面粉中淀粉含量的測定

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1、面粉中淀粉含量的測定（2005年10月3日）作者：草君轉(zhuǎn)貼自：本站原創(chuàng)　　面粉中淀粉含量的測定【摘要】本文從面粉中淀粉含量測定的材料與方法的角度出發(fā)，分別就其測定原理、儀器與設(shè)備、選用試劑以及測定方法與過程重點闡述了酶-酸水解法測定面粉中淀粉的含量。另外，對其他精確測定方法如酸水解法、酶-直接測定法和蒽酮法以及粗測方法的內(nèi)容和特點作了比較和討論。最后就面粉中淀粉含量的測定方法作了展望，隨著儀器分析的發(fā)展，面粉中淀粉含量的測定方法無論是在精度還是在測定速度上必將迎來新的春天?！娟P(guān)鍵詞】淀粉含量測定酶-酸水解法前言本學(xué)期開設(shè)的《工業(yè)發(fā)酵分析》課程給我印象特別深刻，不知是老

2、師還是這門課程本身給我精神上的觸動，或許二者兼而有之。作為工科的學(xué)生，接觸到這類屬于應(yīng)用型且操作性很強(qiáng)的課程，我受到了很大的鼓舞。雖然任課教師李曉雯老師對這篇文章的寫作要求已經(jīng)比較嚴(yán)格了，而我自己則更從思想和行動上嚴(yán)格要求自己把這篇文章寫好。我想，自己作為工科的學(xué)生，這個屬于工科學(xué)生的課程學(xué)習(xí)和鍛煉機(jī)會絕不能浪費(fèi)。于是，通過幾個晚上的資料查找、語言組織和修改，終于完成了如下的文章。懇請老師和同學(xué)多多批評、指正，畢竟自己是第一次寫這樣的關(guān)于應(yīng)用性很強(qiáng)的文章。材料與方法一、測定原理面粉經(jīng)除去蛋白質(zhì)、脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸將雙糖水解成單糖，

3、最后按還原糖測定，并折算成淀粉（酶-酸水解法）。二、儀器與設(shè)備分析天平1臺、恒溫水浴鍋1臺、電爐1臺、堿式滴定管1支、容量瓶（250ml1和100ml各個）、250ml錐形瓶若干、大小燒杯若干、不同容量的移液管若干和洗耳球等。三、選用試劑除特殊說明外，實驗用水為蒸餾水，試劑為分析純。1、干燥面粉。2、乙醚、85%乙醇、甲基紅指示劑。3、0.5%淀粉酶溶液：稱取淀粉酶（Sigma公司，E.C3.2.1.1）0.5g，加100ml水溶解，加入數(shù)滴甲苯或三氯甲烷，防止長霉，貯于冰箱中。（注：配成溶液的淀粉酶破壞很快，最好現(xiàn)用現(xiàn)配）。3、碘溶液：稱取3.6g碘化鉀溶于20ml

4、水中，加入1.3g碘，溶解后加水稀釋至100ml。4、6mol/L鹽酸、5mol/L氫氧化鈉溶液、0.1mol/L氫氧化鈉溶液。5、斐林試劑：稱取15g硫酸銅及0.05g次甲基藍(lán)溶于水中，并稀釋至1000ml得斐林甲；稱取50g酒石酸甲鈉及75g氫氧化鈉，溶于水中再加4g亞鐵氰化鉀，完全溶解后，用水稀釋至1000ml得斐林乙。6、乙酸鋅溶液：稱取21.9g乙酸鋅，加3ml乙酸，加水溶解并稀釋至1000ml。7、10.6%亞鐵氰化鉀溶液。8、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：用分析天平精密稱取1.000g經(jīng)98～100℃干燥至恒重的純葡萄糖，加水溶解后，加5ml鹽酸，并以水稀釋至1000

5、ml，此液每毫升相當(dāng)于1mg葡萄糖（C%=0.1%）。四、測定方法與過程1、樣品溶液的制備稱取面粉2.5g左右置于燒杯中，加水50ml于燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20ml淀粉酶溶液，再55～60℃保溫1h，并時時攪拌（注：溫度過高，淀粉酶的活性破壞）。然后取1滴此液加1滴碘溶液，應(yīng)不現(xiàn)藍(lán)色，若顯藍(lán)色，再加熱糊化并加20ml淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止。加熱至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，（樣品內(nèi)如含較多蛋白質(zhì)、脂肪、色素和膠體等可加乙酸鋅溶液直至沉淀完全為止，再加入亞鐵氰化鉀溶液至不再產(chǎn)生沉淀

6、為止），加水至刻度，搖勻，過濾（注：此時淀粉已水解成雙糖，過濾可去除殘渣及其他沉淀物質(zhì)）。棄去初濾液，取50ml濾液，置于250ml錐形瓶中，加5ml的6mol/L鹽酸，在60～70℃水浴中水解20min左右，冷后加2滴甲基紅指示劑，再加5mol/L氫氧化鈉溶液至無色，再加一滴鹽酸進(jìn)行回滴變紅即可，并加0.1mol/L氫氧化鈉溶液至溶液無色即得中性溶液，溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混勻備用（淀粉在沸水浴條件下糊化是淀粉水解的第一步反應(yīng)，然后在淀粉酶的作用下，分解成短鏈淀粉、糊精、麥芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需

7、用酸進(jìn)一步水解得到葡萄糖）。2、斐林試劑的標(biāo)定吸取已配置好的斐林試劑甲、乙各5ml并加10ml水和潔凈玻璃珠2顆于錐形瓶中并在石棉網(wǎng)上加熱至沸騰，用標(biāo)準(zhǔn)的葡萄糖溶液進(jìn)行預(yù)滴定，先快后慢滴定至溶液藍(lán)色褪去，記錄用量；正式滴定時，先加入比預(yù)滴定少0.5～1.0ml的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液，2min內(nèi)煮沸，用葡萄糖溶液滴定到藍(lán)色褪去（1min內(nèi)完成），記錄消耗葡萄糖溶液的量，再做一個平行實驗取兩次記錄量的平均值V1。3、樣品溶液的滴定吸取已配置好的斐林試劑甲、乙各5ml并加10ml水和潔凈玻璃珠2顆于錐形瓶中并在石棉網(wǎng)上加熱至沸騰，用處理好的樣品進(jìn)行預(yù)滴定，先快后