基因工程受體菌或細(xì)胞

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1、第二章基因工程的基本條件一、用于核酸操作的工具酶二、基因克隆載體三、目的基因的獲得四、基因工程受體菌或細(xì)胞四、基因工程受體菌或細(xì)胞受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件各種基因工程受體及其特性實驗室常用的基因工程受體受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件限制性缺陷型外切酶和內(nèi)切酶活性缺陷(recB-、recC-、hsdR-)；重組整合缺陷型用于基因擴(kuò)增或高效表達(dá)的受體細(xì)胞(recA-)；具有較高的轉(zhuǎn)化效率具有與載體選擇標(biāo)記互補的表型感染寄生缺陷型防止重組細(xì)菌擴(kuò)散污染，生物武器除外。各種基因工程受體及其特性遺傳背景清楚載體受體系統(tǒng)完備生長迅速培養(yǎng)簡單重組子穩(wěn)定產(chǎn)結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類

2、繁多的內(nèi)毒素大腸桿菌：優(yōu)點：缺點：外源DNA克隆和擴(kuò)增；原核基因高效表達(dá)；基因文庫構(gòu)建。用途：是基因工程主要原核受體菌。遺傳背景清楚蛋白質(zhì)分泌機(jī)制健全生長迅速培養(yǎng)簡單不產(chǎn)內(nèi)毒素遺傳欠穩(wěn)定載體受體系統(tǒng)欠完備枯草桿菌：優(yōu)點：缺點：用途：原核基因的克隆與表達(dá)；重組蛋白多肽的分泌。鏈霉菌：抗生素的主要生產(chǎn)者遺傳操作簡單不產(chǎn)內(nèi)毒素用途：抗生素生產(chǎn)菌株的改良。遺傳不穩(wěn)定生長相對緩慢優(yōu)點：缺點：酵母菌：具有真核生物的特征遺傳背景清楚生長迅速培養(yǎng)簡單外源基因表達(dá)系統(tǒng)完善遺傳穩(wěn)定內(nèi)源蛋白產(chǎn)物的種類多、含量高優(yōu)點：缺點：用途：外源DNA擴(kuò)增和克隆真核基因高效

3、表達(dá)基因文庫構(gòu)建真核基因表達(dá)調(diào)控研究是基因工程重要的真核受體菌。昆蟲細(xì)胞（家蠶）：具有真核生物的特征外源基因表達(dá)量高繁殖較快培養(yǎng)成本低遺傳穩(wěn)定用途：真核生物基因的高效表達(dá)。DNA重組操作系統(tǒng)欠完善優(yōu)點：缺點：哺乳動物細(xì)胞（中國倉鼠卵巢細(xì)胞CHO）：與人的親緣關(guān)系近分子重組表達(dá)系統(tǒng)健全具有合適的糖基化修飾系統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)條件苛刻生長緩慢優(yōu)點：缺點：用途：哺乳動物和人基因表達(dá)調(diào)控研究基因藥物生產(chǎn)是基因工程的主要哺乳動物受體。植物細(xì)胞（擬南芥、煙葉）：轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞易分化細(xì)胞培養(yǎng)簡單成本低廉具有光合作用遺傳操作繁瑣優(yōu)點：缺點：用途：高等植物基因表達(dá)

4、調(diào)控研究農(nóng)作物品質(zhì)改良實驗室常用的基因工程受體酵母菌：畢赤酵母、啤酒酵母哺乳動物細(xì)胞：CHOLE392、ED8654C600、DH5?、HB101、JM109大腸桿菌用于接受質(zhì)粒：用于接受?-DNA：