木蝴蝶總黃酮超聲提取工藝研究

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1、木蝴蝶總黃酮超聲提取工藝研究【摘要】目的研究超聲輔助提取木蝴蝶種子中總黃酮的最佳工藝條件。方法以黃芩苷為對照品,木蝴蝶總黃酮得率為考察指標(biāo),通過正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選超聲提取總黃酮的最佳工藝。結(jié)果所考察因素中,木蝴蝶總黃酮的提取工藝中各因素影響程度為:超聲時(shí)間(D)>超聲功率(C)>料液比(B)>乙醇濃度(A),最佳水平搭配為A1B3C2D3。結(jié)論木蝴蝶總黃酮最佳提取工藝參數(shù)為:乙醇濃度為60%,料液比:1∶30,超聲提取1次,時(shí)間50min,超聲功率:210ethodsSingle-fa

2、ctoranalysisandorthogonaldesignizetheextractionprocessaccordingtoextractionyieldoftotalflavonoidsinthesameconditions.ResultsTheorderoffactorseofultrasonictreatment>ultrasoundpoaterial>ethanolconcentration,andthebestmatchindicumcanbeestablishedasf

3、olloe50minfor1timeandultrasoundpoindicum;Totalflavonoids;Ultrasonicextraction  木蝴蝶為紫葳科木蝴蝶屬植物木蝴蝶Oroxylumindicum(L.)Vent的成熟種子[1]。木蝴蝶化學(xué)成分以黃酮及其苷類為主,許多成分在黃芩中都已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)過[2,3]。該植物為一常用中藥,有清肺利咽、止咳、舒肝和胃以及生肌之功能,主治以咳嗽為主癥的上呼吸道感染、急性支氣管炎、急性喉炎(無喉梗阻)、慢性咽炎、百日咳、肺炎后期等[4]?!∧壳吧?/p>

4、未見有關(guān)木蝴蝶總黃酮提取工藝的研究報(bào)道,而用超聲波法提取黃酮,是目前比較新的方法。其原理是利用超聲波可使液體中產(chǎn)生“空穴作用”,破壞植物細(xì)胞和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),加速溶劑進(jìn)入細(xì)胞,超聲作用強(qiáng)化了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散和溶解,使其中的有效成分快速轉(zhuǎn)入溶劑,使細(xì)胞內(nèi)外出現(xiàn)濃度差,促使化學(xué)成分由高濃度溶液向低濃度溶液擴(kuò)散。因此,超聲波法大大加速了提取時(shí)間,提高了有效成分的提出率和原料的利用率[5,10]。我們研究室在植物有效成分和提取工藝方面進(jìn)行了系列的研究[6],在此基礎(chǔ)上,本文研究了超聲波輔助提取木蝴蝶總黃酮的

5、工藝,并通過正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行考察,以期為工業(yè)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。  1儀器與材料  1.1儀器UV-2102PC型紫外可見分光光度計(jì),尤尼柯(上海)儀器有限公司;KQ-300VDE型三頻數(shù)控超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司;RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,上海亞榮生化儀器廠;SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵,鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;AR1140型電子分析天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司?! ?.2材料與試劑木蝴蝶藥材購自河南省藥材公司,經(jīng)劉福勤高級工程師鑒定為紫葳科植物木蝴蝶的種子;黃芩苷對照品(

6、含量≥98%):購自成都曼思特生物科技有限公司;其它試劑均為分析純?! ?方法與結(jié)果  2.1木蝴蝶總黃酮含量的測定[7]  2.1.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作精密稱取已經(jīng)在60℃減壓干燥至恒重的黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)樣品17.1mg置100ml容量瓶中,用70%乙醇溶液定容至刻度,搖勻,即得黃芩苷對照品溶液(濃度:0.171mg/ml),再精密吸取黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml,分別置于50ml容量瓶中,加70%乙醇定容至刻度,搖勻,以70%乙醇為空白,分別在最大吸收

7、波長278nm處測定其吸光度。以吸光度A為橫坐標(biāo),濃度C為縱坐標(biāo)繪制吸光度-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用二元線性回歸方法求出回歸方程為:C=15.914A+0.1447,R2=0.9996?! ?.1.2樣品中總黃酮含量的測定[8]精密稱取木蝴蝶粗粉3.0g,置于150ml圓底燒瓶中,加入一定量提取溶劑,提取一定時(shí)間后真空抽濾,濾液經(jīng)石油醚萃取3次后減壓蒸餾回收溶劑至近干,加入70ml70%乙醇超聲溶解,移入100ml容量瓶中,冷卻至室溫后用70%乙醇定容至刻度搖勻。取此樣品液1.0ml置于50ml容量瓶中,

8、加入70%乙醇定容至刻度搖勻,取此稀釋液3.0ml于50ml容量瓶中加入70%乙醇定容至刻度搖勻,以70%乙醇作參比液,在278nm處測定吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算樣品溶液的總黃酮濃度。樣品中總黃酮得率按公式①計(jì)算:Y(%)=C×A×BD×10-6×100%①式中:Y―木蝴蝶總黃酮得率;A―稀釋倍數(shù);B―測定時(shí)定容量(ml);C―線性計(jì)算出的濃度(μg/ml);D―稱取藥材量(g)?! ?.2提取溶劑的選擇精密稱取上述木蝴蝶粉3.0g,8份,置150ml圓底燒瓶

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