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1、氟對小鼠釉原蛋白基因表達的影響：陶洪，王琳，侯鐵舟，張瓏，王雪絨【摘要】目的探討氟對小鼠釉原蛋白基因表達的影響。方法在建立小鼠中度及重度氟斑牙模型的基礎上，應用原位雜交技術檢測對照組(飲用去離子水)、低氟組(飲水F-濃度為50mg/L)、高氟組(飲水F-濃度為150mg/L)小鼠下切牙發(fā)育過程中釉原蛋白mRNA在成釉細胞增殖分化期﹑分泌期﹑成熟期的表達情況。結果小鼠釉原蛋白mRNA在成釉細胞增殖分化期表達為陰性，分泌初期細胞內及新生釉基質中開始出現(xiàn)弱陽性表達;至分泌期，細胞內及新生釉基質中均呈強陽性表達;成熟釉質中無釉原蛋白mRNA的陽性表達。低氟組釉原蛋白mRNA在新生釉基質表面呈強弱交替的
2、不均勻表達;高氟組釉原蛋白mRNA在新生釉基質表面及礦化釉質中均呈陽性表達;在成釉細胞分泌期，其表達多次中斷。結論氟影響釉原蛋白mRNA在成釉細胞、釉基質中的表達，過高濃度的氟周期性抑制成釉細胞分泌釉基質的功能，從而導致釉質的礦化不全、礦化不均及局灶性缺損。【關鍵詞】氟;秞原蛋白;原位雜交 ABSTRACT:ObjectiveTostudytheeffectoffluorineontheamelogeningeneexpressionofmusmusculusincisors.MethodsOnthebasisofestablishingamodelformedium-andhigh-leve
3、ldentalfluorosisofmusmusculus,thisresearchanalyzedthespace-timeexpressionofamelogeninininferiorincisorgrousmusculusbyusinginsituhybridization.ResultsAmelogeninmRNAicroscopeintheameloblastproliferationdifferentiationperiod,anditshoelmatrixattheinitialsecretionstagebutitshoelmatrixetosecretionphase.Th
4、ereelogeninmRNAatthematurestage.Inlog/L),amelogeninmRNAshoelmatrixunderthemicroscope.Inhigh-fluorinegroup(theconcentrationofF-indrinkingg/L),amelogeninmRNAshoeljunctionofneelmatrixandmineralizedenamelunderthemicroscope.ConclusionOverdosefluorinecanaffecttheexpressionofamelogeninmRNAofameloblastanden
5、amelmatrix,anditcanintermittentlyinfluencetheexudationofenamelmatrixatthesametime.Then,itineralizationofenamel,unsymmetricalmineralizationandfocaldamnification. KEYelogenin;insituhybridization 氟牙癥發(fā)病機制的研究已取得了相當程度的進展，但氟對釉質蛋白基因表達的研究才剛剛起步。盡管釉基質蛋白潴留可以解釋釉質礦化不良，但卻無法解釋釉質不均勻的礦化不全以及牙齒表面局灶性釉質發(fā)育不全、牙齒窩溝變淺、牙本質鈣
6、化不良等現(xiàn)象。如果能夠證實氟使得牙胚成釉細胞出現(xiàn)不均勻的分化、增殖和釉質蛋白基因表達功能異常，將有助于對上述問題的解釋。因此，本實驗采用原位雜交技術，研究過量氟對牙釉質發(fā)育過程中起關鍵作用的釉原蛋白基因時空表達的影響，旨在從分子水平上進一步探討氟牙癥的發(fā)病機理，為氟牙癥的預防提供新的理論依據?！ ?材料與方法 1.1小鼠氟牙癥動物模型的建立 1.1.1實驗動物及分組30只ICR雄性小鼠，體重18～22g，購于西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心。動物隨機分為對照組、低氟組、高氟組，每組10只。 1.1.2動物飼養(yǎng)及處理動物適應性飼養(yǎng)1周。1周后，對照組、低氟組、高氟組小鼠飼以常規(guī)飼料;對照組飲
7、用去離子水，低氟組飲水投50mg/L氟(F-)，高氟組飲水投150mg/LF-，飼養(yǎng)42d。飼養(yǎng)期間每天觀察大鼠的一般狀態(tài)及牙齒變化，每10d稱重;至第42天存活小鼠28只(高氟組死亡2只)。脫頸處死所有小鼠，解剖分離下頜切牙及其牙胚組織，置于40g/L多聚甲醛(含1mL/LDEPC)中固定24h?！ ?.2標本制備參照侯鐵舟[1]氟牙癥10類分級標準，選取小鼠氟牙癥4～5級(輕度)，9～10級(
