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1、孕婦乙型肝炎病毒感染與胎兒宮內(nèi)感染的關(guān)系作者:王淑梅王文光劉廣勤【關(guān)鍵詞】孕婦乙型肝炎病毒感染胎兒宮內(nèi)感染嬰幼兒是乙型肝炎病毒(HBV)的易感人群,而母嬰傳播是一條重要的感染途徑[1]。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測孕婦血清HBV標(biāo)志物,同時(shí)采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQPCR)技術(shù)對不同HBV感染狀態(tài)的孕婦血清和臍血中的HBVDNA進(jìn)行檢測,結(jié)合上述二者作相關(guān)性分析,以探討孕婦HBV感染狀態(tài)對HBV母嬰傳播的影響?! ο笈c方法 1.對象:2005年2月~2007年2月在本院產(chǎn)前門診篩選乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)陽性的孕婦75例為研究對
2、象,其中HBsAg、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)均陽性(簡稱大三陽)的孕婦45例,HBsAg、乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)、HBcAb均陽性(簡稱小三陽)的孕婦30例。2組孕婦肝功能全部正常。于分娩前采集孕婦靜脈血,分離血清貯存于-20℃待測。5 2.臍帶血采集:(1)采集方法。新生兒娩出后,在距臍輪約5~10cm處用止血鉗夾住臍帶的兩端,于兩鉗之間剪斷臍帶,在產(chǎn)婦側(cè)臍帶一端選擇粗大而顯露的的臍靜脈,75%乙醇消毒,用無菌真空采血管的針頭向著胎盤方向穿刺,留取5ml血,作好標(biāo)記送檢。(2)注意事項(xiàng)。采血人員為經(jīng)過專
3、門臍血采集培訓(xùn)的護(hù)士執(zhí)行,注意嚴(yán)格的無菌操作,嚴(yán)密的臍帶消毒,保證避免母血的污染。若雙胎分娩,須待第2胎娩出后方可采血,且2條臍帶血分別采取作好標(biāo)記。 3.血清學(xué)檢測:HbsAg、HbeAg、乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)、HbeAb、HBcAb均采用ELISA檢測(試劑由上海實(shí)業(yè)科華生物技術(shù)有限公司提供),操作按常規(guī)進(jìn)行。HBVDNA的檢測采用PE5700熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)儀(試劑由廣州達(dá)安基因有限公司提供)。(1)DNA提取。取50μl裂解液至1.5ml的離心管中,加待測血清50μl,沸水煮10nim,離心待用。(2)PCR擴(kuò)增。取處理后樣品和
4、定量質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品2μl同時(shí)擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增條件:93℃、2nim預(yù)變性,然后按93℃、30s,55℃、60s,40個(gè)循環(huán)進(jìn)行。(3)檢查值。HBVDNA定量結(jié)果以指數(shù)形式表示,測定范圍為103.0~8.0拷貝/ml,測定熒光值<陰性對照測值+0.4×(臨界陽性標(biāo)準(zhǔn)品測值陰性對照測值)時(shí)為陰性,否則為陽性,陽性結(jié)果含量參與統(tǒng)計(jì)計(jì)算?! ?.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用χ2檢驗(yàn)和四格表確切概率法檢驗(yàn)?! 〗Y(jié)果5 1.大、小三陽孕婦血清及臍血HBVDNA檢出狀況:大三陽孕婦血清HBVDNA和臍血中HBVDNA檢出率均高于小三陽孕婦血清HBVDNA檢出率,差異有統(tǒng)
5、計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表1。表1孕婦HBV感染狀態(tài)與孕婦血清及臍血HBVDNA關(guān)系 2.孕婦血清HBVDNA與臍血中HBVDNA的關(guān)系:47例孕婦血清HBVDNA陽性的不同感染狀態(tài)孕婦,其臍血HBVDNA陽性率為31.9%(15/47),28例孕婦血清HBVDNA陰性者其臍血HBVDNA均為陰性?! ∮懻摗 BV可經(jīng)母體垂直傳播感染胎兒,乙型肝炎宮內(nèi)感染已成為乙型肝炎高發(fā)區(qū)嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生問題。HBV母兒傳播與HBV標(biāo)志物攜帶狀態(tài)有關(guān)[2]。本研究表明,不同HBV感染狀態(tài)孕婦血清、臍血HBVDNA陽性檢出率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(
6、P<0.01)。感染狀態(tài)為大三陽者,其孕婦血清HBVDNA陽性檢出率高達(dá)97.8%,臍血HBVDNA陽性檢出率為33.3%;而感染狀態(tài)為小三陽者,其孕婦血清HBVDNA陽性檢出率為10.0%,臍血HBVDNA陽性檢出率為0。提示大三陽孕婦易發(fā)生母嬰傳播。 目前普遍認(rèn)為血清HBVDNA是反映HBV在體內(nèi)復(fù)制和宿主傳染性的直接指標(biāo)[3]。本文45例血清HBV5DNA陽性孕婦,其對應(yīng)臍血15例檢出了HBVDNA,而孕婦血清HBVDNA陰性者,其臍血中無HBVDNA檢出,進(jìn)一步支持以上論點(diǎn)?! 〗?jīng)垂直感染的嬰兒幾乎全部發(fā)展為慢性HBV攜帶者,
7、其中許多人最終發(fā)展成為肝硬化或肝癌[4]。因此,控制母嬰傳播至關(guān)重要。對育齡婦女普查乙肝血清標(biāo)志物,發(fā)現(xiàn)除有抗HBs以外陽性者,均應(yīng)查血清HBVDNA,對感染HBV的孕婦,產(chǎn)前多次注射乙肝高效免疫球蛋白,以降低胎兒宮內(nèi)感染的發(fā)生率?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】1于廣軍,朱啟熔.乙型肝炎病毒母嬰傳播及其免疫學(xué)預(yù)防的進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué)流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊,1996,23:161. 2朱啟熔,段恕誠,徐華芳,等.乙型肝炎病母從母親到嬰兒的產(chǎn)前傳播[J].中華傳染病雜志,1989,7:159. 3SumazakiR,MotzM,WolfH,etal.Detectionofhe
8、patitisBvirusinseru