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1、中國(guó)組織工程研究第78卷29崩2014—07—09出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchJuly9.2014VoL18,No.29www.CRTER.org體外大鼠肝卵圓細(xì)胞的長(zhǎng)期培養(yǎng)方法尹壽新’,周震,馬美雪。,楊景波’,羊東曄’(’中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院消化內(nèi)科,湖南省長(zhǎng)沙市410011;長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院消化內(nèi)科,湖南省長(zhǎng)沙市410005;:州市中心醫(yī)院;肖化內(nèi)科,江蘇省徐州市221009)文章亮點(diǎn):.1肝卵圓細(xì)胞是目前公認(rèn)的成體肝干/祖細(xì)胞,肝干細(xì)胞移植/肝再生和肝卵圓細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)變等研究廣受關(guān)注。但尹壽新,男,1989
2、年生,其體外長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)會(huì)不可避免地丟失干細(xì)胞的活性,因此探索肝卵圓細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)方法具有重要的實(shí)際意義。山東省濟(jì)南市人,漢族,2014年中南大學(xué)湘雅醫(yī)2實(shí)驗(yàn)使用僅含表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、白血病抑制因子的培養(yǎng)基體外培養(yǎng)原代卵圓細(xì)胞,4個(gè)月時(shí)證明其仍能學(xué)院畢業(yè),碩士,醫(yī)師,保持雙向分化的能力,培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),且其操作簡(jiǎn)單、成本相對(duì)較小,此前未見有類似報(bào)道,可為其他研究主要從事肝癌和肝再生的者體外培養(yǎng)肝卵圓細(xì)胞提供一種新的選擇。研究3此前有多種文獻(xiàn)認(rèn)為卵圓細(xì)胞表達(dá)Thy.1,但本實(shí)驗(yàn)中無論是2一乙酰胺基芴,部分肝切除模型再生肝組織切片、卵圓細(xì)胞免疫細(xì)胞染色還是卵圓細(xì)胞蛋白We
3、sternblot都未發(fā)現(xiàn)Thy-1表達(dá),這與某些造血干細(xì)胞極少并列第一作者:周震,男,1985年生,湖南省邵陽市轉(zhuǎn)化為肝干,祖細(xì)胞或肝細(xì)胞的報(bào)道一致。人,琢族,2013年中南大關(guān)鍵詞:學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院畢業(yè),碩士,組織構(gòu)建:組織I程:郛圓細(xì)魄:長(zhǎng)期培養(yǎng):表安生長(zhǎng)因子;白遺病抑鏹函子:國(guó)家自然科學(xué)基金醫(yī)師,主要從事肝癌和肝主題詞:再生的研究。盱細(xì)跑:表皮生長(zhǎng)因子:白盤病抑瓴因子:細(xì)跑.培養(yǎng)的通訊作者:羊東曄,博士基金資助:后,副主任醫(yī)師,中南大2810年國(guó)家自然科學(xué)基金【8∞281學(xué)湘雅二醫(yī)院消化內(nèi)科,湖南省長(zhǎng)沙市410011摘要背景:肝卵圓細(xì)胞是目前公認(rèn)的成體肝干,祖細(xì)
4、胞,但其體外長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)會(huì)不可避免地丟失干細(xì)胞的活性。doi:10396剮.issd.2095-4344201429.O13目的:探索大鼠肝卵圓細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的方法。【http://www.crter.org】方法:構(gòu)建2一乙酰胺基芴,部分肝切除肝再生大鼠模型,通過酶消化和Percoll梯度離心分離純化大鼠異質(zhì)卵圓細(xì)胞并進(jìn)行免疫染色鑒定,用含表皮生長(zhǎng)因子、白血病抑制因子的培養(yǎng)基體外長(zhǎng)期培養(yǎng),后撤去表皮生長(zhǎng)中圖分類號(hào):R318因子、白血病抑制因子,通過形態(tài)學(xué)的觀察和分子標(biāo)志物的檢測(cè)判斷其能否保持干,祖細(xì)胞活性。文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B結(jié)果與結(jié)論:采用含表皮生長(zhǎng)因子、白血病抑制因
5、子的培養(yǎng)基體外培養(yǎng)卵圓細(xì)胞4個(gè)月后,大鼠異質(zhì)卵圓細(xì)文章編號(hào):2095-4344f2014)29-04663.06胞仍能表達(dá)肝細(xì)胞標(biāo)志物ALB、膽管上皮細(xì)胞標(biāo)志物CK.19,經(jīng)不含表皮生長(zhǎng)因子、白血病抑制因子的培養(yǎng)稿件接受:2014-05-27液繼續(xù)培養(yǎng)后,卵圓細(xì)胞胎肝標(biāo)志AFP表達(dá)量迅速下降。該研究結(jié)果表明大鼠肝卵圓細(xì)胞在表皮生長(zhǎng)因子、白血病抑制因子等培養(yǎng)條件下可長(zhǎng)期增殖并保持干細(xì)胞活性。尹壽顳.兩震.馬美雪.楊景波.羊東曄.缽釙大鼠殲郛函緬魄的長(zhǎng)期培養(yǎng)方懣趣.中國(guó)組織I程磅究。2014.78f29J:4663—4668.ⅥnShou·xin。MastePhysic
6、ian,DepartmentofGastroenterology&Hep=ology,Long-termcultureofhepaticovalcellsinrats/nv/trotheSecondXiangyaHospitalofCentraISouthUniversity,Changsha410011.Hunen'finShou.xin’,ZhouZhen,MaMei-xue。,YangJing.bo!,YangDong-ye’(’DepartmentofGastroenterologyProvince,China&Hepatology,theSecondXia
7、ngyaHospitalofCentralSouthUniversity,Changsha410011。HunanProvince。China;DepartmentofGastroenterology&Hepatology,theFlrstChangshaHospital,ChangshaZhouZhen,Master,Physician.410005,HunanProvince,China;。DepartmentofGastroenterology&Hepatology,XuzhouCentralHospital,DepartmentofXuzhou22100