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1、第35卷第2期家畜生態(tài)學(xué)報Vol_35NO.22014年2月ActaEcologiaeAnimalisDomasticiFeb.2014急彎棘豆總黃酮超聲波輔助提取工藝研究劉璐,傅旭陽,付明哲,趙寶玉(西北農(nóng)林科技大學(xué)1.理學(xué)院;2.動物醫(yī)學(xué)院,陜西楊凌712100)[摘要]為了探索超聲波輔助提取急彎棘豆黃酮的最佳工藝條件,試驗以急彎棘豆黃酮的含量為考察指標(biāo),通過單因素和正交實驗設(shè)計試驗研究提取超聲功率、溫度、時間、乙醇濃度、料液比對急彎棘豆黃酮提取率的影響,篩選出最佳提取工藝。結(jié)果表明,影響急彎棘豆超聲輔助提取的主要因素依次為超聲功率、溫度、超聲
2、時間和料液比。超聲波輔助提取彎棘豆黃酮最佳提取工藝條件:乙醇濃度在60%,超聲時間為45min,超聲波功率為800W,溫度45℃,料液比為1:1O。最高提取率為1.97。[關(guān)鍵詞]急彎棘豆;黃酮;超聲波提取[中圖分類號]$811.6[文獻標(biāo)識碼]A[文章編號]1005—5228(2014)02—0048—05急彎棘豆(Oxytropisdeflexa)系豆科棘豆屬植所,批號10080—200306)。物,廣泛分布在我國西北、華北、西南等地,主要生長在1.2儀器與設(shè)備海拔3000m以上草坡地],急彎棘豆全草在藏藥和蒙KQ15O0DE型數(shù)控超聲波清洗器
3、,昆山市超聲古藥中廣泛使用,民間多用于消炎、解毒、抗菌、鎮(zhèn)靜和儀器有限公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上海亞榮生化儀器廠;鎮(zhèn)痛等[2]。急彎棘豆全草中含有黃酮類化合物,以黃TU-1901紫外光譜儀,普析通用儀器有限責(zé)任公司。酮甙為主要成分[。]。許多研究已表明黃酮類化合物具1.3方法有多種生物活性,在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等1.3.1棘豆總黃酮的提取稱取3g急彎棘豆干方面有顯著效果,已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域[4]。傳統(tǒng)粉,在乙醇中超聲提取,過濾,合并兩次濾液,濃縮,溶劑熱提取急彎棘豆黃酮存在提取時間長、所用溶劑石油醚除去油脂和色素,將乙醇部分轉(zhuǎn)移到5OmL
4、量大、雜質(zhì)多、有效成分低、成本高等缺點,嚴(yán)重阻礙了容量瓶,用甲醇定容,作為樣品提取液。我國棘豆黃酮類化合物的開發(fā)利用[5]。近年來,超聲1.3.2棘豆總黃酮的測定L9波輔助提取黃酮類化合物的工藝已有一定報道l6],超1.3.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精確吸取0.542rag/聲波具有空化、湍流、界面和聚能效應(yīng),能破裂植物細mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液0.00、0.50、1.。0、1.5O、2.()(]、2.50、胞、促進溶劑滲透,輔助提取溫度低、時間短、產(chǎn)率高]。3.00、3.50mL于8只10mL容量瓶中,加入1mL但目前尚未見棘豆中黃酮類化合物的超聲提取工藝報1三
5、氯化鋁甲醇液,定容,放置15min,以不加蘆道。本研究通過單因素和正交實驗探索超聲波提取棘丁標(biāo)準(zhǔn)液為空白,于274nm波長下測定吸光度。豆黃酮的工藝參數(shù),篩選提取的最佳提取條件,為合理以吸光度對蘆丁含量作標(biāo)準(zhǔn)曲線。開發(fā)利用棘豆屬植物資源提供可靠依據(jù)]。1.3.2.2總黃酮的測定取樣品提取液3mL于10mL容量瓶,以相應(yīng)試劑做空白,用三氯化鋁顯色1材料與方法法,分別于274nm處測定吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計1.1材料與試劑算出急彎棘豆總黃酮含量。1.1.1供試樣品急彎棘豆20lO年8月采自青海1.3.3單因素試驗選取超聲功率、料液比、超聲省祁連草地,經(jīng)
6、陰干、去雜、粉碎過2O目篩備用。時間、乙醇濃度、提取溫度5個因素,以測定的總黃1.1.2試劑蘆丁對照品(中國藥品生物品檢定酮含量為指標(biāo),確定各因素的適宜范圍,見表1。[收稿日期]2013-06—03,修回日期:2013-07—15[基金項目]國家自然科學(xué)基金(31072175)[作者簡介]劉璐(1972一),女,陜西綏德人,碩士,主要從事植物化學(xué)實驗技術(shù)。Email:llul972@tom.corn[通訊作者]趙寶玉(1964一),男,陜西寶雞人,教授,研究方向:草地有毒植物中毒病研究與控制。E—mail:Zhaobaoyul2005@163.co
7、m第2期劉璐,等:急彎棘豆總黃酮超聲波輔助提取工藝研究49超聲功率Ultrasonicpower1:2O,45min,60%,45。C料液比Solid/Liquid800W,45。C,60,45℃超聲時間Ultrasonictime800W,1:20,60,45℃乙醇濃度Ethanolconcentration800W,1:2O,45℃,45℃溫度Temperature800W,I:20,45℃,601.3.4正交試驗在單因素試驗的基礎(chǔ)上,以超聲進行試驗。溫度、時間、料液比、超聲功率為主要因素,以樣品中1.3.5統(tǒng)計分析所有試驗數(shù)據(jù)采用SPSS13
8、.0總黃酮的提取率為指標(biāo),按照表2L9(34)正交設(shè)計軟件進行統(tǒng)計分析。表2(L934)正交試驗設(shè)計舢~~~一觚~T~ab