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《hplc法測定蜜煉甘草良咽含片中總皂苷的含量》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、HPLC法測定蜜煉甘草良咽含片中總皂苷的含量【】目的建立HPLC法測定蜜煉甘草良咽含片中總皂苷的含量。方法采用HPLC法。以AgilentZORBAXSB-C18（250mm×4.6mm，5μm）為色譜柱；流動相：0.02%磷酸溶液：乙腈（80：20）；流速：1.0ml/min；檢測波長：205nm。結(jié)果總皂苷（以人參皂苷Re計）在800-6400ug之間呈良好，線性關(guān)系回歸方程：Y=82476.250X-318.56，r=0.9993（n=5）；平均回收率為97.1%，RSD=1.15%（n=6）
2、。結(jié)論本法分離度好，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，可用于測定蜜煉甘草良咽含片中總皂苷的含量?！ 娟P(guān)鍵詞】HPLC法；蜜煉甘草良咽含片；總皂苷；含量 蜜煉甘草良咽含片是以烏梅、羅漢果、青果、金銀花等為主要原料制成的保健食品，而羅漢果中的總皂苷具有清咽潤喉的功效，目前《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003年版）紫外分光光度法測定中總皂苷的含量，試劑氣味刺激，操作復(fù)雜，結(jié)果不夠準(zhǔn)確。本文采用HPLC法測定蜜煉甘草良咽含片中總皂苷的含量，操作簡單，準(zhǔn)確。 1儀器與試藥 島津LC-20AT型高效液相色譜儀，島
3、津SPD-20A紫外檢測器，島津SIL-20A自動進(jìn)樣器，CTO-10AS色譜工作站。METTLERAE240電子天平，JAC-300超聲波清洗機(jī)。 蜜煉甘草良咽含片（批號20110906，20111202，20120104）人參皂苷Re對照品（中國藥品生物制品檢定所），乙腈為色譜純，其他為分析純，水為超純水?！ ?方法與結(jié)果 2.1色譜條件色譜柱：AgilentZORBAXSB-C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：0.02%磷酸溶液：乙腈（80：20）；流速：1.0ml/m
4、in；檢測波長：205nm；進(jìn)樣量：20ul；柱溫：30℃。理論板數(shù)按人參皂苷Re計算不低于2000?！ ?.2溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品400.03mg，置10ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，制成40mg/ml對照品貯備液。精密稱取供試品（相當(dāng)于人參皂苷Re0.2g），置25ml的量瓶中，加水適量，超聲30分鐘，加水稀釋至刻度，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，用水飽和正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm
5、微孔濾膜過濾，即得供試品溶液?！ ?.3方法學(xué)考察線性關(guān)系的考察：精密量取人參皂苷Re（40mg/ml）對照品貯備液0.2，0.4，0.8，1.2，1.6.ml，分別置10ml的量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按上述色譜條件，分別進(jìn)樣20ul，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），得回歸方程：Y=82476.250X-318.56，r=0.9993（n=5）。結(jié)果表明，在800-6400μg范圍內(nèi)，人參皂苷Re峰面積值與進(jìn)樣量有良好的線性關(guān)系?！ 【芏葘嶒灒壕芰咳φ掌焚A備溶液1ml，置
6、10ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，重復(fù)進(jìn)樣5次，測定其峰面積，結(jié)果RSD分別為0.59%，表明儀器精密度良好?！ 》€(wěn)定性實驗：取供試品溶液（批號20120104）別于0，2，4，6及8h，分別進(jìn)樣20μl，測得供試品中人參皂苷Re峰面積值并計算。結(jié)果RSD為1.62%（n=5），實驗表明，供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。 重復(fù)性實驗：取同一批供試品溶液5份，依法測定峰面積。結(jié)果RSD為0.85%，表明本方法重復(fù)性良好?！ 】瞻赘蓴_試驗：按溶液制備方法制備不含羅漢果的陰性對照溶液，按上述色譜條
7、件測定，結(jié)果在陰性對照溶液中，與人參皂苷Re保留時間處無色譜峰出現(xiàn)。 加樣回收率實驗：精密量取6份已知含量的供試品（批號20120104）2ml，分別加入人參皂苷Re（4mg/ml）對照品溶液0.5ml，1.0ml，1.5ml各2份，按上述供試品制備方法和色譜條件，制備加樣回收供試品溶液并注入高效液相色譜儀，回收率平均值為97.1%，RSD為1.15%（n=6）。結(jié)果加樣回收良好?！ 」┰嚻泛繙y定：取3批供試品，按供試品溶液制備方法制備供試液，用0.45μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液20ul，記錄色
8、譜峰峰面積，以外標(biāo)法計算，測定人參皂苷Re的含量。結(jié)果批號20110906，20111202，201201043批供試品人參皂苷Re含量分別為3.95，4.32，3.80mg/g?！ ?討論 用HPLC法測定蜜煉甘草良咽含片中總皂苷的含量，同紫外分光光度法比較，快速，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好?！ ”痉ㄔ跇悠诽崛》椒ㄖ性囉眠^正丁醇，75%乙醇，以及通過Amberlite-XAD-2大孔樹脂等幾種方法，實驗結(jié)果表明用正丁醇提取的樣品回收率高?！ √崛〈螖?shù)考察：按照溶液制備的測【
