AFLP分子標記技術(shù)的發(fā)展及其在蜜蜂學(xué)研究中的應(yīng)用

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1、昆蟲知識ChineseBulletinofEntomology-313·AFLP分子標記技術(shù)的發(fā)展及其在蜜蜂學(xué)研究中的應(yīng)用李志勇趙惠燕葛鳳晨薛運波(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)植保學(xué)院陜西楊凌712100;2.吉林省養(yǎng)蜂科學(xué)研究所吉林132108)Developmentofamplifiedfragmentlengthpolymorphismanditsapplicationsinhoneybeeresearch.LIZhi—Yong,ZHAOHui—Yan,GEFeng—Chen,XUEYun.Bo2(1.CollegeofPlantProtection,North

2、westAgrieutureForestryUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China;2.1nstiduteofApicuhureofJilinProvince,Jilin132108,China)AbstractAmplifiedfragmentlengthpolymorphism(AFLP)isamolecularfingerprintingtechniquebasedonPCRandRFLP.Ithasbeenusedextensivelyinmanyfields,suchasgeneticdiversity,phy

3、logeneticevolutionandtaxonomy,locationoftargetgenes,constructionofgeneticmapping,marker-assistedbreeding,qualityjudgmentandSOon.Thisreviewsummarizestheprinciples,characteristicsanddevelopmentofAFIJP,andits印plicationsinhoneybeeresearch.Keywordsmoleculargeneticmarker,AFLP.honeybee摘要AF

4、LP分子標記技術(shù)是一種建立在PCR技術(shù)和RFLP技術(shù)基礎(chǔ)之上的新的DNA指紋分析技術(shù),現(xiàn)已廣泛用于生物遺傳多樣性、系統(tǒng)進化及分類、基因定位、遺傳圖譜構(gòu)建、標記輔助育種和品質(zhì)鑒定等方面的研究。文章對AFI

5、P分子標記技術(shù)的原理、特點、技術(shù)發(fā)展及其在蜜蜂Ap/sspp.學(xué)研究中的應(yīng)用進行詳細論述。關(guān)鍵詞分子遺傳標記,AFLP,蜜蜂擴增片段長度多態(tài)性(amplifiedfragment技術(shù)也在蜜蜂學(xué)研究中有了初步的應(yīng)用和發(fā)lengthpolymorphism,AFLP)是由荷蘭生物學(xué)家展,并得到蜜蜂學(xué)者們的普遍接受和認可。zabeau和Voc于1993年發(fā)明的一種D

6、NA指紋AFLP技術(shù)將在未來的蜜蜂學(xué)研究中彰顯其獨技術(shù),并因此而獲得了發(fā)明專利,受到了專利的特的技術(shù)優(yōu)勢。保護。但是,由于AFLP技術(shù)較其它分子標1AFLP分子標記技術(shù)概述記有著明顯的優(yōu)越性“,因此,世界上很多試1.1基本原理驗室都在努力探索AFLP技術(shù)在自己的研究工基因組DNA經(jīng)限制性內(nèi)切酶充分酶切后,作中的應(yīng)用,并迅速傳播開來。1995年,Zabeau將特定的人工雙鏈接頭連在這些片段的兩端,形和Vos不得不將其專利解密,并以論文的形式成帶接頭的特異片段,根據(jù)接頭序列和酶切位點正式發(fā)表出來J。AFLP標記技術(shù)的出現(xiàn),是設(shè)計引物,對特異性模板片段進行選擇性擴增

7、,DNA指紋技術(shù)的重大突破。該技術(shù)最初用于擴增產(chǎn)物經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,最后根據(jù)植物的遺傳育種、種質(zhì)資源鑒定等,現(xiàn)已被大量凝膠上DNA指紋的特點進行分析uj。(圖1)用于動植物和微生物遺傳多樣性分析、遺傳圖譜的構(gòu)建、醫(yī)療診斷、系統(tǒng)發(fā)育和分類等研究領(lǐng)域。隨著蜜蜂分子生物學(xué)研究的不斷深入和蜜*Email:drane598@yahoo.eom.elrl收稿日期:2008.03.30,修回日期:2008.05.05蜂基因組全序列的測定完成,AFLP分子標記·314·昆蟲知識ChineseBulletinofEntomology200946(2)5'GAATI'C一

8、rI_AA一3’染色技術(shù)。熒光擴增片段長度多態(tài)性3'CTTAAG—AA兀-5’EeoRI酶丌MseI酶酶切反應(yīng)(FAFLP)是用熒光染料代替放射性同位素來標TEeoRIAAT晝接頭u——一AAIMseI強頭記弓l物,用自動化測序儀進行片段的檢測,該方連接反應(yīng)法的出現(xiàn)是AFLP技術(shù)發(fā)展的一大進步。瓊脂1E;EeoRI+A幾MseI+C預(yù)擴增糖凝膠的EB染色法,主要用于SE.AFLPDNA——■■●A^TTCA—GTTA亡==::】·__2亓。+CcAAAT亡===擇性擴增的檢測,該法簡單實用。ad,■—一AATrCAAC—TrGTTA亡=1.3.3基于AFLP標

9、記的相關(guān)技術(shù)發(fā)展—■■●TTAAGTT

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