資源描述：
《人外周血間充質(zhì)干細胞向肝樣細胞誘導分化實驗的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、徐州醫(yī)學院碩士學位論文縮略詞表Abbreviation縮略詞英文全稱中文全稱AFPα-Fetoprotein甲胎蛋白ALBAlbumin白蛋白BSABovineserumalbumin牛血清白蛋白cDNAComplementaryDNA互補DNACFU-FColonyformingunit-fibroblast成纖維細胞集落形成單位CocktailHumanmesenchymalstemcell人間充質(zhì)干細胞富集試劑enrichmentcocktailDNADeoxyribonucleicacid脫氧核糖核酸dNTPDeoxynucleosidetriphosphate脫氧核苷三磷酸EDT
2、AEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸ESEmbryonicstemcells胚胎干細胞FACSFluorescence-activatedcellsorter流式細胞儀FBSFetalbovineserum胎牛血清FGF-4Fibroblastgrowthfactor-4成纖維細胞生長因子-4FITCFluoresceinisothiocyanate異硫氰酸熒光素G-CSFGranulocyte-colonystimulatingfactor粒細胞集落刺激因子HGFHepatocytegrowthfactor肝細胞生長因子HMHepatocytemed
3、ium肝細胞培養(yǎng)基IGF-IInsulin-likegrowthfactor-I胰島素樣生長因子ITSInsulintransferrinselenium胰島素鐵硒傳遞蛋白L-GluL-GlutamineL-谷氨酰胺1徐州醫(yī)學院碩士學位論文MNCsMonocyticcells單個核細胞MSCsMesenchymalstemcells間充質(zhì)干細胞ODOpiticaldensity吸光度OSMOncostatinM抑瘤素MPBSPhosphatebufferedsolution磷酸鹽緩沖液PMSFPhenylmethanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟RBITCRhodamine
4、Bisothiocyanate羅丹明RT-PCRReal-timepolymerasechainreaction實時定量聚合酶鏈反應2徐州醫(yī)學院碩士學位論文論文獨創(chuàng)性聲明本論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加以標注和致謝的地方外，不包含其他人或機構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究的啟發(fā)和所做的貢獻均已在論文中作了明確的聲明并表示了謝意。作者簽名：日期：200年月日論文使用授權聲明本人完全了解徐州醫(yī)學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留送交論文的復印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱；學校可以公布論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、
5、縮印或其它復制手段保存論文。保密的論文在解密后遵守此規(guī)定。作者簽名：導師簽名：日期：200年月日徐州醫(yī)學院碩士學位論文論文審閱認定書研究生在規(guī)定的學習年限內(nèi)，按照研究生培養(yǎng)方案的要求，完成了研究生課程的學習，成績合格；在我的指導下完成本學位論文，經(jīng)審閱，論文中的觀點、數(shù)據(jù)、表述和結(jié)構(gòu)為我所認同，論文撰寫格式符合學校的相關規(guī)定，同意將本論文作為學位申請論文送專家評審。導師簽名：日期：200年月日徐州醫(yī)學院碩士學位論文人外周血間充質(zhì)干細胞向肝樣細胞誘導分化的實驗研究中文摘要目的探討人外周血來源的間充質(zhì)干細胞（MSCs）的體外分離擴增、培養(yǎng)生長以及誘導分化成有功能的肝樣細胞的可行性。方法抽取經(jīng)粒
6、細胞集落刺激因子（G-CSF）充分動員及未經(jīng)動員的成人外周?血15-55ml，應用密度梯度離心法及使用特殊的RosetteSepHumanMesenchymalStemCellEnrichmentCocktail試劑，分離外周血中的MSCs，貼壁純化擴增。實驗中發(fā)現(xiàn)G-CSF動員過的外周血中造血系來源細胞過多，最終選用將未動員外周血中得到的MSCs進行表型鑒定，并在HGF、FGF-4和OSM誘導下分化成為肝樣細胞。使用免疫熒光染色、Westernblot、RT-PCR、電鏡等方法檢測分析肝樣細胞的功能和誘導分化能力。結(jié)果在經(jīng)G-CSF充分動員的外周血中可以密度梯度離心法分離獲得MSCs，6
7、數(shù)目約為3310，但造血系細胞過多，影響培養(yǎng)結(jié)果。在未經(jīng)動員的成人靜脈血?中，應用RosetteSepHumanMesenchymalStemCellEnrichmentCocktail分離可以6獲得MSCs，數(shù)目約為0.7-0.9310，并通過流式細胞儀檢測細胞表面抗原進一步證實。所得細胞經(jīng)過貼壁純化擴增和誘導分化，利用光鏡觀察細胞形態(tài)、免疫熒光標記檢測細胞對于ALB及AFP的表達、Westernblot檢測蛋白水平上
