氟對(duì)小鼠釉原蛋白基因表達(dá)的影響

氟對(duì)小鼠釉原蛋白基因表達(dá)的影響

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1、氟對(duì)小鼠釉原蛋白基因表達(dá)的影響:陶洪,王琳,侯鐵舟,張瓏,王雪絨【摘要】目的探討氟對(duì)小鼠釉原蛋白基因表達(dá)的影響。方法在建立小鼠中度及重度氟斑牙模型的基礎(chǔ)上,應(yīng)用原位雜交技術(shù)檢測(cè)對(duì)照組(飲用去離子水)、低氟組(飲水F-濃度為50mg/L)、高氟組(飲水F-濃度為150mg/L)小鼠下切牙發(fā)育過程中釉原蛋白mRNA在成釉細(xì)胞增殖分化期﹑分泌期﹑成熟期的表達(dá)情況。結(jié)果小鼠釉原蛋白mRNA在成釉細(xì)胞增殖分化期表達(dá)為陰性,分泌初期細(xì)胞內(nèi)及新生釉基質(zhì)中開始出現(xiàn)弱陽性表達(dá);至分泌期,細(xì)胞內(nèi)及新生釉基質(zhì)中均呈強(qiáng)陽性表達(dá);成熟釉質(zhì)中無釉原蛋白mRNA的陽性表達(dá)。低氟組釉原蛋白mRNA在新生釉基質(zhì)表面呈強(qiáng)弱交替的

2、不均勻表達(dá);高氟組釉原蛋白mRNA在新生釉基質(zhì)表面及礦化釉質(zhì)中均呈陽性表達(dá);在成釉細(xì)胞分泌期,其表達(dá)多次中斷。結(jié)論氟影響釉原蛋白mRNA在成釉細(xì)胞、釉基質(zhì)中的表達(dá),過高濃度的氟周期性抑制成釉細(xì)胞分泌釉基質(zhì)的功能,從而導(dǎo)致釉質(zhì)的礦化不全、礦化不均及局灶性缺損。【關(guān)鍵詞】氟;秞原蛋白;原位雜交 ABSTRACT:ObjectiveTostudytheeffectoffluorineontheamelogeningeneexpressionofmusmusculusincisors.MethodsOnthebasisofestablishingamodelformedium-andhigh-leve

3、ldentalfluorosisofmusmusculus,thisresearchanalyzedthespace-timeexpressionofamelogeninininferiorincisorgrousmusculusbyusinginsituhybridization.ResultsAmelogeninmRNAicroscopeintheameloblastproliferationdifferentiationperiod,anditshoelmatrixattheinitialsecretionstagebutitshoelmatrixetosecretionphase.Th

4、ereelogeninmRNAatthematurestage.Inlog/L),amelogeninmRNAshoelmatrixunderthemicroscope.Inhigh-fluorinegroup(theconcentrationofF-indrinkingg/L),amelogeninmRNAshoeljunctionofneelmatrixandmineralizedenamelunderthemicroscope.ConclusionOverdosefluorinecanaffecttheexpressionofamelogeninmRNAofameloblastanden

5、amelmatrix,anditcanintermittentlyinfluencetheexudationofenamelmatrixatthesametime.Then,itineralizationofenamel,unsymmetricalmineralizationandfocaldamnification.  KEYelogenin;insituhybridization  氟牙癥發(fā)病機(jī)制的研究已取得了相當(dāng)程度的進(jìn)展,但氟對(duì)釉質(zhì)蛋白基因表達(dá)的研究才剛剛起步。盡管釉基質(zhì)蛋白潴留可以解釋釉質(zhì)礦化不良,但卻無法解釋釉質(zhì)不均勻的礦化不全以及牙齒表面局灶性釉質(zhì)發(fā)育不全、牙齒窩溝變淺、牙本質(zhì)鈣

6、化不良等現(xiàn)象。如果能夠證實(shí)氟使得牙胚成釉細(xì)胞出現(xiàn)不均勻的分化、增殖和釉質(zhì)蛋白基因表達(dá)功能異常,將有助于對(duì)上述問題的解釋。因此,本實(shí)驗(yàn)采用原位雜交技術(shù),研究過量氟對(duì)牙釉質(zhì)發(fā)育過程中起關(guān)鍵作用的釉原蛋白基因時(shí)空表達(dá)的影響,旨在從分子水平上進(jìn)一步探討氟牙癥的發(fā)病機(jī)理,為氟牙癥的預(yù)防提供新的理論依據(jù)?! ?材料與方法  1.1小鼠氟牙癥動(dòng)物模型的建立  1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組30只ICR雄性小鼠,體重18~22g,購(gòu)于西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組、低氟組、高氟組,每組10只。  1.1.2動(dòng)物飼養(yǎng)及處理動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。1周后,對(duì)照組、低氟組、高氟組小鼠飼以常規(guī)飼料;對(duì)照組飲

7、用去離子水,低氟組飲水投50mg/L氟(F-),高氟組飲水投150mg/LF-,飼養(yǎng)42d。飼養(yǎng)期間每天觀察大鼠的一般狀態(tài)及牙齒變化,每10d稱重;至第42天存活小鼠28只(高氟組死亡2只)。脫頸處死所有小鼠,解剖分離下頜切牙及其牙胚組織,置于40g/L多聚甲醛(含1mL/LDEPC)中固定24h?! ?.2標(biāo)本制備參照侯鐵舟[1]氟牙癥10類分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),選取小鼠氟牙癥4~5級(jí)(輕度),9~10級(jí)(

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