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1、高效液相色譜法同時測定甘草中甘草酸、甘草苷、異甘草素的含量的論文作者：陳云華,趙曉霞,王文全,段天璇【摘要】目的建立同時測定甘草中甘草酸、甘草苷和異甘草素含量的方法。方法采用高效液相色譜法對甘草粉末的67%甲醇提取物進(jìn)行分析。用c18反相色譜柱,1%磷酸水-乙腈梯度洗脫,對不同色譜峰分別采用248、276、360、370nm紫外波長檢測。結(jié)果甘草酸的回歸方程為y＝1×106x＋16220,r2＝1；甘草苷的回歸方程為y＝2×106x＋49444,r2＝0.9995；異甘草素的回歸方程為y＝1×107x＋4.4667,r2＝1。甘草酸、
2、甘草苷和異甘草素的加樣回收率分別為98.01%、102.63%、98.18%。結(jié)論本方法準(zhǔn)確、穩(wěn)定、可靠,可用于甘草中甘草酸、甘草苷和異甘草素3種成分的同時測定?！娟P(guān)鍵詞】甘草；甘草酸；甘草苷；異甘草素；高效液相色譜法；含量測定abstract：objectivetodevelopahplcquantitativelytestmethodofglycyrrhizin,liquiritinandisoliquritigeninsimultaneouslyforlicorice.methodsthe67%methanolextractso
3、flicoricepon,usingagradientelutionixtureof1%h3po4andacetonitrile.theeluateonitoredbyuvabsorptionat248,276,360and370nm.resultsthelinearequationofglycyrrhizinethodisaccurate,stableamdreliable,andcanbeusedtodeterminethethreemainchemicalcontentssimultaneously.keyination在甘草質(zhì)
4、量研究中,建立穩(wěn)定可靠的甘草多種成分含量測定非常必要。.甘草酸、甘草苷、異甘草素是甘草中代表性成分,甘草酸是皂苷類代表,甘草苷是黃酮類代表,而異甘草素是一種異黃酮類成分。我們此次在以往工作的基礎(chǔ)上[1],完善了甘草含量測定方法,使其同時可以對甘草酸、甘草苷、異甘草素進(jìn)行含量測定?！ ?儀器與試藥agilent1100型高效液相色譜儀(配有g(shù)1314a紫外檢測器、1315bdad檢測器、g1311a四元梯度泵、g1322a在線脫氣裝置、g1316a柱溫箱)；agilent1100化學(xué)工作站；sartoriusbs110s1/萬、bp21
5、1d1/(10萬)電子分析天平；kl3120d超聲清洗機(jī)。甘草glycyrrhizauralensisfisch.3年生采自甘肅總寨,1～5年生采自內(nèi)蒙古杭錦旗,由北京中醫(yī)藥大學(xué)王文全教授鑒定。60℃干燥過夜并粉碎。甘草酸、甘草苷、異甘草素對照品(批號分別為060520、061009、060801)由上?？稻呕す咎峁?供含量測定用)。乙腈為色譜純；水為市售娃哈哈純凈水；甲醇、甲酸、磷酸、冰醋酸為分析純?！ ?方法與結(jié)果 2.1檢測波長的確定分別稱取甘草酸、甘草苷、異甘草素對照品適量,分別加甲醇配制成每1ml約含0.1mg的對照品
6、溶液。以甲醇為空白,在波長190～400nm范圍內(nèi)掃描,結(jié)果甘草酸的最大吸收波長為248nm和360nm,甘草苷的最大吸收波長為276nm,而異甘草素的最大吸收波長為370nm?！ ?.2色譜條件色譜柱：agilentzorbaxextend分析柱(4.6mm×250mm,5μm)；柱溫：25℃；進(jìn)行梯度洗脫,流動相a為1%磷酸水溶液,流動相b為乙腈；梯度程序、流速及檢測波長變化見表1。進(jìn)樣量為10μl。表1流動相梯度條件及檢測波長（略） 2.3供試品溶液的制備精密稱取甘草粉末(過60目篩,60℃干燥12h)0.1g,置25ml容量
7、瓶中,加入20ml67%甲醇冷浸24h,超聲30min,放至室溫,加67%甲醇至刻度,搖勻,以0.45μm微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液即得?！ ?.4工作曲線稱取甘草苷對照品6.28mg、甘草酸對照品5.99mg,分別用甲醇定容于25ml容量瓶中,作為甘草苷和甘草酸對照品儲備液。另取異甘草素對照品4.35mg,置25ml容量瓶中,以甲醇溶解并稀釋至刻度,再精密吸取0.4ml置10ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得異甘草素儲備液。分別精密吸取甘草苷儲備液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml,甘草酸儲備液1.0、2.0、3.0、4
8、.0、5.0、6.0ml,異甘草素儲備液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml,置6個10ml容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,作為系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別進(jìn)樣20μl,記錄甘草苷、甘草酸和異甘草素的峰面積。以峰面積
