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《腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因kai1-cd82在順鉑作用下的卵巢癌細胞中表達的變化論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82在順鉑作用下的卵巢癌細胞中表達的變化論文韓秋峪陸曉媛閆洪超【摘要】目的研究順鉑（cDDP）作用下人卵巢上皮性癌細胞株3AO中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82的表達的變化，初步探討其作用機制。方法采用倒置顯微鏡觀察cDDP作用后3AO細胞形態(tài)學的變化；四甲基偶氮唑藍（MTT）法觀察cDDP對細胞增殖的影響；運用免疫細胞化學方法檢測不同濃度cDDP(1、3、9mg/L3個濃度組)作用的3AO細胞株中KAI1/CD82表達情況,并與細胞對照組（未經(jīng)藥物處理）進行比較。結(jié)果cDDP作用后細胞體積縮小、細胞內(nèi)顆粒增多，細胞核固縮、深染，細胞凋亡；cDDP對3AO
2、細胞的生長抑制作用呈明顯的劑量依賴關(guān)系；cDDP作用后卵巢癌細胞中KAI1/CD82基因的表達較對照組明顯增強。結(jié)論cDDP不僅能增加對卵巢癌細胞的生長抑制率，而且能上調(diào)卵巢癌細胞中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82的表達，為臨床上藥物抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的深入研究提供了有利的實驗依據(jù)。【關(guān)鍵詞】卵巢腫瘤；腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因；KAI1/CD82；卵巢上皮性癌細胞3AO；順鉑Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectofcisplatin(cDDP)onvariationsoftheexpressionofmetastasissuppressorgeneKAI1
3、/CD82inhumanovarianepithelialcancercellline3AOandtomakeapreliminarystudyofthemechanismofcDDP.MethodsFolloinistration,the3AOcellsorphologicallybyinvertedmicroscopy.Methylthiazolyltetrazolium(MTT)assayployedtoobservetheeffectsoncellularproliferation.Ag/L,3mg/Land9mg/L)munocytochemistry(ICH)andtomak
4、eparisonsberincreased,resultinginnuclearpyosis,deep-stainingandcellapoptosis.MTTassaydemonstratedthatcDDPcouldpartiallyinhibitthegroarkeddose-dependenttendency.TheKAI1/CD82proteinexpressionindifferent3AOcellstreatedanovariancancercellline，butalsocouldeffectivelyup-regulateKAI1/CD82expressioninhum
5、anovariancancercellline,entalevidenceforclinicalchemotherapyfortumormetastasis.Keys;tumormetastasissuppressorgene;KAI1/CD82;ovariancancercellline3AO;cisplatin卵巢上皮性癌在所有的婦科惡性腫瘤中具有較高的病死率，其5年生存率始終徘徊在30%左右.freelericanTypeCultureCollection），由徐州醫(yī)學院附屬醫(yī)院中心實驗室凍存。細胞復蘇后培養(yǎng)于含10%新生小牛血清、100kU/L青霉素、100kU/L鏈霉素的RPM
6、I-1640培養(yǎng)液中，在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并傳代。1.1.2試劑RPMI-1640細胞培養(yǎng)基為GibcoBRL公司產(chǎn)品。二甲基亞砜（DMSO）及四甲基偶氮唑藍（MTT）為Sigma公司產(chǎn)品。新生小牛血清為杭州四季青公司產(chǎn)品，使用前經(jīng)56℃滅活30min，置于-20℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。cDDP注射液為貴州漢方制藥有限公司產(chǎn)品，相對分子質(zhì)量為300.05，劑型規(guī)格為每50ml注射液含50mgcDDP及450mg氯化鈉；鼠抗人KAI1/CD82單克隆抗體為NeoMarkers公司產(chǎn)品，購于深圳晶美生物工程有限公司。SP免疫組織化學試劑盒購于福建邁新生物工程有限公司。1.2方法1.2.
7、1細胞的藥物處理將cDDP注射液用生理鹽水溶解成0.05g/L的儲存液，-20℃避光保存。根據(jù)臨床化療使用cDDP的血藥濃度，處理細胞的cDDP濃度梯度分別為1mg/L、3mg/L、9mg/L。1.2.2倒置顯微鏡下觀察不同濃度cDDP作用后細胞形態(tài)變化取對數(shù)生長期的3AO細胞常規(guī)傳代培養(yǎng)于25cm2培養(yǎng)瓶中，2～3天換液1次，待長至60%融合時，分別加入含上述3種濃度藥物的RPMI-1640小牛血清培養(yǎng)液5ml，對照組為不含藥物的
