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1、梅毒的實驗室檢查梅毒的定義梅毒是一種慢性傳染性疾病。是由梅毒螺旋體(蒼白螺旋體)引起,患病后病程漫長,早期侵犯生殖器和皮膚,晚期侵犯全身各器官,并生多種多樣的癥狀和體征,病變幾乎能累及全身各個臟器。病原體為梅毒螺旋體,屬于密螺旋體屬,蒼白密螺旋體蒼白亞種(Treponemapallidumsubspeciespallidum)蒼白亞種梅毒蒼白螺旋體地方亞種地方性梅毒極細亞種雅司病密螺旋體屬品他螺旋體品他病梅毒螺旋體的生物學特性1、直徑0.10~0.15μm,有8~14個致密而規(guī)則的小螺旋,兩端尖直。2、原
2、生質圓柱體上緊繞著3~4根周漿鞭毛,故運動活躍,運動方式多樣。3、G-,但不易著色。Fantana鍍銀染色呈棕褐色。4、在無活細胞的人工培養(yǎng)基中難培養(yǎng),生長慢。5、抵抗力極弱,對溫度和干燥特別敏感;對青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗生素敏感。在干燥條件下不易生存。肥皂水和一般消毒劑以及加溫42℃以上均極易將其殺滅。傳播途徑性接觸是主要的傳染途徑未經治療的患者在感染后的1年內最具有傳染性隨著病期的延長,傳染性越來越小到感染后2年,通過性接觸一般無傳染性母嬰傳播在妊娠7周時,梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染未經治療者,雖
3、已無性傳播(病期>2年),但妊娠時仍可傳染給胎兒病期越長,傳染性越小;輸血傳染間接傳播:日常用品、接吻、哺乳、醫(yī)療器械等途徑(接觸部位附有梅毒螺旋體)。免疫性特異性抗體感染2周后產生特異性IgM抗體,不能通過胎盤感染4周后出現特異性IgG抗體,可通過胎盤非特異性抗體刺激機體產生抗心磷脂抗體/反應素RPR和TRUST等方法可檢出:5~7周或硬下疳后2~3周完全治愈的早期梅毒可再感染梅毒的分期梅毒的診斷梅毒的診斷早期梅毒(一期、二期和早期隱性梅毒)和晚期梅毒(三期和晚期隱性梅毒)必須依靠病史、癥狀及實驗檢查進
4、行綜合分析梅毒的實驗室檢查結果對診斷有決定性意義常用梅毒實驗室檢測方法病原學檢測法:(1)暗視野顯微鏡檢查(2)鍍銀染色檢查血清學檢測法:非梅毒螺旋體抗原血清試驗(1)VDRL(性病研究實驗室試驗):需滅活(2)USR(不加熱血清反應素試驗)(3)RPR(加速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗)(4)TRUST(甲苯胺紅不加熱血清試驗)梅毒螺旋體抗原血清試驗(1)FTA-ABS(2)TPPA/TPHA(3)TP-ELISA(4)發(fā)光法(5)膠體金法暗視野顯微鏡檢查標本類型:梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損的滲出液、
5、淋巴結穿刺液方法:暗視野顯微鏡下查找梅毒螺旋體。結果:典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光,其螺旋較密而均勻。運動方式:①伸縮其螺旋間距離而移動(主要方式)②蛇行式③旋轉式評價:①.簡單、可靠。②.早期:硬下疳(梅毒血清學試驗仍陰性)。③.陰性不能排出患梅毒的可能性暗視野顯微鏡下的梅毒螺旋體鍍銀染色檢查基本原理:梅毒螺旋體具有親銀性,可被銀溶液染色,從而可以在鏡下觀察到梅毒螺旋體結果:棕褐色的梅毒螺旋體病原學檢查的臨床意義病原學方法直接鏡檢到梅毒螺旋體,在臨床可確診梅毒,且具有快速、方便、易操作的特點。螺旋體檢查是
6、診斷早期現癥梅毒的最佳方法,對于患者的早期診斷、及時治療、預后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體,并不能排除患梅毒的可能性。非梅毒螺旋體抗原血清學試驗原理(抗心磷脂抗體):人體感染了梅毒螺旋體后,組織受到破壞,釋放出來的一種類脂成分,與梅毒螺旋體結合形成完全抗原,刺激機體產生類脂質抗體(反應素)。主要是IgM和IgG混合抗體??贵w產生時間感染3周-4周,硬下疳出現1周-2周一般在感染后5~7周(或硬下疳出現后2~3周)產生??贵w作用無保護作用,治療監(jiān)測。未經治療的病人,其血清內的反應素
7、可長期存在。經正規(guī)治療后,反應素可以逐漸減少至轉為陰性。梅毒自動旋轉儀四種非特異性試驗方法比較VDRLUSRRPRTRUST抗原成分心磷脂、卵磷脂、膽固醇同前+EDTA+氯化膽堿同前+EDTA+氯化膽堿+活性炭同前+EDTA+氯化膽堿+甲苯胺紅抗原穩(wěn)定性不穩(wěn)定,1天穩(wěn)定4℃~8℃保存12個月穩(wěn)定4℃~8℃保存12個月穩(wěn)定4℃~8℃保存12個月血清試驗前處理需滅活不需滅活不需滅活不需滅活反應板及結果判斷玻片,肉眼或顯微鏡玻片,肉眼或顯微鏡紙卡片,肉眼紙卡片,肉眼注釋唯一用于檢查腦脊液的試驗,診斷神經梅毒結果
8、容易判斷結果容易判斷一期敏感性(未經治療)74%-87%77%-88%77%-99%77%-99%二期敏感性(未經治療)100%100%100%100%晚期敏感性(未經治療)98%99%98%99%檢測流程(定性)加樣:吸取50μl血清(漿)放在卡片圈中,并均勻地涂布在整個圈內。加抗原:將抗原輕輕搖勻,用試劑盒提供的針頭加1滴抗原。反應:將卡片置梅毒自動旋轉儀8分鐘立即在亮光下觀察結果。檢測流程(定量)稀釋液準備:在圈內加入5