超聲波提取連翹葉總黃酮與總酚酸的實驗研究

超聲波提取連翹葉總黃酮與總酚酸的實驗研究

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1、超聲波提取連翹葉總黃酮與總酚酸的實驗研究作者:田粟唐龍妹許麗琴丁月新劉汝俊馬莉薛鵬【摘要】  目的確定實驗室超聲波提取連翹葉總黃酮、總酚酸的最佳處理條件。方法采用正交設計法對甲醇濃度(A)、超聲時間(B)、提取次數(shù)(C)和提取溫度(D)4個因素進行考察,確定最優(yōu)超聲提取條件。結(jié)果因素D和C對測定指標均有顯著性影響,因素A、B為不顯著因素。結(jié)論以60%甲醇,超聲時間10min/次,提取3次,提取溫度45℃為最佳超聲提取條件?!娟P(guān)鍵詞】連翹葉;總黃酮;總酚酸;正交實驗;超聲提取  Abstract:ObjectiveToascertaintheoptimalultrasonicconditio

2、nforextractionoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidsfromForsythiasuspenseleavesbyorthogonaldesign.MethodsInthemethodoforthogonaltest,methanolconcentration(60%,70%,and80%),ultrasonictime(10min,15minand20min),extractiontimes(1,2,and3)andextractiontemperature(5℃,25℃,and45℃)peratureandextractiontimesh

3、adsignificanteffectonEithertotalflavonoidsandtotalphenolicacidscontents,methanolconcentrationandultrasonictimeethanolandthreetimes(10mineachtime)at45℃alconditionforextractionoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidsfromForsythiasuspenseleaves.  Keyg,置10ml量瓶中,加甲醇溶解定容,搖勻,得濃度為2mg/ml的蘆丁標準溶液。精確移取蘆丁的標準品溶液0

4、.05,0.10,0.15,0.20,0.25,0.30ml分別置于10ml量瓶中,用甲醇補足1ml。加入蒸餾水4ml,混合放置5min后,加5%亞硝酸鈉溶液0.3ml和10%氯化鋁溶液0.3ml,搖勻,放置6min,加1mol/L氫氧化鈉溶液2ml后,用水定容至10ml,充分混合。510nm處測定吸光度,以吸光度A(Y)與濃度C(X)進行直線回歸,得回歸方程為Y=1.0963X+0.0677,r=0.9999。在0.01~0.06mg/ml線性關(guān)系良好?! ?.1.2樣品溶液測定精密取適當量的以下所得各樣品原液置于10ml量瓶中,用甲醇補足1ml,搖勻,作為供試品溶液。按標準曲線制備項下

5、操作,測定總黃酮含量?! ?.2總酚酸含量測定方法  2.2.1標準曲線的制備精密稱取沒食子酸對照品18.8mg,置100ml量瓶中,加甲醇溶解定容,搖勻,得濃度為1mmol/L的沒食子酸標準溶液。精確移取沒食子酸的標準品溶液0.015,0.030,0.045,0.060,0.075,0.090ml分別置于3ml離心管中,用甲醇補足0.5ml。加入Folin-Ciocalteu試劑1ml,混合放置3min,加7.5%碳酸鈉溶液1ml,搖勻,放置90min,10000r/min離心10min,750nm處測定吸光度,以吸光度A(Y)與濃度C(X)進行直線回歸,得回歸方程為Y=16.229X+

6、0.07,r=0.9999。在1.1×103~6.8×103mg/ml內(nèi)線性關(guān)系良好?! ?.2.2樣品溶液測定精密取適當量的以下各樣品原液置于3ml離心管中,用甲醇補足0.5ml,搖勻,作為供試品溶液。按標準曲線制備項下操作,測定總酚酸含量?! ?.3提取溶液的選擇精密稱取連翹葉粉末0.50g,18份,置于50ml離心管中,分別加入5ml石油醚進行脫色脫脂處理,3000r/min離心,棄去醚液,重復進行兩次后,將濾渣中的石油醚揮發(fā)干燥。分別加10ml沸水、甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯、正己烷分3次超聲提取,20min/次,3000r/min離心,收集上清液減壓濃縮至干。殘渣用適量甲醇溶解,

7、轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,作為樣品原液置于-18℃冰箱保存。稀釋至適當濃度后,用于測定總黃酮、總酚酸含量。結(jié)果見表1?! ”?不同提取溶劑提取總黃酮、總酚酸含量的測定結(jié)果(略)  從不同提取溶劑提取總黃酮、總酚酸含量的測定結(jié)果來看,甲醇提取物的總黃酮、總酚酸含量最高,說明甲醇提取連翹葉多酚成分的效果最好,故本研究選擇甲醇作為提取溶劑?! ?.4超聲提取條件的確定  2.4.1正交實驗設計選用L9(34)正

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