苯酚-硫酸法測定菊苣根中總糖含量

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1、苯酚-硫酸法測定菊苣根中總糖含量【摘要】目的：研究菊苣根總糖的測定方法。方法：采用苯酚-硫酸法，在488nm處測菊苣根中總糖的含量。結(jié)果：回歸方程為Y=10.908X-0.13264，r=0.9999，線性范圍為30-80μg/ml。平均回收率為103.27%，RSD=2.20%。菊苣根中平均總糖含量為平均含量為34.613mg/g。結(jié)論：方法簡便，結(jié)果準(zhǔn)確，為菊苣根總糖的進(jìn)一步研究奠定良好的基礎(chǔ)。【關(guān)鍵詞】：菊苣根總糖苯酚-硫酸法【中圖分類號(hào)】R28;R92;【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1007-8517(2008)4-0012-02菊苣根為菊科植物

2、毛菊苣(CichoriumglandulosumBoiss.etIIout)及菊苣(CichoriumintybusL.)干燥的根。菊苣系維吾爾族習(xí)用藥材，維吾爾語名為卡申納，有清肝利膽､健胃消食､利尿消腫之功效[1]?！吨袊幍洹?000年版一部只收載其地上部分。菊苣根主要含有三萜､倍半萜､有機(jī)酸等類成分[2-4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，菊苣根具有改善消化器官活動(dòng)機(jī)能､改善心臟功能､保肝降脂､降血糖和抗菌等作用[5]。為了確定菊苣根總糖的含量，本文利用苯酚-

3、硫酸法制得醛糖衍生物，采用分光光度法對菊苣根總糖含量進(jìn)行測定。51儀器與試藥SpectrumLab54分光光度計(jì)(上海棱光技術(shù)有限公司)，RE52CS-2旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀(上海亞榮儀器廠)，KQ-400DBC超聲清洗儀(昆山市超生儀器有限公司)，BS110S分析天平(北京，賽多利斯)，DZF-6021型真空干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠);其它所用試劑均為分析純。菊苣根采自新疆烏魯木齊市南山，經(jīng)新疆自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院李永和主任藥師鑒定為菊科植物菊苣(CichoriumintybusL.)的干燥根。2方法與結(jié)果2.菊苣根總糖的提?。壕哲母稍?，粉碎過20目篩，精密

4、稱取藥材粉末10g，用石油醚索氏回流提取4h，藥渣在50℃減壓干燥至干。然后精密稱取脫脂后的藥渣3g，加蒸餾水100mL，回流提取3次。每次20min，過濾，合并濾液并定容至200ml，得0.015g/ml的總糖提取液，備用。2.對照品溶液的制備：精密稱取葡萄糖對照品100mg，置100ml量瓶中，蒸餾水定容，配成1mg/ml的對照品溶液，備用。2.3供試品溶液的制備：精密量取上述菊苣根總糖提取液1ml于10ml具塞試管中，加入6%苯酚溶液1ml，振搖，迅速加入濃硫酸4ml，混合均勻，蒸餾水定容至刻度，靜置10min，冷水迅速冷卻至室溫，備用。精密量取

5、蒸餾水1ml同樣操作，作為空白對照。52.4測定波長的確定：取供試品溶液､對照品溶液和空白對照溶液，400-700nm波長掃描，供試品溶液與對照品溶液在488nm處有最大吸收?？瞻讓φ諢o干擾。故確定488nm為測定波長，結(jié)果見圖1。2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密量取對照品溶液30､40､50､70､80μl于10ml具塞試管中，各加入6%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入濃硫酸4ml，混合均勻，蒸餾水定容至刻度，靜置10min，冷水迅速冷卻至室溫。按分光光度法在488nm處測定吸光度。以

6、吸收度(A)對濃度(C)做線性回歸計(jì)算，得回歸方程：Y=10.908X-0.13264，r=0.9999(n=5)。結(jié)果表明在30-80μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.6精密度實(shí)驗(yàn)：精密吸取供試品溶液，連續(xù)測定4次，RSD=1.09%，表明儀器精密度良好。2.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：精密吸取同一新制備的供試品溶液，每隔10分鐘測定一次，連續(xù)測定3次。RSD=1.35%，表明樣品在30分鐘之內(nèi)穩(wěn)定。2.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：精密吸取同一批菊苣根總糖提取液3份，制備供試品溶液，按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下處理并測定。結(jié)果RSD=1.25%。表明本法有較好的重復(fù)性。2.95回

7、收率實(shí)驗(yàn)：精密吸取已知濃度的菊苣根總糖提取液6份，分別加入高､中､低三種濃度不同的對照品溶液，制備供試品溶液，按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下處理并測定。結(jié)果平均回收率為103.27%，RSD=2.20%，見表1。2.10樣品測定：連續(xù)測定3批菊苣根總糖提取液樣品，平均含量為34.613mg/g，見表2。3討論6%苯酚溶液易被氧化，實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。制備標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，葡萄糖濃度不應(yīng)過高，加入濃硫酸不應(yīng)過多，否則容易碳化。測定樣品時(shí)應(yīng)在30分鐘內(nèi)完成，時(shí)間過長，樣品的穩(wěn)定性降低，影響測定數(shù)值的準(zhǔn)確性。參考文獻(xiàn)[1]劉勇民.維吾爾藥志(

8、上)[M].烏魯木齊：新疆科技衛(wèi)生出版社，1999：471[2]何軼，郭亞健，高云艷.菊苣根化