體外大鼠肝卵圓細(xì)胞的長期培養(yǎng)方法-論文.pdf

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1、中國組織工程研究第78卷29崩2014—07—09出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchJuly9．2014VoL18,No．29www．CRTER．org體外大鼠肝卵圓細(xì)胞的長期培養(yǎng)方法尹壽新’，周震，馬美雪。，楊景波’，羊東曄’(’中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院消化內(nèi)科，湖南省長沙市410011；長沙市第一醫(yī)院消化內(nèi)科，湖南省長沙市410005；：州市中心醫(yī)院；肖化內(nèi)科，江蘇省徐州市221009)文章亮點(diǎn)：．1肝卵圓細(xì)胞是目前公認(rèn)的成體肝干／祖細(xì)胞，肝干細(xì)胞移植／肝再生和肝卵圓細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)變等研究廣受關(guān)注。但尹壽新，男，1989

2、年生，其體外長期培養(yǎng)時會不可避免地丟失干細(xì)胞的活性，因此探索肝卵圓細(xì)胞體外長期培養(yǎng)方法具有重要的實(shí)際意義。山東省濟(jì)南市人，漢族，2014年中南大學(xué)湘雅醫(yī)2實(shí)驗(yàn)使用僅含表皮細(xì)胞生長因子、白血病抑制因子的培養(yǎng)基體外培養(yǎng)原代卵圓細(xì)胞，4個月時證明其仍能學(xué)院畢業(yè)，碩士，醫(yī)師，保持雙向分化的能力，培養(yǎng)時間較長，且其操作簡單、成本相對較小，此前未見有類似報(bào)道，可為其他研究主要從事肝癌和肝再生的者體外培養(yǎng)肝卵圓細(xì)胞提供一種新的選擇。研究3此前有多種文獻(xiàn)認(rèn)為卵圓細(xì)胞表達(dá)Thy．1，但本實(shí)驗(yàn)中無論是2一乙酰胺基芴，部分肝切除模型再生肝組織切片、卵圓細(xì)胞免疫細(xì)胞染色還是卵圓細(xì)胞蛋白We

3、sternblot都未發(fā)現(xiàn)Thy-1表達(dá)，這與某些造血干細(xì)胞極少并列第一作者：周震，男，1985年生，湖南省邵陽市轉(zhuǎn)化為肝干，祖細(xì)胞或肝細(xì)胞的報(bào)道一致。人，琢族，2013年中南大關(guān)鍵詞：學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院畢業(yè)，碩士，組織構(gòu)建：組織I程：郛圓細(xì)魄：長期培養(yǎng)：表安生長因子；白遺病抑鏹函子：國家自然科學(xué)基金醫(yī)師，主要從事肝癌和肝主題詞：再生的研究。盱細(xì)跑：表皮生長因子：白盤病抑瓴因子：細(xì)跑．培養(yǎng)的通訊作者：羊東曄，博士基金資助：后，副主任醫(yī)師，中南大2810年國家自然科學(xué)基金【8∞281學(xué)湘雅二醫(yī)院消化內(nèi)科，湖南省長沙市410011摘要背景：肝卵圓細(xì)胞是目前公認(rèn)的成體肝干，祖細(xì)

4、胞，但其體外長期培養(yǎng)時會不可避免地丟失干細(xì)胞的活性。doi：10396剮．issd．2095-4344201429．O13目的：探索大鼠肝卵圓細(xì)胞體外長期培養(yǎng)的方法?！緃ttp：／／www．crter．org】方法：構(gòu)建2一乙酰胺基芴，部分肝切除肝再生大鼠模型，通過酶消化和Percoll梯度離心分離純化大鼠異質(zhì)卵圓細(xì)胞并進(jìn)行免疫染色鑒定，用含表皮生長因子、白血病抑制因子的培養(yǎng)基體外長期培養(yǎng)，后撤去表皮生長中圖分類號：R318因子、白血病抑制因子，通過形態(tài)學(xué)的觀察和分子標(biāo)志物的檢測判斷其能否保持干，祖細(xì)胞活性。文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B結(jié)果與結(jié)論：采用含表皮生長因子、白血病抑制因

5、子的培養(yǎng)基體外培養(yǎng)卵圓細(xì)胞4個月后，大鼠異質(zhì)卵圓細(xì)文章編號：2095-4344f2014)29-04663．06胞仍能表達(dá)肝細(xì)胞標(biāo)志物ALB、膽管上皮細(xì)胞標(biāo)志物CK．19，經(jīng)不含表皮生長因子、白血病抑制因子的培養(yǎng)稿件接受：2014-05-27液繼續(xù)培養(yǎng)后，卵圓細(xì)胞胎肝標(biāo)志AFP表達(dá)量迅速下降。該研究結(jié)果表明大鼠肝卵圓細(xì)胞在表皮生長因子、白血病抑制因子等培養(yǎng)條件下可長期增殖并保持干細(xì)胞活性。尹壽顳．兩震．馬美雪．楊景波．羊東曄．缽釙大鼠殲郛函緬魄的長期培養(yǎng)方懣趣．中國組織I程磅究。2014．78f29J：4663—4668．ⅥnShou·xin。MastePhysic

6、ian，DepartmentofGastroenterology＆Hep=ology,Long-termcultureofhepaticovalcellsinrats／nv／trotheSecondXiangyaHospitalofCentraISouthUniversity,Changsha410011．Hunen'finShou．xin’，ZhouZhen，MaMei-xue。，YangJing．bo!，YangDong-ye’(’DepartmentofGastroenterologyProvince，China&Hepatology,theSecondXia

7、ngyaHospitalofCentralSouthUniversity,Changsha410011。HunanProvince。China；DepartmentofGastroenterology&Hepatology,theFlrstChangshaHospital，ChangshaZhouZhen，Master,Physician．410005，HunanProvince，China；。DepartmentofGastroenterology&Hepatology,XuzhouCentralHospital，DepartmentofXuzhou22100