對(duì)照品，精密稱(chēng)定，用甲醇溶解并配制成每毫升含1.01mg的對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液1，2，5，10，20μl，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以進(jìn)樣量（μg）的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，以峰面積（A）的對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)，求得線性回歸方程為Y=5.0006+1.5641X，線性范圍為1.01～20.2μg，r=0.9999?！　?.6精密度實(shí)驗(yàn)精

7、密吸取同一對(duì)照品溶液10μl，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積，結(jié)果黃芪甲苷峰面積的RSD為1.85%，表示儀器精密度良好?！　?.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密吸取同一玉屏風(fēng)湯劑供試品溶液各20μl，分別在0，2，4，8，16，24h進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，結(jié)果黃芪甲苷峰面積的RSD為0.94%，表明在24h內(nèi)較穩(wěn)定?！　?.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批玉屏風(fēng)飲片5份，按湯劑的制備及其供試品溶液的制備方法制備并測(cè)定，結(jié)果玉屏風(fēng)湯劑中黃芪甲苷含量的RSD為8.52%，表明湯劑煎煮的重復(fù)性好。　　2.9加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密量取5份已知含量的玉屏風(fēng)湯劑25ml，精密加入一定量

8、的黃芪甲苷對(duì)照品溶液，按湯劑供試品溶液的制備及樣品的測(cè)定同法操作。結(jié)果見(jiàn)表1?！　”?玉屏風(fēng)湯劑回收率測(cè)定結(jié)果（略）　　2