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《腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因kai1-cd82在順鉑作用下的卵巢癌細胞中表達的變化》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82在順鉑作用下的卵巢癌細胞中表達的變化:韓秋峪陸曉媛閆洪超【摘要】目的研究順鉑(cDDP)作用下人卵巢上皮性癌細胞株3AO中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82的表達的變化,初步探討其作用機制。方法采用倒置顯微鏡觀察cDDP作用后3AO細胞形態(tài)學的變化;四甲基偶氮唑藍(MTT)法觀察cDDP對細胞增殖的影響;運用免疫細胞化學方法檢測不同濃度cDDP(1、3、9mg/L3個濃度組)作用的3AO細胞株中KAI1/CD82表達情況,并與細胞對照組(未經(jīng)藥物處理)進行比較。結(jié)果cDDP作用后細胞體積縮小、細胞內(nèi)顆粒增多,細胞核固縮、深染,細胞凋亡;cDDP對3AO
2、細胞的生長抑制作用呈明顯的劑量依賴關(guān)系;cDDP作用后卵巢癌細胞中KAI1/CD82基因的表達較對照組明顯增強。結(jié)論cDDP不僅能增加對卵巢癌細胞的生長抑制率,而且能上調(diào)卵巢癌細胞中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82的表達,為臨床上藥物抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的深入研究提供了有利的實驗依據(jù)。【關(guān)鍵詞】卵巢腫瘤;腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因;KAI1/CD82;卵巢上皮性癌細胞3AO;順鉑Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofcisplatin(cDDP)onvariationsoftheexpressionofmetastasissuppressorgeneKAI
3、1/CD82inhumanovarianepithelialcancercellline3AOandtomakeapreliminarystudyofthemechanismofcDDP.MethodsFolloinistration,the3AOcellsorphologicallybyinvertedmicroscopy.Methylthiazolyltetrazolium(MTT)assayployedtoobservetheeffectsoncellularproliferation.Ag/L,3mg/Land9mg/L)munocytochemistry(ICH)andtom
4、akeparisonsberincreased,resultinginnuclearpyosis,deep-stainingandcellapoptosis.MTTassaydemonstratedthatcDDPcouldpartiallyinhibitthegroarkeddose-dependenttendency.TheKAI1/CD82proteinexpressionindifferent3AOcellstreatedanovariancancercellline,butalsocouldeffectivelyup-regulateKAI1/CD82expressionin
5、humanovariancancercellline,entalevidenceforclinicalchemotherapyfortumormetastasis.Keys;tumormetastasissuppressorgene;KAI1/CD82;ovariancancercellline3AO;cisplatin卵巢上皮性癌在所有的婦科惡性腫瘤中具有較高的病死率,其5年生存率始終徘徊在30%左右,而局部浸潤和轉(zhuǎn)移則是導致患者死亡的主要原因。我們在研究中發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82在卵巢上皮性癌中的表達與腫瘤的臨床分期、腫瘤分化、轉(zhuǎn)移、癌性腹水密切相關(guān),并且KAI1/C
6、D82基因表達下調(diào)是腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的危險因素之一[1]。因此,在此基礎上,我們期望通過分析能夠激活KAI1基因表達的特異性抗腫瘤藥物,為臨床上藥物治療腫瘤轉(zhuǎn)移提供理論依據(jù)。順鉑(cisplatin,cDDP)自從問世以來已成為卵巢癌化療的核心藥物,其化療效果廣泛得到公認,但對其在抑制腫瘤轉(zhuǎn)移方面的研究目前尚鮮見報道。本研究通過觀察cDDP對卵巢上皮性癌細胞株3AO中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1表達的影響,進而對KAI1基因的激活途徑、作用機制作初步探討。1材料和方法1.1材料1.1.1細胞株人卵巢黏液性囊腺癌細胞株3AO購自ATCC(TheAmericanTypeCultureColle
7、ction),由徐州醫(yī)學院附屬醫(yī)院中心實驗室凍存。細胞復蘇后培養(yǎng)于含10%新生小牛血清、100kU/L青霉素、100kU/L鏈霉素的RPMI-1640培養(yǎng)液中,在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并傳代。1.1.2試劑RPMI-1640細胞培養(yǎng)基為GibcoBRL公司產(chǎn)品。二甲基亞砜(DMSO)及四甲基偶氮唑藍(MTT)為Sigma公司產(chǎn)品。新生小牛血清為杭州四季青公司產(chǎn)品,使用前經(jīng)56℃滅活30min,置于-20℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。cDDP注射液為