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1、EB病毒檢測與EB病毒感染診斷的研究[]目的：探討EB病毒檢測在EBV感染診斷當(dāng)中的臨床意義。方法：使用酶聯(lián)免疫吸附法及其熒光定量PCR方法同步檢測76例疑診EBV感染患兒住院時及起病1、3、6、9個月血漿當(dāng)中EBVVCR-IgM及其外周血全血、單個核細(xì)胞當(dāng)中EBVDNA，有效比較EBV感染患者病程當(dāng)中4種檢測方法的檢出率。結(jié)果：在疑診EBV的感染初期，全血及其PBMC當(dāng)中ENVDNA陽性率比較高，與EBVVCR-IgM及其血漿EBVDNA相比較，會存在顯著的差異性；在起病之后的1、3、6、9個月，4種檢出的方法陽性率逐漸的降低，但是PBMC當(dāng)中EBVDNA敏
2、感性會高于其他的3種方法。結(jié)論：EBV感染的初期，通過檢查，檢測全血和PBMC當(dāng)中EBVDNA是最為快速、敏感的檢測方法；EBV可長期的存在于PBMC當(dāng)中，通過熒光定量PCR方法檢測外周血PBMC中EBVDNA對于EBV感染診斷有著非常重要的價值，能夠作為判斷療效及其監(jiān)測病情的重要手段。 [關(guān)鍵詞]EB病毒檢測；EB病毒感染；研究 一般來講，EB病毒是小兒感染性疾病非常常見的病原體，感染時的癥狀不一，主要表現(xiàn)為傳染性單核細(xì)胞增多癥。EBV還可能會擴(kuò)散到全身的各個系統(tǒng)，很容易引起組織細(xì)胞增生癥、吞噬細(xì)胞綜合征等比較嚴(yán)重的疾病。文章主要研究EBV檢測在EBV感
3、染診斷當(dāng)中的臨床作用和意義?！ ?資料與方法 1.1資料 選取了2008年7月至2010年7月收治的疑診EBV感染患兒76例為研究對象，其中男40例，女36例，年齡一般在7個月到1.5歲，平均年齡是1.3歲。在進(jìn)入醫(yī)院時都屬于出診病例，入院前并沒有進(jìn)行過治療。臨床表現(xiàn)都有發(fā)熱現(xiàn)象，有咽峽炎，免疫缺陷或者抑制的患兒不應(yīng)該在研究的范圍之內(nèi)。 1.2研究方法 應(yīng)該與患兒入院時及其發(fā)病1、3、6、9個月隨訪時，分別需要采血檢測血清EBVVCA-IgM，全血、外周血單個核細(xì)胞EBVDNA。（1）抽取1ml外周血注入到干凈的試管中，等自然凝固之后，進(jìn)行低速離線，取
4、血清1：10進(jìn)行稀釋，采用ELISA法檢測血清的EBVVCA-IgM，此步操作需要嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。（2）取外周血3ml加入到EDTA抗凝管當(dāng)中，1600g離線之后分離上層血液，用淋巴細(xì)胞分離也從全血當(dāng)中分離出單個核心包，放在低溫當(dāng)中保存。每一例患兒都需要取50ul血漿、單個核細(xì)胞混懸液及其全血，利用全血基因組提取試劑盒抽取DNA，方法需要按照說明來做。（3）利用熒光定量PCR法擴(kuò)增EBV基因，應(yīng)用PTC-100TM型PCR儀器檢測全血、血漿及其PBMCEBVDNA的含量。 2結(jié)果 在疑診EBV的感染初期，全血及其PBMC當(dāng)中ENVDNA陽性率比較
5、高，與EBVVCR-IgM及其血漿EBVDNA相比較，會存在顯著的差異性；在起病之后的1、3、6、9個月，4種檢出的方法陽性率逐漸的降低，但是PBMC當(dāng)中EBVDNA敏感性會高于其他的3種方法?！ ?討論 EBV是一種DNA病毒，廣泛的存在于自然界當(dāng)中，是一種普遍感染人類的病毒，具有著潛伏性。EBV感染是患兒長期發(fā)熱的原因之一，感染后主要表現(xiàn)為傳染性單核細(xì)胞增多癥，一些患兒的病情得不到控制，感染會引發(fā)其他的惡性疾病。因此，早期診斷及其治療顯得十分的重要?！ ”疚难芯?，PBMC和全血當(dāng)中的EBV檢出率明顯高于血漿，但是PBMC和全血當(dāng)中的EBV檢出率卻是基本一
6、致。血漿EBVDNA監(jiān)測主要是旨在檢測游離在血漿當(dāng)中的病毒，表示有病毒血癥，不能夠檢測出血細(xì)胞當(dāng)中細(xì)帶的病毒，所以血漿EBVDNA陽性率要遠(yuǎn)低于全血及PBMC。PBMC主要指的是T細(xì)胞，同時也包括B、NK、單核細(xì)胞等等。EBV有著嗜B細(xì)胞的特性，經(jīng)過研究證明，EBV除感染B細(xì)胞以外，同時還感染T細(xì)胞及其NK細(xì)胞，從而引起這些細(xì)胞的增值，導(dǎo)致了NK細(xì)胞功能受損等多種免疫缺陷。EBV感染一般只是侵犯體內(nèi)淋巴系統(tǒng)，B細(xì)胞上部具有EBV受體，EBV在感染之后B細(xì)胞首先會受到累及，但是B細(xì)胞并沒有復(fù)制的功能，主要成為了儲藏庫，之后T細(xì)胞產(chǎn)生了強(qiáng)烈的反應(yīng)，導(dǎo)致了炎癥介質(zhì)的
7、高水平分泌，出現(xiàn)了T細(xì)胞分化異常?！ BV可持續(xù)感染單個核細(xì)胞，EBV感染患兒主要表現(xiàn)出多系統(tǒng)損傷可能會與PBMC當(dāng)中的EBV感染有關(guān)系。EBV感染急性期治療之后，雖然患兒的體溫會降低至正常水平，臨床的病癥也基本消失，但是部分EBV感染細(xì)胞依然會逃避免疫監(jiān)視并且建立起持續(xù)EBV感染的細(xì)胞庫。EBV的長期存在會造成機(jī)體免疫功能的紊亂，與慢性感染狀態(tài)的發(fā)展有著密切的關(guān)系。在一些EBV感染患兒的后期，血漿當(dāng)中的EBVDNA呈現(xiàn)陰性，但是PBMC卻是呈現(xiàn)陽性，這類患兒可能體內(nèi)的病毒復(fù)制處在一個低谷階段，血漿當(dāng)中存在的EBV的量很低，病毒大多數(shù)是隱藏在細(xì)胞當(dāng)中。PBM
8、C當(dāng)中的EBV可以作為潛在的病毒科，成
