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1、人參畏五靈脂的化學物質基礎研究論文張嘯環(huán)，張語遲，王淑敏【摘要】目的利用現(xiàn)代儀器分析手段闡釋中藥配伍理論中“人參畏五靈脂”的化學物質基礎。方法通過高效液相色譜法檢測人參與不同劑量五靈脂配伍后水煎液的人參皂苷含量，配合紫外分光光度法檢測藥渣中人參總皂苷的殘留量，找出二味藥配伍后在化學成分上的變化規(guī)律及其原因。結果人參中加入五靈脂水提取液中人參皂苷的含量降低，并且隨著五靈脂配伍劑量的增加人參皂苷逐漸減少。相反，人參與五靈脂水提后的殘渣中人參皂苷含量隨著五靈脂加入量的增加逐漸增多。結論“人參畏五靈脂”有一定科學道理，五靈脂可以抑
2、制人參皂苷在水溶液中的溶出.freelp：92℃；Gasfloin；Gain：1；Impactor：off.Agilent1100Series自動進樣器；日本資生堂Shiseido-CAPCELL,C18-ODS(4.6mm×250mm，5μm)。流動相A為甲醇，流動相B為0.2%醋酸水溶液。時間程序為0～50min：25％～50％A，75%～50%B。進樣量10μl。甲醇為色譜純試劑（美國Fisher公司）,水位超純水(18.2ΩPa),0.45μm微孔濾膜(安捷倫公司)。Varian紫外可見分光光度計；KQ2500E型
3、醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；甲醇,冰醋酸,香草醛試劑為分析純（北京化工廠）；人參藥材購自吉林撫松，五靈脂購自吉林大藥房，人參皂苷標準品Re購于中國藥品生物制品檢定所。2方法與結果2.1樣品的制備2.1.1人參單煎對照液的制備取人參藥材粉末3g，精密稱定，加100ml水浸漬45min，加熱回流提取2次，2h/次，合并兩次提取液，離心10min，取上清液濃縮至20ml，加95%乙醇使溶液中乙醇含量達到75%，靜置過夜，濾過，濾液濃縮至干，甲醇定容至10ml量瓶中，備用。2.1.2人參與五靈脂共煎液的制備［1
4、］精密稱取五靈脂1，2，3，4.5，6g，分別加入3g人參粉末，加150ml水中浸漬45min，加熱回流提取2次,2h/次，合并兩次提取液，離心10min，合并上清液，濃縮至20ml，加95%乙醇使溶液中乙醇含量達到75%，靜置過夜，濾過,濾液濃縮至干，甲醇定容至10ml量瓶中，備用。2.1.3樣品殘渣溶液的制備將人參與五靈脂不同劑量配伍煎煮水提液殘渣分別用50ml甲醇超聲波提取1h，濾過，濾液濃縮至干，用甲醇定容至10ml量瓶中，備用。2.2不同劑量五靈脂對人參化學成分影響的研究［2，3］將人參單煎液與不同劑量五靈脂配伍
5、提取溶液分別注入高效液相色譜儀，按實驗條件測得各色譜圖見圖1～2。由圖1和圖2可以看出，人參中的皂苷類化合物得到了很好的分離，并且在梯度洗脫條件下基線平穩(wěn)。通過高效液相色譜與電噴霧質譜聯(lián)用技術可知圖中1～11號色譜峰分別為人參皂苷Re，Rg1，Rb1，Rg2，M-Rb1，Rc，M-Rd，Rb2，Rb3，Rd，Ro（另文發(fā)表）?？梢悦黠@看出，隨著配伍五靈脂劑量的增加，人參皂苷色譜峰面積依次減少，在人參與五靈脂配伍比例為2∶6的情況下只能看到Re+Rg1，Rb1，Rc，Rb2，Rd，Ro人參中最為常見的單體皂苷。對以上7種人參
6、皂苷進行峰面積積分結果見表1和圖3。2.3樣品殘渣溶液中人參總皂苷的測定［4］2.3.1標準曲線的制備精密稱取人參皂苷Re標準品10.01mg，用甲醇定容于10ml量瓶中，制成每毫升含1.001mg的對照品溶液。分別精密移取對照品溶液30，60，90，120，150μl分別加入干燥具塞的試管中，水浴揮干溶劑，各加入新配制的香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，于60℃恒溫水浴加熱15min，取出，流水冷卻2min，加冰醋酸5ml，搖勻，隨行試劑作空白。于550nm處測定吸光度，得出標準曲線為：Y=0.11693X
7、-0.03604，r=0.9998，樣品在0.01～0.30mg范圍內線性關系良好。表17種人參皂苷峰面積積分結果（略）2.3.2樣品含量測定取供試品20μl，水浴揮干，加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，60℃水浴15min，取出后流水冷卻2min，加冰醋酸5ml，搖勻，于550nm處測定吸光度，計算含量。取3次平均值。2.3.3測量結果人參∶五靈脂為3∶1，3∶2，3∶3，3∶4.5，3∶6的人參總皂苷含量分別為12，21，36，42，60mg，分別占3g人參粉末含量的0.4%，0.7%，1.2%，
8、1.4%，2.0%。3小結與討論實驗結果表明，人參中加入五靈脂水提取液中人參皂苷的含降低，并且隨著五靈脂配伍劑量的增加人參皂苷逐漸減少。相反，人參與五靈脂水提后的殘渣中人參皂苷含量隨著五靈脂加入量的增加逐漸增多，說明五靈脂可以抑制人參皂苷在水溶液中的溶出，推測可能是五靈脂中某種成分與人參皂苷在水溶液中發(fā)
