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《人參畏五靈脂的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、人參畏五靈脂的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究論文張嘯環(huán),張語遲,王淑敏【摘要】目的利用現(xiàn)代儀器分析手段闡釋中藥配伍理論中“人參畏五靈脂”的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。方法通過高效液相色譜法檢測(cè)人參與不同劑量五靈脂配伍后水煎液的人參皂苷含量,配合紫外分光光度法檢測(cè)藥渣中人參總皂苷的殘留量,找出二味藥配伍后在化學(xué)成分上的變化規(guī)律及其原因。結(jié)果人參中加入五靈脂水提取液中人參皂苷的含量降低,并且隨著五靈脂配伍劑量的增加人參皂苷逐漸減少。相反,人參與五靈脂水提后的殘?jiān)腥藚⒃碥蘸侩S著五靈脂加入量的增加逐漸增多。結(jié)論“人參畏五靈脂”有一定科學(xué)道理,五靈脂可以抑
2、制人參皂苷在水溶液中的溶出.freelp:92℃;Gasfloin;Gain:1;Impactor:off.Agilent1100Series自動(dòng)進(jìn)樣器;日本資生堂Shiseido-CAPCELL,C18-ODS(4.6mm×250mm,5μm)。流動(dòng)相A為甲醇,流動(dòng)相B為0.2%醋酸水溶液。時(shí)間程序?yàn)?~50min:25%~50%A,75%~50%B。進(jìn)樣量10μl。甲醇為色譜純?cè)噭绹鳩isher公司),水位超純水(18.2ΩPa),0.45μm微孔濾膜(安捷倫公司)。Varian紫外可見分光光度計(jì);KQ2500E型
3、醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);甲醇,冰醋酸,香草醛試劑為分析純(北京化工廠);人參藥材購自吉林撫松,五靈脂購自吉林大藥房,人參皂苷標(biāo)準(zhǔn)品Re購于中國藥品生物制品檢定所。2方法與結(jié)果2.1樣品的制備2.1.1人參單煎對(duì)照液的制備取人參藥材粉末3g,精密稱定,加100ml水浸漬45min,加熱回流提取2次,2h/次,合并兩次提取液,離心10min,取上清液濃縮至20ml,加95%乙醇使溶液中乙醇含量達(dá)到75%,靜置過夜,濾過,濾液濃縮至干,甲醇定容至10ml量瓶中,備用。2.1.2人參與五靈脂共煎液的制備[1
4、]精密稱取五靈脂1,2,3,4.5,6g,分別加入3g人參粉末,加150ml水中浸漬45min,加熱回流提取2次,2h/次,合并兩次提取液,離心10min,合并上清液,濃縮至20ml,加95%乙醇使溶液中乙醇含量達(dá)到75%,靜置過夜,濾過,濾液濃縮至干,甲醇定容至10ml量瓶中,備用。2.1.3樣品殘?jiān)芤旱闹苽鋵⑷藚⑴c五靈脂不同劑量配伍煎煮水提液殘?jiān)謩e用50ml甲醇超聲波提取1h,濾過,濾液濃縮至干,用甲醇定容至10ml量瓶中,備用。2.2不同劑量五靈脂對(duì)人參化學(xué)成分影響的研究[2,3]將人參單煎液與不同劑量五靈脂配伍
5、提取溶液分別注入高效液相色譜儀,按實(shí)驗(yàn)條件測(cè)得各色譜圖見圖1~2。由圖1和圖2可以看出,人參中的皂苷類化合物得到了很好的分離,并且在梯度洗脫條件下基線平穩(wěn)。通過高效液相色譜與電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)可知圖中1~11號(hào)色譜峰分別為人參皂苷Re,Rg1,Rb1,Rg2,M-Rb1,Rc,M-Rd,Rb2,Rb3,Rd,Ro(另文發(fā)表)。可以明顯看出,隨著配伍五靈脂劑量的增加,人參皂苷色譜峰面積依次減少,在人參與五靈脂配伍比例為2∶6的情況下只能看到Re+Rg1,Rb1,Rc,Rb2,Rd,Ro人參中最為常見的單體皂苷。對(duì)以上7種人參
6、皂苷進(jìn)行峰面積積分結(jié)果見表1和圖3。2.3樣品殘?jiān)芤褐腥藚⒖傇碥盏臏y(cè)定[4]2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品10.01mg,用甲醇定容于10ml量瓶中,制成每毫升含1.001mg的對(duì)照品溶液。分別精密移取對(duì)照品溶液30,60,90,120,150μl分別加入干燥具塞的試管中,水浴揮干溶劑,各加入新配制的香草醛-冰醋酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml,于60℃恒溫水浴加熱15min,取出,流水冷卻2min,加冰醋酸5ml,搖勻,隨行試劑作空白。于550nm處測(cè)定吸光度,得出標(biāo)準(zhǔn)曲線為:Y=0.11693X
7、-0.03604,r=0.9998,樣品在0.01~0.30mg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。表17種人參皂苷峰面積積分結(jié)果(略)2.3.2樣品含量測(cè)定取供試品20μl,水浴揮干,加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml,60℃水浴15min,取出后流水冷卻2min,加冰醋酸5ml,搖勻,于550nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算含量。取3次平均值。2.3.3測(cè)量結(jié)果人參∶五靈脂為3∶1,3∶2,3∶3,3∶4.5,3∶6的人參總皂苷含量分別為12,21,36,42,60mg,分別占3g人參粉末含量的0.4%,0.7%,1.2%,
8、1.4%,2.0%。3小結(jié)與討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,人參中加入五靈脂水提取液中人參皂苷的含降低,并且隨著五靈脂配伍劑量的增加人參皂苷逐漸減少。相反,人參與五靈脂水提后的殘?jiān)腥藚⒃碥蘸侩S著五靈脂加入量的增加逐漸增多,說明五靈脂可以抑制人參皂苷在水溶液中的溶出,推測(cè)可能是五靈脂中某種成分與人參皂苷在水溶液中發(fā)