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《熒光素酶報告基因檢測結(jié)果》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、為了適應公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務技能及個人素質(zhì)的培訓計劃熒光素酶報告基因檢測結(jié)果 雙熒光素酶報告基因分析 1.介紹熒光素酶報告基因表達的轉(zhuǎn)錄調(diào)控常被用來研究培養(yǎng)細胞的生物學特性。熒光素酶是理想的報告基因,因為哺乳動物細胞中不含內(nèi)源性熒光素酶,一旦轉(zhuǎn)錄完成立刻就生成功能性的熒光素酶。 Dual-Luciferase?雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)中含有在同一細胞中同時表達的兩種熒光素酶。通常,報告基因?qū)嶒炛型鶗艿礁鞣N實驗條件的影響,共轉(zhuǎn)
2、染的“對照”報告基因會作為內(nèi)對照,為試驗提供一基準線。實驗報告基因經(jīng)過內(nèi)參照的處理可以減小細胞活性和轉(zhuǎn)染效率對實驗的影響,因此雙報告系統(tǒng)減少了外部干擾,使得實驗數(shù)據(jù)更可信。實驗中報告基因和對照基因的酶沒有種源同源性,螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶對應不同的反應底物,反應中沒有任何的交叉干擾?! ∥灮鹣x熒光素酶底物和海腎熒光素酶底物分別與檢測試劑反應可以使靈敏度最大化。由于超強的光信號和超高的信噪比,本系統(tǒng)被廣泛用于制藥和生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)中。雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)適配于各種培養(yǎng)哺乳細胞的培養(yǎng)基,如1
3、640,MEM,DMEM,F(xiàn)12等。這些試劑與被動裂解液所附帶的試劑盒,可以從Promega試劑盒中分開,單獨使用。目的-通過該培訓員工可對保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務技能及個人素質(zhì)的培訓計劃熒光素酶報告基因檢測結(jié)果 雙熒光素酶報告基因分析 1.介紹熒光素酶報告基因表達的轉(zhuǎn)錄調(diào)控常被用來研究培養(yǎng)細胞的生物學特性。熒光素酶是理想的報告
4、基因,因為哺乳動物細胞中不含內(nèi)源性熒光素酶,一旦轉(zhuǎn)錄完成立刻就生成功能性的熒光素酶?! ual-Luciferase?雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)中含有在同一細胞中同時表達的兩種熒光素酶。通常,報告基因?qū)嶒炛型鶗艿礁鞣N實驗條件的影響,共轉(zhuǎn)染的“對照”報告基因會作為內(nèi)對照,為試驗提供一基準線。實驗報告基因經(jīng)過內(nèi)參照的處理可以減小細胞活性和轉(zhuǎn)染效率對實驗的影響,因此雙報告系統(tǒng)減少了外部干擾,使得實驗數(shù)據(jù)更可信。實驗中報告基因和對照基因的酶沒有種源同源性,螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶對應不同的反應
5、底物,反應中沒有任何的交叉干擾?! ∥灮鹣x熒光素酶底物和海腎熒光素酶底物分別與檢測試劑反應可以使靈敏度最大化。由于超強的光信號和超高的信噪比,本系統(tǒng)被廣泛用于制藥和生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)中。雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)適配于各種培養(yǎng)哺乳細胞的培養(yǎng)基,如1640,MEM,DMEM,F(xiàn)12等。這些試劑與被動裂解液所附帶的試劑盒,可以從Promega試劑盒中分開,單獨使用。目的-通過該培訓員工可對保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應公司新戰(zhàn)
6、略的發(fā)展,保障停車場安保新項目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務技能及個人素質(zhì)的培訓計劃 具有超高靈敏度和超寬線性范圍的Veritas?微孔板發(fā)光檢測儀特別適合DLR報告基因檢測系統(tǒng),Veritas?軟件中預裝了DLR的檢測程序使得安裝更為方便,內(nèi)置自動加樣器使得應用更為簡單?! eritas?微孔板發(fā)光檢測儀使用熒光素酶檢測試劑II(LARII)最低可以檢測到1X10-19mol熒光素酶分子,使用Stop&Glo?試劑可以檢測到1X10-18mol海腎熒光素酶分子,檢測線性范圍分別
7、為8和6個數(shù)量級。所有的檢測均采用純化的重組螢火蟲熒光素酶(E1701)和純化的重組海腎熒光素酶?! D1-3使用Promega公司Dual-Luciferase?雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng),螢火蟲熒光素酶(1x10-19到1x10-11mol)和海腎熒光素酶(1x10-14mol)在Modulus?儀上測量結(jié)果?! ?.所需器材 ?Veritas?微孔板發(fā)光檢測儀 (P/N9100-002) ?96孔白板(E&KScientificEK-25075) ?Dual-LuciferaseR
8、eporter?熒光素酶檢測系統(tǒng)(E1980) ?P200移液器和槍頭 3.實驗方案 試劑制備目的-通過該培訓員工可對保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務技能及個人素質(zhì)的培訓計劃 熒光素酶檢測緩沖液II和熒光素酶檢測底物:使用所提供產(chǎn)品,-20℃儲存,可以穩(wěn)定保存6個月,熒光素酶檢測底物可以4℃保存1個月。將熒光素酶檢測緩沖液II加入熒