硫酸苯酚法測可溶性總糖含量講解學(xué)習(xí).doc

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1、精品好文檔,推薦學(xué)習(xí)交流硫酸苯酚法測可溶性總糖含量一、測定原理可溶性糖主要有能溶于水及乙醇的可溶性單糖和寡聚糖。糖在濃硫酸作用下脫水生成糠醛或羥甲基糠醛能與苯酚所合成一種橙紅色化合物,在10~100mg范圍內(nèi)其顏色深淺與糖的含量成正比,且在485nm波長下有最大吸收峰,因此可用比色法在此波長下測定。硫酸苯酚法可以用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的測定,方法簡單,靈敏度高且不受蛋白質(zhì)存在的影響,產(chǎn)生的顏色穩(wěn)定時(shí)間160min以上。二、實(shí)驗(yàn)試劑1.90%苯酚溶液:稱取90g苯酚,加蒸餾水定容至100ml。2.9%苯酚溶液:取3ml90%苯酚溶液,加蒸餾水至3

2、0ml,現(xiàn)配先用。3.濃硫酸(比重1.84)4.1%蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液:將分析純蔗糖在80℃下烘至恒重,精確稱取1.000g,加少量水溶解,移入100ml容量瓶中,加入0.5ml濃硫酸,用蒸餾水定容至刻度。5.100μg/L蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液:精確吸取1%蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液lml加入100ml容量瓶中,加蒸餾水定容。三、儀器設(shè)備分光光度計(jì),50ml比色管7支,移液管四、實(shí)驗(yàn)步驟1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取20ml刻度試管6支,從0~5分別編號,按表1加入溶液和水,然后按順序向試管內(nèi)加入1ml9%苯酚溶液,搖勻,再從管液正面以5~20s時(shí)間加入5ml濃硫酸,搖勻。比色液總體積為8ml

3、,在室溫下放置30min,顯色。然后以空白為參比,在485nm波長下比色測定,以糖含量為橫坐標(biāo),光密度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出標(biāo)準(zhǔn)直線方程。表一試劑管號012345100μg/L蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液(ml)00.20.40.60.81.0蒸餾水(ml)2.01.81.61.41.21.0蔗糖量(μl)0204060801002.可溶性糖的提取稱取樣品0.1~0.3g,放入1支刻度試管中,加入5~10ml蒸餾水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液過濾入25ml僅供學(xué)習(xí)與交流,如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除謝謝3精品好文檔,推薦學(xué)習(xí)交流容量瓶中,

4、反復(fù)沖洗試管及殘?jiān)?,定容至刻度?.測定吸取0.5ml樣品液于試管中(重復(fù)2次),加蒸餾水1.5ml,同制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的步驟,按順序分別加入苯酚、濃硫酸溶液,顯色并測定光密度。由標(biāo)準(zhǔn)線性方程求出糖的量,計(jì)算測試樣品中糖含量。四、結(jié)果計(jì)算可溶性糖含量(%)X=﹙C×D/M﹚×100X———每百克樣品總糖含量C———在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的糖含量(g)D———稀釋倍數(shù)M———樣品重量(g)運(yùn)算定律與簡便計(jì)算練習(xí)題一、判斷題。1、27+33+67=27+100???????????(???)???? 2、125×16=125×8×2?????????(???) 3

5、、134-75+25=134-(75+25)???(???) 4、先乘前兩個(gè)數(shù),或者先乘后兩個(gè)數(shù),積不變,這是乘法結(jié)合律。(????) 5、1250÷(25×5)=1250÷25×5??(???) 二、選擇(把正確答案的序號填入括號內(nèi)) 1、56+72+28=56+(72+28)運(yùn)用了(??)A、加法交換律??B、加法結(jié)合律??C、乘法結(jié)合律??D、加法交換律和結(jié)合律 2、25×(8+4)=(???)A、25×8×25×4?????B、25×8+25×4???C、25×4×8???D、25×8+4 3、3×8×4×5=(3×4)×(8×5)運(yùn)用了?(

6、????) A、乘法交換律B、乘法結(jié)合律C、乘法分配律D、乘法交換律和結(jié)合律 4、101×125=???(??) A、100×125+1??B、125×100+125??C、125×100×1??D、100×125×1×1255、用2,4,6三個(gè)數(shù)字可以組成(????)個(gè)不同的三位數(shù)。(每個(gè)數(shù)中,每個(gè)數(shù)字只出現(xiàn)一次)????A.3??????B.6???????C.96、265×95+265×5=265×(95+5)在計(jì)‘算時(shí)用了(????)。????A.加法結(jié)合律????B.乘法結(jié)合律C.乘法分配律????D.減法性質(zhì)7、計(jì)算(125+16)×8下

7、面哪種簡便方法正確?(????)????A.原式=125×8+6??   ??B.原式=125×16×8????C.原式=125×?8×16×?8????D.原式=125×8+16×88、一只蝸牛用4分鐘爬行了24米,煦這樣的速度,要爬行72米須用幾分鐘?列式是(????)。????A.24×(72÷4)????B.24÷(72÷4)C.72×(24÷4)????D.72÷(24÷4)僅供學(xué)習(xí)與交流,如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除謝謝3精品好文檔,推薦學(xué)習(xí)交流 三、怎樣簡便就怎樣計(jì)算355+260+140+245????????102×99????????2

8、×125???????????645-180-245????? ????125×32????????????

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