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1、大蒜的薄層色譜鑒別研究論文.freelsativumL.的鱗莖,在我國有著悠久的使用歷史。大蒜的有效成分為含硫的一系列化合物。大蒜的鱗莖中主要的含硫化合物是S-烯丙基半胱氨酸硫氧化合物——蒜氨酸[1,2]。國內外已上市的大蒜制劑近幾十種之多,但各種制劑原料的來源有所不同,而導致制劑質量的差異。為從源頭控制大蒜藥材質量,本文采用TLC法對大蒜進行定性鑒別。1材料陳蒜:陳蒜1號(編號0501).freell無水乙醇溶解,即得。BP211電子天平(德國賽多利斯);SK2200LH超聲波振蕩儀(上??茖С?/p>
2、儀器有限公司)西貝樂SQ2119C型多功能食品加工機(上海帥佳電子科技有限公司)。2方法與結果2.1方法2.1.1蒜氨酸對照品溶液的制備精密稱取蒜氨酸對照品0.01g置于10ml量瓶中,甲醇-水(1∶1)溶解,定容至刻度(每毫升含蒜氨酸對照品1mg)。2.1.2供試品溶液的制備采用水煮滅活蒜氨酸酶和甲醇滅活蒜氨酸酶法,制備樣品,確定樣品的制備方法。方法1:去皮蒜10g,甲醇50ml打碎15s,轉移至250ml錐形瓶中,加入50ml水,在超聲器中超聲15min,精密吸取10ml,濃縮至5ml,備用。方
3、法2:去皮蒜10g,水煮10min,加水50ml打碎15s,轉移至250ml錐形瓶中,加入50ml水,在超聲器中超聲15min,精密吸取10ml,濃縮至5ml,備用。2.1.3展開系統(tǒng)的選擇薄層板:硅膠G薄板;展開劑:正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水(3∶1∶1∶1),正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1);顯色劑:0.2%茚三酮,在105℃加熱5min后日光下觀察。見圖1。2.1.4蒜氨酸對照品、大蒜樣品點樣量的選取蒜氨酸對照品(1ml)5,10,3μl點樣,確定點樣量。大蒜供試品點樣量5,10,2μl點樣,
4、確定點樣量。圖1不同制備方法大蒜供試液的薄層色譜圖(略)2.1.5蒜氨酸對照品與3批大蒜樣品同板對照蒜氨酸對照品(1mg/ml)點樣5μl,大蒜樣品點樣量2μl對照并驗證點樣量。2.1.612批大蒜樣品的薄層色譜圖蒜氨酸對照品(1mg/ml)點樣量5μl,大蒜樣品點樣量2μl,進行薄層展開,噴顯色劑后觀察。2.2結果2.2.1樣品溶液制備的確定通過薄層實驗確定水煮滅活蒜氨酸酶和甲醇滅活蒜氨酸酶對大蒜樣品溶液的制備差別不大。因此遵從簡單、快速的原則,確定大蒜供試液的制備方法為:去皮蒜10g,甲醇50m
5、l打碎15s,轉移至250ml錐形瓶中,加入50ml水,在超聲器中超聲15min,精密吸取10.0ml,濃縮至5ml,備用。2.2.2點樣量的選擇點樣量的確定:蒜氨酸對照品(1mg/ml)點樣量約為5μl;大蒜供試液點樣量約為2μl。色譜見圖2~3。圖2蒜氨酸對照品薄層色譜圖(略)2.2.3蒜氨酸對照品和大蒜供試液對照確定點樣量實驗確定蒜氨酸對照品點樣量5μl,大蒜樣品點樣量2μl,蒜氨酸對照品與大蒜樣品供試液在同一位置顯相同顏色的斑點。見圖4。2.2.4蒜氨酸對照品和大蒜3批樣品驗證點樣量和展開系
6、統(tǒng)實驗驗證了展開系統(tǒng):正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水(3∶1∶1∶1)、展開系統(tǒng):正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1)都較好,蒜氨酸對照品點樣量確定為5μl,大蒜供試液點樣量確定為2μl。見圖5。圖3大蒜供試液不同點樣量薄層色譜圖(略)圖4蒜氨酸對照品和大蒜供試液薄層色譜圖(略)圖5蒜氨酸對照品和3批大蒜供試液薄層色譜圖(略)2.2.512批大蒜樣品薄層色譜圖12批大蒜樣品均用展開系統(tǒng):正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水(3∶1∶1∶1)、正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1)展開;蒜氨酸對照品點樣量5μl,大蒜12批樣
7、品點樣量2μl;顯色劑為0.2%茚三酮。結果表明,展開系統(tǒng):正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水(3∶1∶1∶1)顯色點較深。除此之外無太大差異。從溶劑的配比情況和樣品的展開效果,可以選用展開系統(tǒng)正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1)。見圖6~7。圖6蒜氨酸對照品和12批大蒜樣品供試液薄層色譜圖(略)圖7蒜氨酸對照品和12批大蒜樣品供試液薄層色譜圖(略)3討論通過本實驗最終確定:以蒜氨酸為對照品,以甲醇滅活蒜氨酸酶制備樣品的供試液,采用正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1)為展開系統(tǒng),噴以0.2%茚三酮顯色,105℃加熱
8、5min后日光下觀察,其中確定蒜氨酸對照品(1mg/ml)的點樣量為5μl,大蒜供試液的點樣量為2μl,在相同的比移值處,蒜氨酸對照品和大蒜供試液呈現相同顏色的斑點。文中所建的方法簡單可行,重復性好,可用于大蒜藥材的質量控制。【