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《超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定原料乳和奶粉中三聚氰胺的含量》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、礴河南畜牧獸醫(yī)綜合版2009年(第30卷)第4期超高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定原料乳和奶粉中三聚氰胺的含量方忠意，劉素梅，宋志超，譚旭信，陳薔，杜紅鴿，朱紅繼(河南省畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，河南鄭州450008)摘要：該試驗(yàn)建立了使用超高效液相色譜一串聯(lián)四極桿質(zhì)譜測(cè)定原料乳和奶粉中三聚氰胺含量的檢測(cè)方法用三氯乙酸溶液和乙酸鉛提?。崛∫航?jīng)MCX固相萃取柱凈化后用UPLC—MS—MS進(jìn)行檢測(cè)。色譜條件：CAPCELLPAKCR1：4柱(2．0mmX100mmi．d．，5m)，流動(dòng)相：乙腈一0．01mol／L乙酸銨溶液，梯度洗脫流速O．3m
2、l／min采用正離子模式的電噴霧質(zhì)譜檢測(cè)．以一級(jí)質(zhì)譜得到的準(zhǔn)分子離子m／z126．8作為母離子，進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離(CID)二級(jí)質(zhì)譜(MS2)分析，選擇母離子和MS2的碎片離子m／z84．9、67．8定性確證，提取m／z84．9離子質(zhì)量色譜峰面積定量?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)線性范圍為O．01~1．00~g／rnl，檢出限10Ixg／kg(S／N=10)，原料乳回收率為82．4％~97．8％．奶粉回收率為80．7％~95．7％。關(guān)鍵詞：三聚氰胺；LC—MS—MS；原料乳；奶粉中圖分類號(hào)：$851．34+7．5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1004—5090(2
3、009)04—0007—03三聚氰胺(melamine)簡(jiǎn)稱三胺，學(xué)名三氨三嗪，別名蜜1．2．2質(zhì)譜條件離子源ESI(+)；毛細(xì)管電壓3．0kV；錐胺、氰尿酰胺、三聚酰胺，是一種重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原孔電壓30V：離子源溫度110℃；脫溶劑氣溫度400~C；脫料
4、l_使用常用的粗蛋白測(cè)定方法“凱氏定氮法”只能測(cè)出溶劑氣流量600L／h：錐孔反吹氣流量50I／h第一重四極樣品的含氮量．不能鑒定是有機(jī)氮還是無(wú)機(jī)氮。由于三聚氰桿和第二重四極桿的低端分辨率及高端分辨率均為15V：胺無(wú)色無(wú)味，含氮比例為66％，易于生產(chǎn)和購(gòu)買，成本低，添錐孔電壓和
5、碰撞能量見表2檢測(cè)方式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)加了三聚氰胺的食品用“凱氏定氮法”可測(cè)出較高的蛋白含(MRM)掃描模式，其參數(shù)見表2。量．從感官上無(wú)法鑒別．因而常被不法分子添加進(jìn)食品和動(dòng)表2多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式的參數(shù)物飼料中冒充蛋白質(zhì)大量試驗(yàn)研究表明．哺乳動(dòng)物長(zhǎng)期攝Parention(m／z)Dauterionm／z)Conevoltage(eV)Collisionenergy(eV)人大量的三聚氰胺會(huì)造成腎臟損傷[2,33．2007年3月發(fā)生于美國(guó)的寵物中毒死亡事件FDA調(diào)查結(jié)果認(rèn)定是中國(guó)輸入的小麥蛋白粉和大米濃縮物里含有三聚氰胺．2008年9月1．
6、3溶液的配制份國(guó)內(nèi)三鹿奶粉事件的罪魁禍?zhǔn)滓彩侨矍璋贰?．3．1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取三聚氰胺對(duì)照品50mg1材料與方法于50ml容量瓶中。加20％(V／V)甲醇溶液超聲溶解，放冷1．1儀器與試劑至室溫后定容．配制成含三聚氰胺1mg／ml的標(biāo)準(zhǔn)貯備WatersACQUITYUPLC超高效液相色譜儀：Waters液．4℃保存。MieromassQuattroPremierXE三重四極桿質(zhì)譜儀：配電噴霧l_3．2提取液的配制取480ml10L三氯乙酸溶液，加離子源(ESI)；Waters固相萃取裝置；梅特勒320型酸度計(jì)。入20ml22g／
7、L乙酸鉛溶液，混勻，臨用前配制。WatersOasisMCX固相萃取小柱(3ml，60mg)：三聚1．4樣品的提取氰胺對(duì)照品：乙腈、甲酸為色譜純，其余試劑均為分析純．1．4．1原料乳的提取方法準(zhǔn)確量取2ml原料乳于50ml實(shí)驗(yàn)室用一級(jí)水由Millipore—Q超純水系統(tǒng)制備。圓底離心管中，準(zhǔn)確加入18m1提取液，渦動(dòng)30s，超聲201．2儀器條件min，15000r／min離心10min，準(zhǔn)確移取10ml上清液備用。1．2．1液相色譜條件流動(dòng)相：溶劑A為乙腈．溶劑B為如果上層溶液渾濁．可用快速濾紙過(guò)濾．取10ml濾液備O．01mol／L
8、乙酸銨溶液(pH值=4．4)，梯度洗脫，洗脫程序用。見表1。柱溫3OqC，進(jìn)樣量l0。1．4．2奶粉的提取方法準(zhǔn)確稱取2g奶粉于50ml圓底表1梯度洗脫程序離心管中，準(zhǔn)確加入20ml提取液．渦動(dòng)30S。超聲20min，15000dmin離心10min．準(zhǔn)確移取10ml上清液備用．如果上層溶液渾濁，可用快速濾紙過(guò)濾，取1Oml濾液備用1．5凈化分別用3Tl1l甲醇、3ml水活化混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱，將1．4．1或1．4．2所得10ml提取液過(guò)柱．控制過(guò)·7·2009年(第30卷)第4期綜合版河南畜牧獸醫(yī)柱速度在1mUmin以內(nèi)。再分
9、別用3ml水和3ml甲醇洗需要選擇合適的色譜柱。該試驗(yàn)在研究過(guò)程中．考察了滌混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱．抽干后用3ml5％氨化Waters公司的ACQUITYUPLCTMBEHHILIC柱f2．1ram~甲
