富硒靈芝液體深層培養(yǎng)及營養(yǎng)成分分析

富硒靈芝液體深層培養(yǎng)及營養(yǎng)成分分析

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1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文富硒靈芝液體深層培養(yǎng)及營養(yǎng)成分分析姓名:陳虎中請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):食品科學(xué)指導(dǎo)教師:張連富20080601摘要靈芝是我國珍貴的藥用真菌,硒是人體必需的微量元素。以靈芝菌絲體作為載體,利用活化硒礦水作為硒源,進(jìn)行生物富硒的研究在國內(nèi)外鮮有報(bào)道。因此,本研究對(duì)于探索新的生物富硒途徑、提供新的有機(jī)硒資源具有重要意義。本研究的主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及研究結(jié)論如下,首先,通過快速登髙法和響應(yīng)面分析法得出活化硒礦水為唯一硒源條件下靈芝深層培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基組成:葡萄糖2.13%.荻皮汁3.96%.KH2PO40.3%和MgSO4-7H2O0.09%o在優(yōu)化條件下,得到的菌絲體生物量

2、在18g?L“左右,菌絲體中總硒含量在】50昭?『以上,富硒率達(dá)到55%。其次,通過正交試驗(yàn)優(yōu)化了活化天然硒礦粉制備含硒水溶液的工藝條件:邊攪拌邊將300g硒礦粉添加到600mL0.6mol?L“氨水中氨解72h,然后加熱至近干并重新補(bǔ)充氨水氨解兩次,再用pH8.0的磷酸緩沖液進(jìn)行磷酸化處理后,超聲波提取0.5h;在優(yōu)化條件下硒礦水中硒濃度可以達(dá)到50Ag?mLX混合硒源(活化硒礦水+亞硒酸鈉)試驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)培養(yǎng)基中添加15yg?ml/的硒(5ng?mL"來自于硒礦水、10pg?ml/來自亞硒酸鈉)時(shí),菌絲體生物量穩(wěn)定在18g-L'1左右,總硒含量可提高到260pg?g"左右,

3、富硒率在30%以上。再次,在搖瓶實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了5L發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)并對(duì)發(fā)酵罐參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。通過單因素試驗(yàn)、正交試驗(yàn)和發(fā)酵罐在線控制方法,優(yōu)化得到靈芝在發(fā)酵罐中生長(zhǎng)的最優(yōu)條件為:培養(yǎng)溫度280通氣量初始pH6.5,攪拌速度120rmd,接種量10%,分階段pH控制值5.0,DO值(與轉(zhuǎn)速串聯(lián))6%,此種條件下菌絲體生物量可達(dá)到14?91g?L“,總硒含量354憾『,富硒率35.2%。最后,測(cè)定了所培養(yǎng)靈芝中的營養(yǎng)素含量并分析了硒的存在狀態(tài)。富硒靈芝菌絲體中蛋白質(zhì)含量為16.28%,遠(yuǎn)高于普通靈芝的12.31%;原子吸收測(cè)定結(jié)果表明富硒靈芝中Ca.Fe、Zn、Se的含址分別為39

4、&lpgg化33&7ggg45.6ggg,和318?5pg?『;總硒中有機(jī)硒的比例達(dá)到79.1%o對(duì)硒礦水和亞硒酸鈉原料成本進(jìn)行計(jì)算,得出利用活化硒礦水取代亞硒酸鈉作為硒原具有節(jié)約成本的作用。關(guān)鍵詞:靈芝,活化硒礦水,深層培養(yǎng),富硒AbstractGanodermaLucidum(GL)isoneofthemostpreciousChinesemedicinalFungi?Seleniumisanessentialtraceelementforhumanbeing.Thereareveryfewreportsaboutthestudiesonthebio-transformof

5、seleniumusingGLasbiologicalcarrierandactivatedseleniumoresolution(ASOS)asseleniumsourceallovertheworld.Therefore,theresearchinthispaperhasimportantsignificanceinprobingnewwaysofseleniumaccumulationandinprovidingnewresourcesoforganicselenium.Themainresearchcontentsandtheresultsgottenareasfollo

6、ws^Firstly,thecomponentsofculturemediumwereoptimizedbythesteepestascentpathexperimentsandResponseSurfaceMethod(RSM)whenusingASOSonlyasseleniumresource:glucose2.13%,branjuice3.96%>KH2PO4O.3%,MgS04*7H200.09%?Undertheoptimizedcultivationconditions^thebiomassreached18g-L'thetotalseleniumcontente

7、xceeded150pg-g-1andtheseleniumaccumulationratecouldreach55%.Secondly,theprocessingtechnologyofASOSwasstudiedbyorthogonalexperimentalmethodologyasfollows:Adding300gpowderofseleniummineto600mLrotatedNH3-H2Oof0>6mobL4andlastedfor72h,thendriedito

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